溶化:培养基放入烧杯或瓷缸中,慢慢加入少量所需水,边加入边用玻璃棒搅拌。如果培养基中不含有琼脂,培养基不需要加热;如果含有琼脂,则需要用本生灯或电磁炉加热煮沸,完全溶解后,再补齐所需水,并搅拌均匀。如果配置的培养基量很大,可用不锈钢锅加热溶化,可先用温水加热并随时搅动,防止焦化,如有焦化现象,配制的培养基就不能使用,要重新配制。配制培养基时不可用铜或铁的容器溶化,因铜或铁制容器可能会使培养基中的铜和铁的含量超标,影响实验(培养基中铜含量大于0.3mg/L,细菌不宜生长,铁含量超过0.14mg/L,妨碍细菌产有害)。对容易发生反应,产生沉淀的药品,要分开溶解,较后加入培养基,如磷酸二氢钾和硫酸镁。干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。辽宁Systec培养基制备器
培养基配制后一般都有沉渣或混浊出现医学,需过滤成清晰透明后方可使用,常用的过滤方法如下:1.液体培养基:液体培养基必须清晰,以便观察细菌的生长情况,常用滤纸过滤,亦可在加热前加入用水稀释的鸡蛋白(1000ml培养基用1个鸡蛋白)在100℃加热后保持60~70℃,40~60分钟,使其不溶性物质附于凝固的蛋白上而沉淀,然后再用虹吸法吸出上清液或以滤纸过滤。2.固体培养基:如系琼脂培养基,于加热融化后需趁热以绒布或两层纱布中夹脱脂棉过滤;亦可用自然沉淀法,即将琼脂培养基盛人铝锅或广口搪瓷容器内,以高压(103.43kPa)蒸汽融化15分钟后,静置高压锅内过夜,次日将琼脂倾出,用刀将底部沉渣切去,再融化即可收清晰的琼脂培养基。辽宁Systec培养基制备器培养基制备器不存在意外打开,保证了环境和操作者的安全。
培养基的类别按照培养基的物理状态分:培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。(1)古体培养基。是在培养基中加入凝固剂,有琼脂、明胶、硅胶等。古体培养基常月于微生物分离、鉴定、计数和菌种保存等方面。(2)液体培养基。液体培养基中不加任何凝固剂。这种培养基的成分均匀,微生物能充按标准中规定的培养时间和温度对接种后的平板进行培养,目标菌应呈现良好生长,并有典型的菌落外观、大小和形态,非目标菌应是微弱生长或无生长。
培养基的脱气:必要时,在使用前将养基放到沸水浴或蒸汽浴中加热15min,加热时松开容器盖子;加热后盖紧盖子,并迅速冷却至使用温度。3.添加成分的加入:对热不稳定的添加成分应在培养基冷却至47℃~50℃时加入,灭菌的添加成分加入前应冷却至室温,避免冷的液体会造成琼脂凝胶或形成片状物。4.培养基的弃置:所有污染和未使用的培养基的弃置应采用安全的方式,并符合相关法律法规的规定。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中,随该批培养基同时灭菌,以为测定该批培养基较终pH之用。制备培养基的操作要点:易于控制微生物的生长代谢状态。
高效而强大的加热和制冷系统:功能强大的加热器,能够迅速加热;快速制冷是通过循环水和压力(加入内部的软化水产生的)所进行的。利用与外部水连接的盘状热交换器,能够使内部迅速冷却,整个过程包括:加热、灭菌和冷却(至50°C),依据容器的大小、培养基的数量和冷却水的温度,只需60-120分钟即可完成。负载的压力,有效地避免了培养基过温失效和培养基中气泡的产生。空气压缩机是内置的。全自动控制程序,确保内部温度均一,从而保证了配制和灭菌的培养基具有更高的质量,整个过程,在一个设定温度内,从z初的加热到混合和灭菌,z后到冷却,都是微处理器控制的,而且灭菌之后保持的温度是可以预设的。杀菌剂装入口宽大,并附有保险锁。杀菌剂可从此口加入,也可用注射器从硅酮膜注入。使用商品化脱水合成培养基制备培养基时,应严格按照厂商提供的使用说明配置。辽宁Systec培养基制备器
液体培养基:为确定液体培养基的生长率,应接种适当的培养物。辽宁Systec培养基制备器
微生物检验培养基制备的要点:对LST培养基进行灭菌时,发酵管内可能存在气泡。为了防止发酵管内形成气泡,可以采取以下措施:倒置的小管充满培养基,不留气泡,然后加入含有LST的试管中。在关闭杀菌锅的排气阀之前,将锅内的气体排空。试管塞不要塞得太紧。使用硅胶塞时,请勿使用橡胶塞。不可过早打开杀菌锅,等杀菌锅内的气压和温度降到与室温相同或相差不大时再打开杀菌锅。如果按照以上方法操作还有气泡,可以用水作为培养基组的对照试验。如果培养基组有气泡,对照组没有气泡,可以确定培养基本身原因。辽宁Systec培养基制备器