利用三角培养瓶制备培养基:包扎,分装好后,塞上棉塞,在用牛皮纸将棉塞包裹好,防止灭菌时水份进入把棉塞弄湿。灭菌,按配方上要求的温度、压力进行高压蒸汽灭菌。如果灭菌的温度太高,营养成分会被破坏,培养基中的糖、氨基酸会使培养基的颜色变深。摆斜面,灭菌后需要摆斜面的试管要趁热斜着摆放,使其凝固成为一个斜面,约占试管长度的1/2。贮存,培养基在30℃下放置,无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。培养基是细胞生长的必需营养物质,利用三角培养瓶制备培养基可按照以上步骤操作,在使用前需确保培养基的无菌性,以免影响细胞正常繁殖。全自动培养基制备仪主要特点:灭菌-加热-搅拌-混合-冷却一体化控制。贵州培养基制备器哪家好
微生物检验培养基制备的要点:培养基溶化,将中海培养基纳入烧杯容器中,加小适量的水,缓慢加水并用玻璃棒小幅度搅拌。倘若培养基中不含琼脂,则不需要对培养基加热;相反含有琼脂,就需要用本生灯/电磁炉加热煮沸。待培养基完全溶解后再加入适量的水搅拌均匀。如准备的北京中海培养基较多,在不锈钢锅中融化加热,可以用温水加热,需不停搅拌,防止焦化。如果不小心出现焦化现象,则制备好的培养基将无法使用,必须重新配制中海生物培养基。不要使用铜或铁容器溶解制备培养基,因为铜或铁容器可能会导致容器内培养基中铜、铁超标,影响实验结果,其中培养基中铜含量大于0.3毫克每升,细菌不适宜生长。铁含量超过0.14毫克每升,防止细菌产生有毒的。容易发生反应和沉淀的药物应单独溶解,然后加入培养基中,如磷酸氢二钾和硫酸镁。内蒙古琼脂培养基 培养基制备器异养微生物的合成能力较弱,不能以CO2作为碳源或主要碳源,故应在培养基中至少添加一种有机物。
⑴倒置的小管充满培养基,不留气泡。⑵在关闭杀菌锅的排气阀之前,将锅内的气体排空。⑶试管塞不要塞得太紧。使用硅胶塞时,请勿使用橡胶塞。⑷不可过早打开杀菌锅,等杀菌锅内的气压和温度降到与室温相同或相差不大时再打开杀菌锅。如果按照以上方法操作还有气泡,可以用水作为培养基组的对照试验。如果培养基组有气泡,对照组没有气泡,可以确定培养基本身原因。为有效体现培养基其生物学特性,其制备生长及繁殖需要特定的PH范围。
培养基的实验室制备:1.水:除特定要求,实验室用水的电导率在25℃下应不高于25uS/cm(相当于电阻率≥0.4MΩcm)。微生物污染应不超过103CFU/mL,较好低于102CFU/mL。应根GB/T5750.12或其他有效方法,定期检验微生物的污染。2.称量和复水:称量所需量的脱水培养基(注意防止吸入粉末,尤其是含有有害物质的培养基粉末),先加入少量水,充分混合(注意避免培养基结块)后再加水至所需的量。3.溶解和分装:脱水培养基加水后适当加热,并不搅拌使其快速溶解,必要时,重新溶解。含琼脂的培养基在加热溶解前应浸泡几分钟。液体培养基:为确定液体培养基的生长率,应接种适当的培养物。
培养基的灭菌:培养基的灭菌多采用高压蒸汽灭菌,各种培养基的灭菌时间和压力,按其成分不同而定。普通培养基采用121℃、灭菌15min,但容器和装量较大时,应延长至20min。含糖培养基115℃、灭菌30min。含糖、血清、鸡蛋等培养基可用流动蒸汽及血清凝固器80—100℃、30min,连续3d,间歇灭菌。血清或组织液,采用低热56—58水浴1h,连续5—6d灭菌,一些遇高温即被破坏的物质如尿素、腹水等,可用细菌过滤器,过滤除菌。高压灭菌应严格按照操作规程执行,必须逐渐加热,彻底排除灭菌器内的空气,再逐渐升压保持预定的压力和时间,达到全部杀灭微生物。以上的灭菌时间和温度要经过验证确认,如不同类型培养基混合一起灭菌时宜采用115℃、灭菌30min为好。为防止冷凝水过多,也可将培养基冷却至45 ~ 50°C再倒平板。西藏自动搅拌培养基制备器
。液体培养基是培养基物理分类一种,是相对固体培养基而言的,是微生物或动植物细胞的液状培养基。贵州培养基制备器哪家好
培养基配制:配制用水,培养基的大部分是水,所以水的质量直接影响培养基的质量。按Waymouth标准,水的电阻应为200万欧姆,一般实验室里以玻璃蒸馏器制备的双蒸水或三蒸水可以符合使用条件。培养基:培养基有天然、人工两种。一般实验室使用的是RPMI-1640粉末培养基,以双蒸或三蒸水配制。NaHCO3(或HCl)调pH至7.2-7.4,若pH值超过7.6或远低于6.8,则大多数细胞不能生长。RPMI-1640不耐高压灭菌,使用前需经灭菌0.22μm孔径滤膜滤过处理。血清:培养中常使用小牛血清(或胎牛血清)。血清亦不能高压灭菌,无菌的小牛血清需在56℃水浴30分钟灭活补体,置4℃冰箱存放待用。配制时含量视培养细胞种类、时间而定,一般用10—15%。由于血清成分复杂、条件不易控制,可选用无血清培养基。贵州培养基制备器哪家好