常用培养基的制备及注意事项一、实验目的了解培养基的配制原理；掌握配制培养基的一般方法和步骤；了解常见灭菌、清毒基本原理及方法；掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法。二、实验原理培养基是人工按一定比例配制的供微生物生长繁殖和合成代谢产物所需要的营养物质的混合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。根据微生物的种类和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法。牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用较普遍和较普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。由于这种培养基中含有一般细胞生长繁殖所需要的较基本的营养物质，所以可供微生物生长繁殖之用。干热天菌、高压蒸汽灭菌方法主要是通过升温使蛋白质变性从而达到杀死微生物的效果。培养基制备器铝制表面光滑平坦;易于清洁，无孔隙和裂缝，以防培养基流进去。陕西培养基制备器多少钱

制作斜面培养基和平板培养基：培养基灭菌后，如制作斜面培养基和平板培养基，须趁培养基未凝固时进行。(1)制作斜面培养基。在实验台上放1支长0.5-1米左右的木条,厚度为1厘米左右，将试管头部枕在木条上，使管内培养基自然倾斜，凝固后即成斜面培养基。(2)制作平板培养基。将刚刚灭过菌的盛有培养基的锥形瓶和培养皿放在实验台上，点燃酒精灯，右手托起锥形瓶瓶底，左手拔下棉塞，将瓶口在酒精灯上稍加灼烧，左手打开培养皿盖，右手迅速将培养基倒入培养皿中，每皿约倒入10毫升，以铺满皿底为度。铺放培养基后放置15分钟左右，待培养基凝固后，再5个培养皿一叠，倒置过来，平放在恒温箱里，24小时后检查，如培养基末长杂菌，即可用来培养微生物。陕西培养基制备器多少钱在配制用于观察和定量测定微生物生长状况的合成培养基时，常需在培养基中加入少量螯合剂。

培养基制备程序：全自动培养基制备器可以快速的准备好灭菌，放入灭菌锅，“水套系统”里加入夹层水（灭菌锅与灭菌锅腔体之间的夹套水用于有效的热传导），加入培养基原料，准备启动灭菌程序。培养基可以直接在培养基制备器内悬浮溶解。强力磁力搅拌培养基在内腔里混合的均匀性得到确保，并避免凝结。培养基还可以选择使用水浴模式预先溶解。没有经过专门培训的人员由于直观的图形化界面也能够简单的进行操作。用户对于多达50个灭菌参数可以自定义设置，它们可以被储存起来并随时调用。

消毒与灭菌的区别：消毒指使用较为温和的物理或化学方法单杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（对于一些不耐高温的液体）还有化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消毒。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。灭菌方法：①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱；③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅。④表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。培养基制备器血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。

血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理：血清中沉淀物的出现有许多种原因，但好普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成的，而血纤维蛋白（形成凝血的蛋白之一）在血渭解冻后，也会存在于血清中，亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物并不影响血清本身的质量。若想去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞过滤膜。何谓热灭活：一般是以56℃,30分钟来处理已解冻的血清，因为此加热步骤可以使补体去活化，而补体所参与的反应有：溶细胞活性，平滑肌的收缩，肥大细胞和血小板组胺的释放，增强吞噬作用，淋巴细胞、巨噬细胞的趋化和启动。要根据不同微生物的营养需求选择适宜的营养物质，配制针对性强的培养基。陕西培养基制备器多少钱

全自动培养基制备仪主要特点：容器可自行拆卸更换和消毒，操作方便。陕西培养基制备器多少钱

微生物检验培养基制备的要点：培养基溶化，将中海培养基纳入烧杯容器中，加小适量的水，缓慢加水并用玻璃棒小幅度搅拌。倘若培养基中不含琼脂，则不需要对培养基加热；相反含有琼脂，就需要用本生灯/电磁炉加热煮沸。待培养基完全溶解后再加入适量的水搅拌均匀。如准备的北京中海培养基较多，在不锈钢锅中融化加热，可以用温水加热，需不停搅拌，防止焦化。如果不小心出现焦化现象，则制备好的培养基将无法使用，必须重新配制中海生物培养基。不要使用铜或铁容器溶解制备培养基，因为铜或铁容器可能会导致容器内培养基中铜、铁超标，影响实验结果，其中培养基中铜含量大于0.3毫克每升，细菌不适宜生长。铁含量超过0.14毫克每升，防止细菌产生有毒的。容易发生反应和沉淀的药物应单独溶解，然后加入培养基中，如磷酸氢二钾和硫酸镁。陕西培养基制备器多少钱