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来源: 发布时间:2024-01-08

培养基制备的基本方法和注意事项:1.培养基配方的选定同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此,除所用的是标准方法,应严格按其规定进行配制外.一般均应尽量收集有关资料.加以比较核对.再依据自己的使用目的加以选用,记录其来源。2.培养基的制备记录每次制备培养基均应有记录,包括培养推各称,配方及其来源.和各种成份的牌号。好终pH值、消毒的温度和时间制各的日期和制备者等,记录应复制一份,原记录保存备查,复制记录随制好的培养基一同存放、以防发生混乱。培养基制备器灭菌锅关闭放气阀前,将锅内气体排干净。中国香港琼脂培养基 培养基制备器

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天然培养基中血清主要作用:对培养中的细胞起到某些保护作用:有一些细胞,如内皮细胞、骨髓样细胞可以释放蛋白酶,血清中含有抗蛋白酶成分,起到中和作用。这种作用是偶然发现的,则有目的的使用血清来终止胰蛋白酶的消化作用。因为胰蛋白酶已经被较广用于贴壁细胞的消化传代。血清蛋白形成了血清的粘度,可以保护细胞免受机械损伤,特别是在悬浮培养搅拌时,粘度起到重要作用。血清还含有一些微量元素和离子,他们在代谢中起重要作用,如SeO3、硒等。广东不锈钢内桶培养基制备器培养基成份的混合与溶化:培养基所用化学药品均应是化学纯的。

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配制培养基的原则:调节氧化还原电位(Eh)各种微生物对培养基的Eh要求不同。适宜好氧微生物生长的Eh值一般为+0.3~+0.4V,厌氧微生物只能在+0.1V以下生长,因此,培养好氧微生物必须保证氧的供应,可在培养基中加入氧化剂提高Eh值。调节渗透压多数微生物能耐受较大范围渗透压的变化。培养基中营养物质的浓度过大,会使渗透压过高,使细胞发生质壁分离而抑制微生物生长。低渗溶液则使细胞吸水膨胀易破裂,因此,配制培养基时要掌握营养物质的浓度。常在培养基中加人适量的Nacl以提高渗透压。原料来源的选择力求节约:配制培养基还应遵循力求节约的原则,尽量选用价格便宜、来源方便的原料。特别是在工业发酵中,培养基用量大,更应注意利用低成本的原料,降低产品成本。

微生物检验培养基制备的要点:对LST培养基进行灭菌时,发酵管内可能存在气泡。为了防止发酵管内形成气泡,可以采取以下措施:倒置的小管充满培养基,不留气泡,然后加入含有LST的试管中。在关闭杀菌锅的排气阀之前,将锅内的气体排空。试管塞不要塞得太紧。使用硅胶塞时,请勿使用橡胶塞。不可过早打开杀菌锅,等杀菌锅内的气压和温度降到与室温相同或相差不大时再打开杀菌锅。如果按照以上方法操作还有气泡,可以用水作为培养基组的对照试验。如果培养基组有气泡,对照组没有气泡,可以确定培养基本身原因。在配制用于观察和定量测定微生物生长状况的合成培养基时,常需在培养基中加入少量螯合剂。

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培养基的脱气:必要时,在使用前将养基放到沸水浴或蒸汽浴中加热15min,加热时松开容器盖子;加热后盖紧盖子,并迅速冷却至使用温度。3.添加成分的加入:对热不稳定的添加成分应在培养基冷却至47℃~50℃时加入,灭菌的添加成分加入前应冷却至室温,避免冷的液体会造成琼脂凝胶或形成片状物。4.培养基的弃置:所有污染和未使用的培养基的弃置应采用安全的方式,并符合相关法律法规的规定。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中,随该批培养基同时灭菌,以为测定该批培养基较终pH之用。培养基制备器内部的管道和容器可以更换,方便移除和清洗。海南全自动培养基制备器

制备培养基的操作要点:易于控制微生物的生长代谢状态。中国香港琼脂培养基 培养基制备器

培养基的质量测试:每批培养基制备好以后,应仔细检查一遍,如发现破裂、水分浸入、色泽异常、棉塞被培养基沾染等、均应挑出弃去。并测定其较终pH.将全部培养基放入36±1°C恒温箱培养过夜,如发现有菌生长,即弃去。用有关的标准菌株接种1~2管或瓶培养基,培养24~48小时,如无菌生长或生长不好。应追查原因并重复接种一次,如结果仍同前,则该批培养基即应弃去,不能使用。培养基的保存:培养基应存放于冷暗处,较好能放于普通冰箱内。放置时间不宜超过一周,倾注的平板培养基不宜超过3天。每批培养基均必须附有该批培养基制备记录副页或明显标签。中国香港琼脂培养基 培养基制备器

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