血清培养基主要问题：血清的成份可能有几百种之多，对其准确的成份、含量及其作用机制不清楚，尤其是对其中一些多肽类生长因子、和脂类等尚未充分认识，这给研究工作带来许多困难。血清都是批量生产，各批量之间差异很大，而且血清保存期至多一年，因此，要保证每批血清的相似性极为困难，从而使实验的标准化和连续性受到限制。对大多数细胞，在体内状态，血清不是它们接触的生理学液体，只是在损伤愈合以及血液凝固过程中才接触血清，因此使用血清有可能改变某种细胞在体内的正常状态，血清可能促进某些细胞的生长（成纤维细胞）同时抑制另一类细胞生长（表皮细胞）。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性。湖南培养基消毒 培养基制备器

培养基的物理灭菌方法：（一）加热灭菌法：加热可破坏微生物中酶、蛋白质和核酸，导致微生物死亡。加热灭菌又分干热灭菌法和湿热灭菌法。在同一温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好。主要是因湿热灭菌时，有水分存在，蛋白质容易变性。水分又易使微生物膜壁润湿，湿热的穿透力比干热大。常用的有火焰灭菌法与干热空气灭菌法两种。（二）紫外线灭菌法：是指用紫外线照射杀灭微生物的方法。一般用于灭菌的紫外线波长是200~300nm，灭菌力较强的波长是253.7nm。紫外线作用于核酸蛋白促使其变性，同时空气受紫外线照射后产生微量臭氧，从而起共同杀菌作用。紫外线进行直线传播，可被不同的表面反射，穿透力微弱，但较易穿透清洁空气及纯净的水。湖南培养基消毒 培养基制备器强力磁力搅拌培养基在内腔里混合的均匀性得到确保，并避免凝结。

培养基的配置应该注意的几大步骤：常用玻璃仪器的准备制备培养基所用的吸管、锥形瓶、毛细吸管、平皿等玻璃仪器用前要用肥皂水洗刷后用清水冲洗干净，晾干后备用。（1）平皿用纸或布包好，或装在金属盒内，于121℃高压蒸汽菌3min后烘干，备用。（2）试管管口用棉花塞或硅氟塑料试管塞塞好，再用布或报纸包扎好，121℃高压蒸汽灭菌20℃后烘干，备用。（3）吸管及滴管先用少许棉花塞于吸口端（防止污染物吸出，或橡皮帽内的气体污染），然后用纸包后或装入金属吸管筒内，于121℃高压蒸汽灭菌20min后烘干，备用。其他玻璃器皿均应按上法处理，也应装金属筒内160℃干热灭菌2h后，备用。

培养基的实验室制备：①概述：培养基和试剂的灭菌通常采用湿热灭菌或过滤灭菌。有些培养基无需高压灭菌,可煮灭菌。如，含亮绿的肠道菌培养基对光和热特别敏感，应在煮沸后快速冷却，避光保存。同样，一些试剂则不需要灭菌，直接使用(参见相关标准或生产厂商的使用说明）。②湿热灭菌;p湿热灭菌在高压锅或培养基制备器中进行。高压霉菌一般采用121℃±3℃霉菌15min。如果培养基的体积超过1000mL，要对灭菌条件进行适当的调整。所有操作均要按照标准和使用说明的规定进行。注：大容量培养基（＞1000mL）灭菌时可能会造成过度加热。加热后应采取适当的方式冷却，防止沸溢。这对大容量培养基和敏感性培养基（如含亮绿的培养基）是非常重要的。培养基是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料。

高压灭菌造成培养基结焦焦化问题：在实验过程中，检测人员发现在高压灭菌后的培养基有结焦焦化现象。微生物认为造成这种现象是：控制培养基在容器中不要超过百分之八十，避免填充过多。注意控制高压灭菌时间过长（115-116度）二十分钟即可，温度不超过121度，而且灭菌后的培养基在高温环境中不要长时间存放。以上原因都会导致培养基结焦焦化。贮存：培养基在30℃下放置1天，无污染的即可使用。一般用牛皮纸包裹好存放于2-8℃冰箱中备用。固体培养基根据性质又分为固化培养基、非可逆性固化培养基、天然固态培养基、滤膜。山西培养基消毒 培养基制备器

培养基的不正确制备会导致培养基出现质量问题。湖南培养基消毒 培养基制备器

孢子培养基：孢子培养基是供菌种繁殖孢子的一种常用固体培养基，对这种培养基的要求是能使菌体迅速生长，产生较多较好的孢子，并要求这种培养基不易引起菌种发生变异。所以对孢子培养基的基本配制要求是：靠前，营养不要太丰富（特别是有机氮源），否则不易产孢子。如灰色链霉在葡萄糖-硝酸盐-其它盐类的培养基上都能很好地生长和产孢子，但若加入0.5%酵母膏或酪蛋白后，就只长菌丝而不长孢子。第二，所用无机盐的浓度要适量，不然也会影响孢子量和孢子颜色。第三，要注意孢子培养基的pH和湿度。生产上常用的孢子培养基有：麸皮培养基、小米培养基、大米培养基、玉米碎屑培养基和用葡萄糖、蛋白胨、牛肉膏和食盐等配制成的琼脂斜面培养基。大米和小米常用作霉菌孢子培养基，因为它们含氮量少，疏松、表面积大，所以是较好孢子培养基。大米培养基的水分需控制在21%－50%，而曲房空气湿度需控制在90%－靠前。湖南培养基消毒 培养基制备器