培养基的称量和溶解：小心称量所需量的脱水合成培养基（必要时佩戴口罩或在通风柜中操作，以防吸入含有有毒物质的培养基粉末），先加入适量的水，充分混合（注意避免培养基结块），然后加水至所需的量后适当加热，并重复或连续搅拌使其快速分散，必要时应完全溶解。含琼脂的培养基在加热前应浸泡几分钟。注意：培养基的加热溶解或高温灭菌盛放使用的容器不得为铜锅或铁锅，以防有微量铜或铁混入培养基中，使细菌不易生长。较好使用不锈钢锅加热溶化，可放入大烧杯或大烧瓶中置高压蒸汽灭菌器或流动蒸汽消毒器中蒸煮溶化。在锅中溶化时、可先用温水加热并随时搅动、以防焦化、如发现有焦化现象、该培养基即不能使用，应重新制备。低渗溶液则使细胞吸水膨胀易破裂，因此，配制培养基时要掌握营养物质的浓度。上海大容量 培养基制备仪

含琼脂的培养基有时在平板上不凝固或凝固不好问题：在此种情况下，建议对于需要高压灭菌的培养基,倒入平板前先摇一摇。主要是琼脂培养基的分子量比较大，在冷却过程中容易沉淀到底，造成琼脂不能均匀分布。对于无需高压灭菌的培养基，不能直接煮沸溶解后倒入平板、需要重复三至五次煮沸溶解过程，因一次无法保证琼脂完全溶解。微生物培养基成分中含有染料或指示剂；不同批次的粉状培养基含水量不同。一般要求≤6。含水量越高，颜色越深；研磨时间越长，颜色越深等三个原因。全自动培养基制备仪液体培养基，80%～90%是水，其中配有可溶性的或不溶性的营养成分的培养基。

培养基的制备原则和要求：培养基是根据各类微生物生长繁殖的需要，用人工方法把多种物质混合而成的营养物。一般用来分离、培养菌类。常用的培养基有基础培养基、增菌培养基、选择培养基、鉴别培养基和厌氧培养基。在制备培养基时，应掌握如下原则和要求：(一)培养基必须含有细菌生长繁殖所需要的营养物质。所用的化学药品必须纯净，称取的份量务必准确。(二)培养基的酸碱度应符合细菌生长要求。按各种培养基要求准确测定调节pH值。多数细菌生长的适宜pH值为7.2～7.6，呈弱碱性。

消毒与灭菌的区别：消毒指使用较为温和的物理或化学方法单杀死物体表面或内部一部分对人体有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（对于一些不耐高温的液体）还有化学药剂（如酒精、氯气、石炭酸等）消毒、紫外线消毒。灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌。灭菌方法：①接种环、接种针、试管口等使用灼烧灭菌法；②玻璃器皿、金属用具等使用干热灭菌法，所用器械是干热灭菌箱；③培养基、无菌水等使用高压蒸汽灭菌法，所用器械是高压蒸汽灭菌锅。④表面灭菌和空气灭菌等使用紫外线灭菌法，所用器械是紫外灯。有的培养基还含有素和色素，用于单种微生物培养和鉴定。

配制培养基需要哪些制备：（1）称出规定数量的琼脂和蔗糖，加水直到培养基较终容积的34，加热溶解，完全融解后的溶液是透明的。在配制液体培养基（不加琼脂）时无需加热。（2）按需要加入一定量的各种贮存母液，包括生长调节物质和其他特殊附加物。吸取母液要使用专一的移液管。如有必要，培养基中所需的维生素，可在高压灭菌之后通过减压过滤装置或微孔过滤器灭菌后再加入。（3）蒸馏水定容。充分混合后调节培养基的pH，一般以5.66.0为好。（4）培养基分装，分装量一般以占培养容器的1514为宜。之后在24h内完成高压灭菌，也可以高压灭菌后再进行培养基的无菌分装，室温下存放备用。暂时不用的培养基应放置于10摄氏度下保存，而含有生长调节物质的培养基在45摄氏度保存更佳。培养基，是指供给微生物、植物或动物生长繁殖的，由不同营养物质组合配制而成的营养基质。上海琼脂灭菌 培养基制备仪

培养基配成后一般需测试并调节pH，还须进行灭菌，通常有高温灭菌和过滤灭菌。上海大容量 培养基制备仪

微生物发酵培养基配制注意事项：①养分浓度和配比合适：微生物只有在培养基中养分浓度合适的情况下才能生长良好是合适的。当养分浓度过低时，不能满足微生物正常生长的需要。②微生物培养基pH条件控制：培养基的pH必须控制在一定范围内，以满足不同种类微生物的生长繁殖或产生代谢物。各种微生物生长繁殖或代谢产物产生的较佳pH条件不同。通常细菌和放线菌适合在7~7.5pH范围内生长，酵母菌和霉菌一般在4.5~6pH范围内生长。③微生物培养基原料来源选择：培养基配制时，应尽可能使用低廉易得的原料作为培养基成分。尤其在发酵行业，培养基用量大，使用成本较低原料实现产品附加价值。例如在微生物单细胞蛋白的工业化生产过程中，制糖业含蔗糖废液、乳业含乳糖废液、大豆废液工业和黑色废物、造纸工业中含有戊糖和己糖的亚硫酸盐纸浆等经常被作为培养基原料使用。④成品培养基灭菌处理、为了获得微生物的纯培养物，必须避免被细菌污染，所以对使用的设备和工作场所进行消毒和消毒。对于微生物培养基要进行严格的灭菌处理。上海大容量 培养基制备仪

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