实验室在制作培养基时候的经验总结：培养基分装：培养基的分装，应按使用的目的和要求，分装于试管、烧瓶等适当容器内。分装量不得超过容器装盛量的2/3。容器口可用垫有防湿纸的棉塞封堵，其外还须用防水纸包扎(现试管一般多有用螺旋盖者)。分装时较好能使用半自动或电动的定量分装器。分装琼脂斜面培养基时，分装量应以能形成2/3底层和1/3斜面的量为恰当。分装容器应预先清洗干净并经干烤消毒，以利于培养基的彻底灭菌。每批培养基应另外分装20ml培养基于一小玻璃瓶中，随该批培养基同时灭菌，以为测定该批培养基较终pH之用。半固体培养基，指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。中国香港琼脂灭菌 培养基制备器

培养基制备基本方法：培养基配方的选定，同一种培养基的配方在不同著作中常会有某些差别。因此，除所用的是标准方法，应严格按其规定进行配制外，一般均应尽量收集有关资料，加以比较核对，再依据自己的使用目的加以选用，记录其来源。培养基pH的初步调整，培养基各成分完全溶解后，应进行pH的初步调正，因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化，例如，牛肉浸液约可降低pH0.2。而肠浸液pH却会有明显的升高。因此，对这个步骤，操作者应随时注意探索经验、以期能掌握培养基的很终pH，保证培养基的质量。pH调正后，还应将培养基煮沸数分钟，以利培养基沉淀物的析出。中国澳门培养基制备器一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死，但细菌的芽胞有较强的抗热性。

⑴倒置的小管充满培养基，不留气泡。⑵在关闭杀菌锅的排气阀之前，将锅内的气体排空。⑶试管塞不要塞得太紧。使用硅胶塞时，请勿使用橡胶塞。⑷不可过早打开杀菌锅，等杀菌锅内的气压和温度降到与室温相同或相差不大时再打开杀菌锅。如果按照以上方法操作还有气泡，可以用水作为培养基组的对照试验。如果培养基组有气泡，对照组没有气泡，可以确定培养基本身原因。为有效体现培养基其生物学特性，其制备生长及繁殖需要特定的PH范围。

培养基是生物制品领域中常用的物质，在细菌和细胞培养中十分必要，但是现有技术中有些培养基的某种组份容易分解，造成保存时间短等问题，导致培养基的使用成本十分高。其中，在动物培养基中，谷氨酰胺是一种必要的组份，但是在常温下，很短的时间内，约7-10日中培养基中的谷氨酰胺成份就可降解90％以上，这给其商品化带来很大的困难。这样的培养基在现有技术中很多，都具有上述的缺陷，例如，中国CN1087778C公开了一种杂交瘤细胞的无血清培养基，其中包含有谷氨酰胺成份，但是这种培养基的保存时间十分有限，很难达到商业使用的目的。调节氧化还原电位(Eh) 各种微生物对培养基的Eh要求不同。

培养基配置原则：控制pH条件，培养基的pH必须控制在一定的范围内，以满足不同类型微生物的生长繁殖或产生代谢产物。各类微生物生长繁殖或产生代谢产物的很适pH条件各不相同，一般来讲，细菌与放线菌适于在pH7-7.5范围内生长，酵母菌和霉菌通常在pH4.5-6范围内生长。值得注意的是，在微生物生长繁殖和代谢过程中，由于营养物质被分解利用和代谢产物的形成与积累，会导致培养基pH发生变化，若不对培养基pH条件进行控制，往往导致微生物生长速度下降或（和）代谢产物产量下降。因此，为了维持培养基pH的相对恒定，通常在培养基中加入pH缓冲剂，常用的缓冲剂是一氢和二氢磷酸盐（如KH2PO4和K2HPO4）组成的混合物。K2HPO4溶液呈碱性，KH2PO4溶液呈酸性，两种物质的等量混合溶液的pH为6.8。培养基的各种成分必须精确称取并要注意防止错乱，较好一次完成，不要中断。内蒙古培养基灭菌 培养基制备器

培养基制备器解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生。中国香港琼脂灭菌 培养基制备器

培养基配置原则：灭菌处理，要获得微生物纯培养，必须避免杂菌污染，因此对所用器材及工作场所进行消毒与灭菌。对培养基而言，更是要进行严格的灭菌。对培养基一般采取高压蒸汽灭菌，一般培养基用1.05kg/cm2，121.3℃条件下维持15-30min可达到灭菌目的。在高压蒸汽灭菌过程中，长时间高温会使某些不耐热物质遭到破坏，如使糖类物质形成氨基糖、焦糖，因此含糖培养基常在0.56kg/cm2，112.6℃15-30分钟进行灭菌，某些对糖类要求较高的培养基，可先将糖进行过滤除菌或间歇灭菌，再与其他已灭菌的成分混合；长时间高温还会引起磷酸盐、碳酸盐与某些阳离子（特别是钙、镁、铁离子）结合形成难溶性复合物而产生沉淀。中国香港琼脂灭菌 培养基制备器

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