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来源: 发布时间:2020-06-13

分离纯化多肽的常用方法-疏水作用色谱 HIC 是利用多肽中含有疏水基因,可与固定相之间产生疏水作用而达到分离分析的目的,其比RP-GPLC 具有较少使多肽变性的特点。利用GIC 分离生产(GH)产品的结构与活性比EP-GPLC 分离的要稳定,活性较稳定。Geng 等利用HIC 柱的低变性特点,将大肠杆菌表达出的经盐酸胍乙啶变性得到人重组干扰素-γ。通过HIC 柱纯化、折叠出高生物活性的产品。不同人尿表皮生长因子(EGF)也利用HIC 纯化到了,均具有良好的生物活性。HIC 可将未经离子交换柱的样品纯化。而RP-HPLC 则不能达到这一要求。专业多肽分离填料哪家强

分离纯化多肽的常用方法-置换色谱 HPDC 是利用小分子置换剂来交换色谱柱上的样品,从而达到分离的目的。它具有分离组分含量较少成分的特性。利用HPDC 鉴定分离了低于总量1% 组分的活性人重组生长(rHG )。在研究非毒**换剂时Jayarama 发现化葡萄糖(Detran Sulfate,DS)是对β 乳球蛋白A 和B 的良好置换剂,一般DS 的相对分子质量为1×104 和4×104 **宜。研究表明置换剂的相对分子质量越低,越易于与固定相结合,因此在分离相对分子质量小的多肽时,需要更小的置换剂才能将其置换纯化出来。合肥多肽分离填料哪家专业

分离纯化多肽的常用方法-膜蛋白色谱 CMP+分离强蔬水性蛋白、多肽混合物的层析系统,一般有去垢剂(如SDS)溶解膜蛋白后形成SDS-融膜蛋白,并由羟基磷灰石为固定相的柱子分离纯化。羟基磷灰石柱具有阴离子磷酸基团(P-端),又具有阳离子钙(C-端),与固定相结合主要决定于膜蛋白的大小、SDS 结合量有关。利用原子散射法研究cAMP的分离机制发现,样品与SDS 结合后在离子交换柱上存在SDS 分子、带电荷氨基酸与固定相中带电离子间的交换,从而达到分级分离的目的。

分离纯化多肽的常用方法-反相高效液相色谱 结果与保留值之间的关系:利用RP-HPLC 分离多肽首先得确定不同结构的多肽在柱上的保留情况。为了获得一系列的保留系数,Wilce 等利用多线性回归方法对2106 种肽的保留性质与结构进行分析,得出了不同氨基酸组成对保留系数影响的关系,其中极性氨基酸残基在2~20 氨基酸组成的肽中,可减少在柱上的保留时间;在10~60 氨基酸组成的肽中,非极性氨基酸较多也可减少在柱上的保留时间,而含5~25 个氨基酸的小肽中,非极性氨基酸增加可延长在柱上的保留时间。 同时有不少文献报道了肽链长度、氨基酸组成、温度等条件对保留情况的影响,并利用计算机处理分析得到每种多肽的分离提取的比较好条件。 肽图分析(Peptide Mapping):肽图分析是根据蛋白质、多肽的分子量大小以及氨基酸组成特点,使用专一性较强的蛋白水解酶[ 一般未肽链内切酶(endopeptidase)]作用于特殊的肽链位点将多肽裂解成小片断,通过一定的分离检测手段形成特征性指纹图谱,肽图分析对多肽结构研究合特性鉴别具有重要意义。

分离纯化多肽的常用方法 分离方法 采取何种分离纯化方法要由所提取的组织材料、所要提取物质的性质决定。对蛋白质、多肽提取分离常用的方法包括:盐析法、超滤法、凝胶过滤法、等电点沉淀法、离子交换层析、亲和层析、吸附层析、逆流分溶、酶解法等。这些方法常常组合到一起对特定的物质进行分离纯化,同时上述这些方法也是蛋白、多肽类物质分析中常用的手段,如层析、叫泳等。 核磁共振,基质辅助激光解析/ 离子化-飞行时间质谱, 电雾离子化质谱,连续流快原子轰击质谱,质谱分析除上述方法之外,氨基酸组成分析、氨基酸序列分析、场解析质谱、IR、UV 光谱、CD、圆而色谱、生物鉴定法、放射性同位素标记法及免疫学方法等都已应用于多肽类物质的结果鉴定、分析检测之中。多肽分离填料

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