2.3.2悬浮聚合
悬浮聚合法是单体小液滴悬浮在水中的聚合方法,在磁性粒子、稳定剂和表面活性剂存在下、靠油溶性引发剂的作用使一种或几种单体在磁性粒子表面聚合可将磁性粒子包裹在聚合物中。与乳液聚合相比,悬浮聚合单体液滴粒径通常是微米级别的。Li等[17]合成一种新型的核壳式P(DVB-MAA)/Fe3O4纳米复合微球,可作为分散模式的磁介导微观粒子的固相萃取吸附剂。Fe3O4纳米粒子通过溶剂热法制备,P(DVB-MAA)通过悬浮聚合合成,微球的平均粒径在300~700nm,微球壳层的P(DVB-MAA)厚度在10nm左右。该微球可用于水中微量的有机污染物的快速、高灵敏检测。
2.3分散聚合
分散聚合是悬浮聚合的一种,也是一种特殊的沉淀聚合,反应之前单体、溶剂、稳定剂、引发剂等是均一的混合体系,当反应开始,聚合物达到一定分子量之后,聚合物逐渐从反应体系中沉淀出来。Zhang等合成了Fe3O4含量高达70wt%、且分布比较均一的P(St–GMA)/Fe3O4的纳米复合微球。由于只有当磁性粒子在反应初期成核过程中捕获,并聚合增长才能得到复合微球,因此此方法的磁含量往往不高,且该法需使用的溶剂多为有机溶剂,聚合物与有机溶剂的亲和性导致聚合物沉淀出时链长较长,粒径较大,限制了其应用。
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常用的纯化方法冷冻结晶法 冷冻结晶法是在低温的条件下,依据混合脂肪酸各组分的凝固点差异进行纯化,进而达到纯化多不饱和脂肪酸的目的。将混合脂肪酸溶解在**或乙醇中,置于低温下,在溶液中短链脂肪酸较长链脂肪酸的溶解度低,饱和脂肪酸较不饱和脂肪酸的溶解度低,这种溶解度差异随温度降低表现更为。 冷冻结晶法工艺原理简单,操作方便,有效成分不易发生变性反应。但其操作过程中温度要求苛刻,需要回收大量的有机溶剂,纯化效率不高,这限制了大规模的生产,但可以用于生产低成本的保健品类,从而满足中低层消费者的需求。青岛质量分离纯化微球
如何制作纳米微球呢? 离子交联法是制作纳米微球的基本方法之一,适用于以壳聚糖、海藻酸钠等 为材料的纳米微球。其主要原理是作为***载体的材料通过离子交联法从乳 液中析出,同时通过氢键相互作用和疏水相互作用将***包埋在载体中,从 而制备成载药微球。该方法制备条件温和,整个过程不使用对人体有害的试 剂,也成为载药微球的理想制备方法之一。 纳米微球的典型制备方法还有“乳化-溶剂挥发法”和“微流控法”。“乳 化-溶剂挥发法”是将模型***先溶解于有机溶剂中,然后滴加到含有表面活 性剂的水相中,在均质机的高速剪切下形成油相/水相型乳液,再通过常压或减 压方式除去乳液分散相中的挥发性有机溶剂,使纳米粒硬化,***通过冷冻干 燥从水性混悬液中收集纳米粒。“微流控法”是一种在微米尺度的通道中操 控两种或几种互不相溶的微小体积液体,连续、可控地生产具有高度单分散尺 寸的单乳液滴和多重乳液液滴的技术。
多克隆抗体的纯化 多抗的纯化是一件比较简单的事情,因为人工干预比较大,所以对实验者的操作依赖性较强。很多新手觉得这是一件比较复杂困难的工作,但是如果理解了原理,就可以自行改进实验了。多抗纯化方法比较多,过去有用盐析法纯化的,有用辛酸-铵沉淀的方式纯化的,也有用冷酒精沉淀的方式纯化的,也有后来的离子交换层析和Protein A,G,A/G纯化的,但是在,市场上几乎所有的抗体都是通过抗原亲和纯化得到的,与其它方法相比,抗原亲和层析得到的抗体效率高、产量高、产品纯、操作简单。 步骤如下: 1、介质的制备 2、抗原与填料的连接 3、连接效果的评估 4、多余位点的封闭 5、抗血清与beads的结合 6、非特异性结合的抗体的洗涤 7、洗脱 具体 操作与原理可以看看中国免疫学实验网上的详细讲解。
磁性高分子微球的制备
目前制备磁性高分子纳米微球的方法主要分为五类,其主要包括:包埋法、原位法、单体聚合法、界面沉积法及自组装法。
2.1包埋法
包埋法是将聚合物溶解在含有磁性超微粒子的溶液中,然后加入大量的沉淀剂,通过交联、絮凝、雾化、沉积、蒸发等手段使高分子物质沉析在磁性粒子表面形成具有核壳结构的复合微球。高分子物质与磁性粒子主要通过范德华力、氢键、螯合作用或共价键等作用力结合。Li等通过化学共沉淀法合成纳米粒子Fe3O4磁核,以壳聚糖为包裹材料包被自制的磁核,采用乳化交联法制备了具有核-壳结构的磁性高分子微球-壳聚糖磁性微球,并偶联肝素配基得到了一种新型亲和磁性微球。所得亲和磁性微球具有较窄的粒径分布、形状规整,粒径在50nm左右。将磁分离技术应用于凝血酶的分离纯化,得到了较好的效果(酶比活达1879.71U/mg,得率85%,纯化倍数11.057,为传统柱层析法的两倍)。Chi?riuc等将含Fe2+和Fe3+溶液逐滴加入壳聚糖的NaOH溶液中制的可用于负载头孢霉素的磁性壳聚糖微球。
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微球是直径在纳米和微米尺度范围的球型粒子。球形物体是自然界存在**稳定的物质形态, 它是三维几何空间理想的对称体,也是单位体积中所有立体形态中面积**小的。自然界大 到星球如地球,小到篮球,乒乓球,玻璃珠等都是球体。 地球直径是1.28万千米,而篮球 直径是0.25米,1纳米等于十亿分之一米,相当于一根头发丝横切面的六万分之一,如果拿 纳米的微球与篮球相比,就相当于篮球与地球之比例。 如此之小的纳米微球材料却是现代 产业发展的重要基础。上海专业分离纯化微球
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