流式细胞术的特点：1、检测对象：单细胞悬液或生物颗粒；2、检测特点：单细胞水平分析；3、检测参数：多参数荧光信号；4、检测速度：高速，比较高达上万个细胞/秒；5、检测结果：精度高、准确性好；可以对目标细胞进行分选。分析型流式细胞仪：细胞样本分析后再进入废液桶，不能回收利用。分选型流式细胞仪：既能流式分析，还能对分析的目的细胞进行分选。进样管道比较长，还需要保持无菌状态，所以分选型流式细胞仪一般只用于分选。我们开发并验证流式细胞术的倍性鉴定方法，用它来探索倍性比的季节性波动和影响该物种野生种群的环境因素。国产Sysmex倍性分析仪生命科学用品

CyFlow Ploidy Analysere倍性分析仪一机全能：1、特殊设计，专为医学、农业科学、育种及水产养殖领域提供完美的倍性和周期解决方案2、配备365nm光源，高效激发DAPI染料，避免RNA的影响和次生代谢物的影响3、配备532nm光源，高效激发PI染料，激发效率远超488nm和561nm激光器4、超高荧光分辨率， DNA检测CV<1%，适合高精度倍性实验。5、采用TVAC定体积相对计数功能，无需相对计数微球，随时掌握样本浓度6、样本流速从0-20ul/s连续精确可调，适合极低浓度样本的检测7、可选配自动上样器CyFlow Robby，兼容48孔板，96孔板和流式管，实现无人值守的高通量上样8、结合配套植物倍性试剂，可在5min内完成植物倍性检测实验。9、支持样本快速处理和检测；10、基于PI和DAPI的荧光DNA分析；11、提供样本快速处理试剂盒，用于 DAPI 和PI 标记的倍体分析；12、配套的仪器质控试剂；13、所有样本的细胞核染色(包括 ，叶、根、愈合组织、悬浮组织、杂交细胞等)；14、可用于任何动物组织、培养细胞、悬浮细胞的倍体分析。倍性分析仪系统利用流式细胞仪快速检测棉花 DNA 倍性，为棉花的倍性鉴定和育种研究提供基础数据。

提取高质量的细胞核用于倍性检测至关重要，Peng 等比较了刀切法和研磨法提取棉花细胞核的效果，结果发现，刀切法提取的细胞核质量更高，因此我们选择刀切法来提取棉花细胞核。根据其他植物材料已有的研究报道，植物取材需要考虑样品易获性、细胞核型的稳定性和保存性等因素。如果材料选取不当，会导致提取的细胞核颗粒较少，生成大量的杂质，甚至形成变异系数较大的 DNA 峰。本研究以棉花的老叶和嫩叶为材料制备样品进行对比，结果表明棉花幼嫩叶片检测效果好，完全可以作为倍性鉴定试材。

植物染色体倍性鉴定在植物遗传育种中具有十分重要的作用。在育种过程中，通过花药（花粉小孢子）、未受精子房等途径再生出的植株，往往是单倍体、双单倍体及其他倍性植株的混合群体，有效的倍性鉴定是了解其遗传背景和进一步应用的基础。多倍体育种是植物育种的一种途径之一，它不仅可以对性状进行改良，还可以提高植物体内各种有效成分的含量。利用倍性鉴定，准确地辨认多倍体并将其挑选出来，也是多倍体育种中的重要环节一环。另外，倍性鉴定也可用于分析细胞分裂活动等生理和遗传研究。倍性鉴定特别是苗期倍性鉴定，不仅可以减少育种工作量，而且可以减少土地和资金的投入。国内外关于各种鉴定方法报道不少，但较分散。本文综述了各种倍性鉴定方法并对其优缺点进行了评选。不同倍性植株在细胞学和形态解剖学上具有明显差异，目前主要有两大类型直接鉴定法和间接鉴定法。CyFlow Ploidy Analyser配合试剂盒，非常适合植物倍性检测，两 分钟内即可出结果，明显地缩短了实验周期。

使用倍性分析仪,对48种培养多年不同基因型的柑橘愈伤组织的细胞DNA含量进行了测定.结果发现,除了路比葡萄柚、尾张和金诺橘等3种愈伤组织变异较小,未出现第二个峰以外,有93.8%的基因型的愈伤组织的细胞均出现了DNA含量加倍的细胞.通过DPAC分析软件分析得知,凤梨甜橙三倍体、宁波金柑、长沙橘、鲁斯脐橙、国庆4号和卡特夏橙等6种愈伤组织的细胞DNA含量还出现了三倍增加及非整倍增加的现象.在待测的48种愈伤组织中,DNA含量变异细胞的百分率较大者为凤梨甜橙三倍体,达18.51%;较小者为暗柳橙,为4.70%.通过邓肯氏新复极差分析得知,不同基因型的DNA含量变异细胞的百分率之间存在差异明显性.在相同继代培养基和相同继代周期的条件下,培养时间对愈伤组织变异大小影响不明显。使用流式细胞术和成像流式细胞术分析了 10 色双等位基因 Confetti 报告基因。山东CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析仪配套试剂

高内涵成像和成像流式细胞术的出现近期弥合了流式细胞术和成像之间的差距。国产Sysmex倍性分析仪生命科学用品

拟南芥是一种生长迅速的小型植物，可进行范围广的核内复制，在不发生有丝分裂的情况下进行基因组扩增。该物种含有有花植物中较小的基因组，约157Mb，C值为0.321pg。这些特征使得拟南芥特别适合作为测定基因组大小的内参，并且可以用于仪器线性度的质量控制。用于流式实验的植物样品通常只需少量植物组织。使用标准手术刀片将植物组织切碎并浸泡于缓冲液中，过滤含植物细胞核的匀浆以去除大的碎片，用DNA特异性荧光染料进行标记，然后在流式细胞仪上采集数据，根据每个细胞核的荧光强度来计算DNA含量。通过与已知标准品比较，可以用荧光强度换算出DNA含量的相对值。拟南芥通常用作内参，只需将内参样品和未知样品的细胞核同时进行分离、染色和分析即可。国产Sysmex倍性分析仪生命科学用品

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