实验仪器:Sysmex CyFlow® Ploidy Analyser 倍性分析仪(Sysmex Partec)试剂盒:CyStain® UV Precise P(Sysmex Partec)实验步骤:1、取新鲜待测植物叶片 0.5 平方厘米,置于培养皿中2. 取 Partec CyStain UV Precise P 裂解液 400ul 加于植物叶片周围,用刀片将叶片切碎,以充分提取出完整的细胞核,持续 30-60 秒3. 将培养皿中的液体用 30um 滤网过滤至样品管中4. 向样品管中加入 Partec CyStain UV Precise P 的 DAPI 染液 1600ul5. 上机(CyFiow Analyser倍性分析仪)检测。流式细胞术的检测参数:多参数荧光信号。国产CyFlow系列倍性分析仪生命科学用品
植物染色体倍性鉴定在植物遗传育种中具有十分重要的作用。在育种过程中,通过花药(花粉小孢子)、未受精子房等途径再生出的植株,往往是单倍体、双单倍体及其他倍性植株的混合群体,有效的倍性鉴定是了解其遗传背景和进一步应用的基础。多倍体育种是植物育种的一种途径之一,它不仅可以对性状进行改良,还可以提高植物体内各种有效成分的含量。利用倍性鉴定,准确地辨认多倍体并将其挑选出来,也是多倍体育种中的重要环节一环。另外,倍性鉴定也可用于分析细胞分裂活动等生理和遗传研究。倍性鉴定特别是苗期倍性鉴定,不仅可以减少育种工作量,而且可以减少土地和资金的投入。国内外关于各种鉴定方法报道不少,但较分散。本文综述了各种倍性鉴定方法并对其优缺点进行了评选。不同倍性植株在细胞学和形态解剖学上具有明显差异,目前主要有两大类型直接鉴定法和间接鉴定法。广东配备532nm光源倍性分析仪细胞周期检测CyFlow Analyser倍性分析仪在医学、农业科学、育种水产养殖等应用领域提供完美解决方案。
光谱分析中的另一大关注点是实用性,它可以将未染色细胞的自发荧光(AF)光谱包括在解混中。可以通过包括低和高AF未染色细胞(例如,淋巴细胞和成纤维细胞)的样品,对上述实验进行测试。数据分析将使用(光谱)矩阵将未染色的细胞数据进行混合,该矩阵是从单个染料光谱的间隔良好的子集以及光谱范围更密集的一组光谱中得出的。比较在未混合中是否包含细胞AF光谱的细胞未混合结果,将表明在检测细胞上的低含量染料时会观察到多少改进(如果有)。相关的统计数据是每种尺寸的染料在解混时有和没有AF的未染色细胞群的rSD。我的期望是,包括AF对高AF细胞有帮助,而对于低AF细胞则无济于事,并且对于间隔良好的染料集,其好处将更加明显。
植物和鉴定多倍体的判别和鉴定方法从原理上是依据其外在和内在的特征性衍生而来的,可以以形态外形观察为基础,组织化学、叶绿体计数为辅助,进行初步鉴别,然后再通过检查花粉母细胞、根尖细胞或幼叶细胞的染色体数目来确定植株的倍性。染色体计数法也是目前较直接、较准确的一种鉴定法。随着分子生物学技术的发展,人们开始从分子水平入手研究多倍体,对其倍性、来源进行鉴定。可以利用扫描细胞光度仪来测定DNA含量,再根据DNA含量比较来推断细胞的倍性。同时,原位杂交技术的日渐成熟也为多倍体的鉴定提供了全新途径。GISH,FISH计数的应用不仅能鉴定细胞的倍性,而且还能鉴定其亲本的来源;此外RAPD和RFLP技术也已成功地应用到本领域的研究中。分选型流式细胞仪:既能流式分析,还能对分析的目的细胞进行分选。
菌类的基因组大小信息很少,只有不到 2000 个物种的信息可用。到目前为止,大多数记录都是使用静态的、基于显微镜的细胞计数方法获得的,或者来自基因组测序项目。流式细胞术现在被认为是获得基因组大小测量的较先进方法,并且可以使用适当的方法和 DNA 标准,从而能够以快速、可靠和廉价的方式分析大多数基因组大小范围。平均菌类基因组大小为 60 Mbp,但大小因系统发育而异,从 2.2到 3706 Mbp 。在几个菌类进化枝中,基因组大小的扩张似乎伴随着植物共生或植物寄生的进化,与植物相互作用的菌类似乎比腐生菌和与动物相互作用的菌类具有更大的基因组。虽然用于核 DNA 定量的流式细胞术在植物科学中常规用于基因组大小和倍性研究,但其在菌类生物学中的使用仍然很少。此处描述了适当的标准、方法和比较好实践,旨在促进流式细胞术在菌类基因组大小测量中更普遍和更多的应用。CyFlow Analyser倍性分析仪一分钟完成倍性分析全过程。CyFlow Ploidy Analyzer倍性分析仪仪器
流式细胞术的检测结果:精度高、准确性好;可对目标细胞进行分选。国产CyFlow系列倍性分析仪生命科学用品
CyFiow Analyser倍性分析仪光源光路:可配备365nmUV LED紫外和/或 Nd-YAG 532nm绿色光源(30mW)。- 1或2个光电倍增管(PMT)光学通道。- 590nm长通滤片用于PI检测通道,435nm长通滤片用于DAPI及SSC检测通道。应用:1、支持样本快速处理和检测;2、基于PI和DAPI的荧光DNA分析;3、提供样本快速处理试剂盒,用于 DAPI 和PI 标记的倍体分析;4、配套的仪器质控试剂;5、所有样本的细胞核染色(包括 ,叶、根、愈合组织、悬浮组织、杂交细胞等);6、可用于动物组织、培养细胞、悬浮细胞的倍体分析。国产CyFlow系列倍性分析仪生命科学用品
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