采用Longa等的5级4分法标准对模型动物进行评价，0分：无神经功能缺损症状；1分：出现左侧 Honer征，轻度神经功能缺损；2分：提尾对侧前肢内旋，肩内收，中度神经功能缺损；3分：向对侧转圈、向对侧倾倒，重度神经功能缺损；4分：不能自发行走，部分意识丧失。鼠侧倾倒，评分为3分。 沿脑桥上界面切断，去除嗅球，称全脑重，立即放入-20℃冰箱， 20 min 后取出，由前向后做连续冠状切片（切片厚度2 mm）。将脑切片置入0.1% TTC溶液中，后放入恒温振荡器中，37℃避光染色30 min，将脑切片取出后放入固定液中固定 24 h，取出脑片，相机拍照，用 Motic Images Plus 显微图像分析系统计算脑梗死面积和梗死体积。动物疾病模型的标准化和规范化非常重要，因为这可以确保研究结果的可重复性和可比性.南京线栓法脑梗MCAO模型课题研究

脑卒中具有发病率高、病死率高、残疾率高及复发率高的特点。其中缺血性脑卒中的发病率高于出血性脑卒中，占脑卒中总数的 60% ～ 70%。缺血性脑卒中引起的组织损伤是主要的致死原因，但研究发现，缺血后再灌注引起的过量氧自由基是造成组织损伤的主要因素。 通过制备脑局部缺血再灌注损伤动物模型研究脑缺血再灌注损伤的作用机制已成为国内外的研究热点。线栓法是*常用的脑局部缺血再灌注损伤模型制备方法，此方法不需要开颅且不需要呼吸机等仪器辅助，缺血部位较恒定，能够准确控制缺血及再灌注时间，容易控制局部条件，全身影响小，是制作脑局部缺血再灌注损伤模型*理想的方法。南京定制脑梗MCAO模型研究方案将动物放在一个旋转的木棒上，观察动物是否能保持平衡，以评估动物的平衡能力和协调性。

脑梗MCAO模型成功的评判方法 生物化学指标的检测：在实验过程中，检测血清中C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）等生物化学指标的变化。这些指标可以反映炎症反应和缺血损伤的程度，有助于评估模型的成功。 病理学检查：实验结束后，对实验动物的大脑进行病理学检查。观察大脑皮质和海马区的细胞形态、排列情况，评估神经细胞的损伤程度。同时，通过免疫组化染色法检测神经元特异性烯醇化酶（NSE）的表达，以评估神经元损伤的程度。 行为学评估：在实验过程中，对实验动物进行行为学评估，如Morris水迷宫实验、步态分析等。通过比较不同处理组的行为学表现，评估模型的成功。 综上所述，评判脑梗MCAO模型成功的标准包括脑梗死面积、神经功能缺损评分、梗死血管、生物化学指标、病理学检查和行为学评估等方面。只有当这些指标均符合预期结果时，才能认为模型制备成功。

大脑中动脉闭塞(Middle cerebral artery occlusion，MCAO)是缺血性脑血管病的重要类型，是颅内动脉粥***的晚期。部分患者在疾病进展过程中可能形成间接代偿，但如果代偿不足，则可能发生短暂性脑缺血发作(TIA)，甚至脑卒中。在患有脑卒中的人群中，大概有三分之一的患者会发生死亡，脑卒中的高致死率与其复杂的发病机制密切相关据统计，我国己逐渐成为脑卒中的多发国家，且新发脑卒中患者有逐年增加的趋势。脑卒中己成为严重威胁人类健康的疾病，不仅给国家和家庭造成了沉重的经济负担还给患者带来严重的心理负担和劳动能力的丧失。小鼠缺血性脑梗死模型在神经科学研究中具有重要意义。

将小鼠进行呼吸诱导麻醉（异氟烷）后，以仰卧位固定于操作台上，继续维持麻醉，常规消毒，备皮，取颈部正中切口，分离右侧颈部总动脉（CCA）、劲内动脉（ICA）和颈外动脉（ECA），结扎ECA远心端，在ECA起始端留置结扎线，用动脉夹将ICA远心端、CCA近心端夹闭。在ECA远心端结扎线外离断，将ECA拉至与ICA成一条直线，于结扎线近端用显微剪剪一斜口，将MACO栓线缓缓送入，栓线通过ECA近心端结扎线进入ICA后，单道结扎ECA近心端结扎线，使栓线与血管相对固定，随即松开ICA上的动脉夹，缓慢上提ECA近心端结扎线，将栓线缓慢送入，进线至线栓刻度位置。 缺血后再灌注：栓线插入40 min后拔出，随后将ECA近心端结扎线结扎，松开CCA近心端动脉夹，碘伏消毒后逐层缝合切口。小鼠缺血性脑梗死模型也为神经康复研究提供了有力支持。南京线栓法脑梗MCAO模型课题研究

缺血性脑梗死具有高发病率、高死亡率、高致残率的特点。南京线栓法脑梗MCAO模型课题研究

缺血性卒中的病理生理及药物治*缺血性卒中主要诱发神经血管单元（NVU）一系列的缺血级联反应（包括兴奋性氨基酸毒性，氧（氮）化应激和缺血后炎症等），从而造成神经细胞受损甚至部分死亡细胞凋亡，*终诱发大脑功能的异常。NVU是由神经元，神经胶质细胞，血管细胞（内皮细胞、周细胞、平滑肌细胞）以及基底膜共同构成，这些细胞相互作用，共同调节营养物质在细胞间质间的流动和脑血流，维持和修复髓鞘，清*代谢产物，从而实现和维持大脑的正常功能。在缺血发生时，NVU的各部分细胞发生不同程度的损伤，诱发神经元细胞的生理生化异常。部分凋亡细胞会进展为梗死灶，而梗死灶周围受损的神经细胞虽然出现了生理生化异常和功能障碍，但尚未死亡，及时低灌注可能可以改善其损伤状况使之恢复正常。这部分及时抢救仍然可以改善其功能的神经细胞一般被称为“缺血半暗带”。南京线栓法脑梗MCAO模型课题研究