枯草芽孢杆菌是作用于植物身上的,对植物生长有益的菌。它对环境没有污染,能产生多种抗类菌素和酶,能使作物提高抗逆能力。它能使多种农作物表现出很好的防病和增产增收效果。它的特点是生产工艺简单,施用方便可以制成各种剂型,而且生长快,储存期长等优势,所以在菌肥上有了普遍的应用。它能分解并抑制土壤中病菌、害虫的滋生,为作物根系的健康生长提供良好的环境。枯草芽孢杆菌施入土壤后,和其它有害微生物争夺氧气和营养物质,形成空间占位,激发土壤中有益菌的数量与活性,在作物根系形成一道防护墙以保护根部不受有害菌的侵扰。所以枯草芽孢杆菌对于重茬病、根腐病、灰霉病等疾病防治效果好,能减轻作物病害的原因。发酵乳杆菌 CECT5716 短双歧杆菌 M-16V 罗伊氏乳杆菌 食清洁剂细小棒菌 大肠杆菌噬菌体M13 大肠杆菌λ噬菌体.多食鞘氨醇杆菌菌株
高活性枯草芽孢杆菌菌株是其普遍应用的重要前提。枯草芽孢杆菌筛选可依据形态特性、产酶能力、抑菌能力和抗逆性分析等方法在动物肠道、植物根际、土壤环境、发酵体等环境中分离,并进行分子生物学及生理生化鉴定,以挑选出性能优良的菌株。筛选出性能优良的菌株后,如何获得有效生物量更高的产品,是枯草芽孢杆菌工业化生产中的中心问题。目前,应用于工业化的发酵工艺主要有以下3种:液态发酵、固态发酵和液固两相发酵。实际生产中,以液态发酵为主。液态发酵是将活化菌种接种到发酵罐中,进行液体培养的方法。其一般流程为菌种接种,发酵罐培养、过滤、浓缩、干燥从而得到菌剂。白色链霉菌杀病亚种大肠杆菌能发酵多种碳水化合物,也可以利用多种有机酸盐。
大肠杆菌摇瓶发酵常用的化学合成培养基有LB、SOB、SOC等。培养基中通常含有碳(能)源、氮源,以及微营养物如微生物和微量元素,这些营养物的浓度与比例,对实现生产重组微生物的高密度发酵是很重要的。培养基中复合氮源的种类对重组大肠杆菌的高密度发酵也很重要。在某些情况下,向培养基中添加一些营养物质能提高生产率。这些营养物的作用可能是作为产物前体,也有可能是阻止产物的降解。发酵过程:1、种子活化:将保存于-80℃的种子甘油菌室温解冻,取500ul菌接入50mlLB培养基,再加入相对应的筛选抗性,37℃培养7h。2、上罐:将上步活化的种子50ml接入3L发酵培养基中,设定温度,空气流量,压力值,监控DO与PH值。3、从发酵4小时开始,每隔1h进行取样检测OD,当OD值≥40时,开始诱导。4、诱导物:IPTG(1mol/L,过滤除菌),加入4ml,至终浓度达到1mmol/L,诱导阶段温度控制再35℃,其他条件不变,诱导10小时。5、诱导结束,放罐,5000rpm离心,收集菌体,于-80℃冰箱保存。
目前有很多保藏方法可以适用于真类菌的保藏,但大体来可以分为让真类菌连续生长的保藏工艺。这一类的保藏工艺的特点是不断的将菌株移植在新鲜的培养基上,并在合适的条件下生长,随后置于一个低温的环境中,一般是4-10摄氏度,这类保藏工艺主要包括斜面移植、油管保藏和蒸馏水保藏法等。二是利用干燥环境保藏菌株的休眠体,如分生孢子、厚垣孢子等,干燥选用的基质可以是空气、硅胶、土壤、沙子等。三是利用抑制菌株代谢活性的办法达到长期保藏,一般是通过脱水降低细胞内水分或低温冷冻,在此过程中关键环节是避免和降低冰晶对细胞造成的伤害,这类保藏工艺包括冷冻干燥法、低温冻结和液氮保藏法等。金黄色葡萄球利用70%的乙醇可以在几分钟之内将其快速杀死。
大肠杆菌表达系统在现代的生物技术方面的应用:利用大肠杆菌表达系统可溶性表达人乳t瘤病毒HPV18蛋白,经过纯化和重组过程获得HPV18病毒样颗粒,研究其免疫原性和诱发中和抗体生成的水平。把碱性磷酸脂酶基因phoA信号肽的疏水区置换为多聚Leu残基,明显提高分泌效率,这一结果为天然信号肽优化改造的设计提供了很好的参考依据。膜蛋白基因在大肠杆菌中表达的技术逐渐成为研究的热点领域。外源蛋白质在菌体表面表达的优点是大肠杆菌可用于制备疫苗,进行生物催化和作为探针筛选药物。枯草芽孢杆菌有着很好的促生作用。蓝色犁头霉菌种
金黄色葡萄球次于沙门氏菌和副溶血杆菌的第三大微生物致病菌。多食鞘氨醇杆菌菌株
真正的枯草芽孢杆菌对作物、对土壤都有很好的生长调节作用,基本是多功能的,不可能只针对一点起作用,较重要的是它的使用效果是累加的,是单纯的肥料或养素达不到的。需要注意的是,枯草芽孢杆菌在使用时要谨慎,在早上10点前或下午4点后施药,避免阳光直射,杀死芽孢。尤其是4点后用药,夜间潮湿的环境更有利于芽孢萌发。在混用方面,枯草芽孢杆菌与咪鲜胺、三环唑、井冈霉素等混用,有明显的相互增效作用。在病害集中、急性暴发时,更能显示出混用的效果。同时,枯草芽孢杆菌不能与铜制剂等杀菌剂及碱性农药混用。多食鞘氨醇杆菌菌株
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