荧光定量PCR仪因操作方便、运行速度快、实验结果准确，受到越来越多的分子生物学研究者青睐。在实验技术成熟的现今，难得不是实验技术上的问题——而是选择哪一种荧光定量PCR仪——你要征询实验室成员的意见、分析实验室目前乃至将来的需求、平衡实验室的预算，更要详细研究各种极富诱惑力的宣传资料。面对各种不同性能的产品，您又该如何选择呢？首先建议大家走出认识荧光定量PCR的两个误区：误区一：仪器通道越多越好随着PCR技术的成熟运用，多重扩增越来越热闹，荧光定量PCR仪也不能幸免。在使用有些厂家5通道的荧光定量仪时，为了确保实验结果的精确性和准确性都要在实验中使用ROX（一种荧光染料）或Referencedye，这些荧光染料都必须单独使用一个检测通道。这样以来，真正能检测多重PCR荧光信号的有效通道只有4个，而且使用校正染料可能会增加后期的使用成本。考虑多重荧光定量PCR的通道数的时候也应该从实验室实际情况出发，多重PCR并非人人适用、人人可用，因为它使实验复杂化了。误区二：real-timePCR仪无需梯度功能对于使用染料法的定量PCR反应，虽然有各种各样的PCR引物设计软件或者经验公式计算熔解温度（Tm值），但运用的公式不同、引物序列不同。PCR仪的应用涉及大部分生命科学领域:食品检测,临床检验,疾病控制,检验检疫,科研实验室,环境卫生等.力康国产PCR仪厂家供应

    仪器制冷部件可以在完成扩增后降温至4℃，保存样品过夜。缺点：管内反应液温度比铝块显示温度滞后；须使用特制且与铝块凹孔形状紧密吻合的薄壁耐热反应管；变温时难以快速克服铝块的热容量；压缩机制冷启动慢、重量大、滞后时间长。2.水浴式PCR仪仪器本身有3个不同温度的水浴，用机械装置将带有反应管的架子移位和升降温度，使温度循环。优点：水为传热介质，温度易恒定，热容量大；反应管形状无特殊要求，温度转换较快扩增效果稳定；具有较高的运行效率，扩增产物特异性好。缺点：高温浴不稳定，水面需用液体石蜡覆盖；改变水浴温度所需时间较长，不易实施复杂程序（如套式PCR）的操作，仪器体积较大；室温影响温度下限。3.变温式流式PCR仪依据空气流的动力学原理，以冷热气流为介质升降温度。优点：变温迅速，扩增效果好，适合于微量、快速PCR；反应器不受形状限制，管外无需涂液体石蜡；测定管内液体温度作为控温依据，显示温度真实可靠；易于用微电脑设定复杂的变温程序；易于制成重量较轻的便携式仪器，适合外出作业。缺点：以室温为温度下限，低温难控制，对空气流的动力学要求较高，需精心设计才能使各管温度均匀。 上海力康梯度PCR仪销售电话PCR技术不仅可用于基础研究,还适用于日常的临床诊断、法医学调查和农业生物技术研究。

力康GM05智能梯度基因扩增仪（控温仪）性能特点：高清晰超大7寸液晶显示屏-可选镀金/镀银模块，提高热传导效率，使实验更高效；方便灵活的模块更换装置，轻松更换模块；热盖旋钮无级可调，适用各型号试管；样品座工作区域全密闭设计，可确保低温保存干燥清洁；可任意角度定位热盖；具备断电记忆功能；环境温度自动读取，自动修正温控误差；支持用户实验预约设定，闹钟提醒功能；支持程序搜索功能，支持常用程序优先选择功能；支持多重嵌套循环；支持梯度PCR、TouchdownPCR、LongPCR设定；可外接移动硬盘和鼠标，支持触摸和鼠标操作；可实现远程故障判断；具有TM值计算功能，可更好地帮助用户进行引物设计；可单独配备PC机操作软件，PC机与主机可分别各自控制，并实现一机多控。

    1．一般性原则(1)长度：一般引物互补区的长度为16-25bp，引物互补区的4×(G十C)十2×(A十T)不要没有必要大于70，一般也不要低于50(2)G十c含量：好在45％一55％之间，但有时受模板限制，无法理想化。但在有几种选择时，可以把G十c含量接近50%作为参数之一(3)碱基分布的随机性：应避免连续出现4个以上的单一碱基。尤其是不应在其3’端出现超过3个的连续G或C，否则会使引物在G十C富集序列区错误引发。(4)引物自身：不能含有很长的牢固的自身互补序列，尤其是引物3‘端回折形成的发夹不要一般超过3碱基，否则会影响引物与模板的结合(5)引物之间：两个引物之间不应有很长的牢固的互补或同源碱基，尤应避免3’端的互补重叠。2.具体原则①引物长度；特异性一般通过引物长度和退火温度控制。如果PCR的退火温度设置在近于引物Tm值（引物/模板双链体的解链温度）几度的范围内，18到24个碱基的寡核苷酸链是有很好的序列特异性的。引物越长，扩增退火时被引发的模板越少。为优化PCR反应，使用确保溶解温度不低于54℃的短的引物，可获得好的效率和特异性。总的来说，好在特异性允许的范围内寻求安全性。每增加一个核苷酸，引物特异性提高4倍；这样，大多数应用的短引物长度为18个核苷酸。 PCR实验室在仪器设备等硬件上要满足开展临床检验的条件，包括生物安全柜和PCR仪。

Heal Force集研发、制造、销售、服务为一体，专注于为您提供完善的医疗及实验室解决方案，力新仪器（上海）有限公司是集团下属销售运营中心。经过三十年的持续创新和高速发展，集团逐步实现了从贸易起步，向多元化发展的质的跨越。集团包括医疗、保健和实验室等专业领域，持续衍生出各类成熟的产品线。自有品牌“Heal Force”在业内享盛誉，现有OR手术室系列、ICU重症麻醉系列、Maternal&Infant 围产产品系列、Rehabilitation康复医疗系列、Laboratory生命科学仪器系列、Healthcare家用健康产品多条产品线。PCR仪被大量运用于医学、生物学实验室中。国产梯度PCR仪制造厂家

实时荧光定量RT-PCR技术是近年来的新型检测技术,已成为分子医学/生物学研究的工具,并在许多领域得到了应用.力康国产PCR仪厂家供应

    它能降解特异性荧光记探针，因此使得间接的检测PCR产物成为可能。（2）此后荧光双标记探针的运用使在一密闭的反应管中能实时地监测反应全过程。这两个发现的结合以及相应的仪器和试剂的商品化发展导致real-timeQ-PCR方法在研究工作中的运用。PCR反应过程中产生的DNA拷贝数是呈指数方式增加的，随着反应循环数的增加，终PCR反应不再以指数方式生成模板，从而进入平台期。在传统的PCR中，常用凝胶电泳分离并用荧光染色来检测PCR反应的终扩增产物，因此用此终点法对PCR产物定量存在不可靠之处。在real-timeQ-PCR中，对整个PCR反应扩增过程进行了实时的监测和连续地分析扩增相关的荧光信号，随着反应时间的进行，监测到的荧光信号的变化可以绘制成一条曲线。在PCR反应早期，产生荧光的水平不能与背景明显地区别，而后荧光的产生进入指数期、线性期和终的平台期，因此可以在PCR反应处于指数期的某一点上来检测PCR产物的量，并且由此来推断模板初的含量。为了便于对所检测样本进行比较，在real-timeQ-PCR反应的指数期，首先需设定一定荧光信号的域值，一般这个域值（threshold）是以PCR反应的前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号（baseline）。 力康国产PCR仪厂家供应

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