PCR仪的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:1、模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单链,以便它与引物结合,为下轮反应作准备;2、模板DNA与引物的退火(复性):模板DNA经加热变性成单链后,温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合;3、引物的延伸:DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下,以dNTP为反应原料,靶序列为模板,按碱基配对与半保留复制原理,合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链重复循环变性--退火--延伸三过程,就可获得更多的“半保留复制链",而且这种新链又可成为下次循环的模板。每完成一个循环需2~4分钟,2~3小时就能将待扩目的基因扩增放大几百万倍(Plateau)。到达平台期所需循环次数取决于样品中模板的拷贝。在此同时认识到蛋白质是接受RNA的遗传信息而合成的。50年代Zamecnik等在形态学和分离的亚细胞组分实验中已发现微粒体(microsome)是细胞内蛋白质合成的部位。 PCR技术起初的临床应用就是从检测镰状细胞和β-地中海贫血的基因突变开始的。力康实时荧光PCR仪批发价格
荧光定量PCR仪因操作方便、运行速度快、实验结果准确,受到越来越多的分子生物学研究者青睐。在实验技术成熟的现今,难得不是实验技术上的问题——而是选择哪一种荧光定量PCR仪——你要征询实验室成员的意见、分析实验室目前乃至将来的需求、平衡实验室的预算,更要详细研究各种极富诱惑力的宣传资料。面对各种不同性能的产品,您又该如何选择呢?首先建议大家走出认识荧光定量PCR的两个误区:误区一:仪器通道越多越好随着PCR技术的成熟运用,多重扩增越来越热闹,荧光定量PCR仪也不能幸免。在使用有些厂家5通道的荧光定量仪时,为了确保实验结果的精确性和准确性都要在实验中使用ROX(一种荧光染料)或Referencedye,这些荧光染料都必须单独使用一个检测通道。这样以来,真正能检测多重PCR荧光信号的有效通道只有4个,而且使用校正染料可能会增加后期的使用成本。考虑多重荧光定量PCR的通道数的时候也应该从实验室实际情况出发,多重PCR并非人人适用、人人可用,因为它使实验复杂化了。误区二:real-timePCR仪无需梯度功能对于使用染料法的定量PCR反应,虽然有各种各样的PCR引物设计软件或者经验公式计算熔解温度(Tm值),但运用的公式不同、引物序列不同。上海力康实时荧光PCR仪价格行情PCR扩增仪通常由热盖部件、热循环部件、传动部件、控制部件和电源部件等部分组成。
力康方舱PCR实验室,通过集装箱模块化组装,装配有较为完整的实验室仪器系统,可解决各大医疗机构改扩建限制问题,也缩短了装配安装周期,能够迅速就位,展开核酸检测工作。在有限空间内,方舱核酸检测实验室高度集成了较为完整的实验室设备,能够安全、快速、省力的进行COVID-19的应急检测,适用于还不具备核酸检测条件或需要快速提升检测能力的地区。配置紫外灯空气消毒和无间断消杀系统模块,传染性医疗废物高温灭菌处理,避免交叉传染并且不污染环境。
在普通PCR仪的基础上增加一个荧光信号采集系统和计算机分析处理系统的PCR仪称作荧光定量PCR仪。其PCR扩增原理和普通PCR仪扩增原理相同,只是PCR扩增时加入的引物是利用同位素、荧光素等进行标记,使用引物和荧光探针同时与模板特异性结合扩增。扩增的结果通过荧光信号采集系统实时采集信号连接输送到计算机分析处理系统得出量化的实时结果输出。把这种PCR仪叫做实时荧光定量PCR仪(qPCR仪)。荧光定量PCR仪有单通道、双通道和多通道。当只用一种荧光探针标记的时候,选用单通道,有多荧光标记的时候用多通道。单通道也可以检测多荧光的标记的目的基因表达产物,因为一次只能检测一种目的基因的扩增量,需多次扩增才能检测完不同目的基因片段的量。主要用于医学临床检测、生物医药研发、食品行业、科研院校等机构。根据DNA扩增时升温介质的不同可以将PCR仪分为:变温铝块式PCR仪、水浴式PCR仪和变温式流式PCR仪。1.变温铝块式PCR仪热源用电阻丝、导电热膜、热泵式珀尔帖半导体元件制作,让带有凹孔的铝块升温,用自来水、制冷压缩机或半导体降温。优点:温度传导快,各管的扩增一致性好;反应管规格一致时无须外涂石蜡油;可用微电脑调节温度转换。 梯度PCR仪多应用于科研、教学机构。
力康GM05智能梯度基因扩增仪(控温仪)性能特点:高清晰超大7寸液晶显示屏-可选镀金/镀银模块,提高热传导效率,使实验更高效;方便灵活的模块更换装置,轻松更换模块;热盖旋钮无级可调,适用各型号试管;样品座工作区域全密闭设计,可确保低温保存干燥清洁;可任意角度定位热盖;具备断电记忆功能;环境温度自动读取,自动修正温控误差;支持用户实验预约设定,闹钟提醒功能;支持程序搜索功能,支持常用程序优先选择功能;支持多重嵌套循环;支持梯度PCR、TouchdownPCR、LongPCR设定;可外接移动硬盘和鼠标,支持触摸和鼠标操作;可实现远程故障判断;具有TM值计算功能,可更好地帮助用户进行引物设计;可单独配备PC机操作软件,PC机与主机可分别各自控制,并实现一机多控。在医学检验学中,pcr仪对传染疾病的诊断意义尤为重要。力康实时荧光PCR仪批发价格
基于聚合酶制造的PCR仪实际就是一个温控设备,能在变性温度,复性温度,延伸温度之间很好地进行控制。力康实时荧光PCR仪批发价格
PCR基因扩增法在遗传性疾病产前诊断中的应用,遗传病是由于遗传物变化而引起的机体某一功能或缺陷或异常所致的疾病,其根本变化在于遗传物质。苯西酮尿症(PKU)是一种常染色体隐性遗传病,患者因苯丙酸羟化酶转化为酷氨酸,使苯氨酸及其代谢物在体内大量蓄积,出现脑组损伤及不可逆性智力发育障碍。PKU患者出生时正常,新生儿一经确诊为PKU停止母乳喂养采用低苯丙氨酸钦食疗法8—10年,可使患者智力水平发展维持正常。由于低苯丙氨酸钦食非常昂贵,一般家庭难以承受,因此,施行产前诊断,防止患儿出生是比较好的选择。PAH只在肝细胞中表达,不能用血细胞,成纤维细胞、羊水、绒毛细胞进行酶活性分析,只能进行基因诊断。PKU的基因变化并非全部PAH基因的缺失,而是以点突变为主要表现形式,而且其突变位点很多。必须使用PCR扩增结合,ASO,SSCP或使用扩增片段长度多态性分析(AmpFLA)进行检测,这些技术都较复杂,检验人员须经专业培训。 力康实时荧光PCR仪批发价格
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