PCR实验室又叫基因扩增实验室。PCR是聚合酶链式反应(PolymeraseChainReaction)的简称。是一种分子生物学技术，用于放大特定的DN段，可看作生物体外的特殊DNA复制。其特点是能将微量的DNA大幅增加，是分子生物学研究和实验的常规方法，PCR实验室广泛应用于生物学各个领域，PCR实验室主要实验项目：检测，乙型肝炎，禽疫病，基因的检测和诊断，DNA指纹，个体识别，亲子鉴定及法医物证等等。pcr实验室设计建设中容易出现的问题：1、PCR实验室的空气流向必须严格按照试剂储存和准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区空气压力逐渐递减方式进行，防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。需要严格的通风设计，若通风设计不合理，会使风速流向混乱，甚至危害人们健康。2、人流路径与物流路径设计不合理进入实验室区域工作人员应该按照以下路径：公共清洁区——更衣间（更换洁净服）——缓冲间——污染实验区工作人员退出实验室的路径为：污染试验区——缓冲间——淋浴间。 PCR可用于检测特定细胞或生物体中等位基因的序列差异。实时荧光PCR仪制造厂家

    PCR实验室的空气流向必须严格按照试剂储存和准备区标本制备区扩增区扩增产物分析区空气压力逐渐递减方式进行，防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。风速流向不得混乱。为了保证房间内的压差和避免污染，应在空调面板处写清楚送风机和排风机的开启顺序和关闭顺序，先后顺序不得混乱。空气洁净级别不同的相邻房间之间的静压差应大于5帕，洁净室(区)与室外大气的静压差应大于10帕，应配备监测静压差的设备，并定期监控。一般情况下，试剂配制室及样品处理室宜呈微正压，以防外界含核酸气溶胶的空气进入，造成污染；可以通过控制进风风量大于排风风量达到正压效果。核酸扩增室及产物分析室应呈微负压，以防含核酸的气溶胶扩散出去污染试剂与样品，可以通过控制排风风量大于进风风量达到负压效果。理想情况下，PCR实验室缓冲间内，可设置正压，使室内空气不流向室外，室外空气不流向室内。PCR实验室进风由原有中央空调控制的要求将中央空调风口安装到指定定点。上海力康基因扩增PCR仪批发价格PCR扩增过程中，荧光定量PCR仪通过荧光信号，对PCR进程进行实时检测。

硬件设计：二通道（X960A）和五通道（X960B）荧光检测系统，LED光源、高分辨率冷光源CCD；所有样品同一时刻采集荧光信号；开放试剂、耗材平台，通用性极强、全封闭样品座设计。温度控制系统：模块采用Peltier-Based技术，扩增效率高，非特异性好-高达5℃/s的升降温速率， 节省用户的时间；高检测灵敏度， 小可检测到单个模板-具有两种温度控制模式，即模块温控和模拟管控，保证检测的灵活性-良好的温控均一性，有效降低了孔间差异，确保低拷贝样品数据的准确测试。

    PCR基因扩增法在遗传性疾病产前诊断中的应用，遗传病是由于遗传物变化而引起的机体某一功能或缺陷或异常所致的疾病，其根本变化在于遗传物质。地中海贫血（Thalassemia）是一种遗传性慢性溶血性贫血病，是世界上常见且发病比高的一种单基因遗传病。在两广、贵州、四川等地发病率较高，在广西等地高达15%。地中海贫血是由于基因突变造成珠蛋白的不平衡，使结构正常的肽链合成量减少甚至没有合成表现为溶血性贫血。接受累基因种类分为α、β、γ等，其中以α、β地贫为常见，危害了大。珠蛋白基因簇位于人6号染色短臂上，有两个重复基因基因位于α1、α2、两个α基因及其旁侧序列有很大的同源性，易出现染色体不等交换，导致α基因缺失－α地贫。α地贫基因部分缺失有α1基因部分缺失、α2基因缺失、α1及α2基因同时缺失及非缺失型地贫。可以应用PCR技术扩增α1、α2基因从而检测这些基因是否缺失、突变等，从而对α型地中海贫血作出诊断。β地中海贫血基因缺陷主要表现为基因序列中单一核苷酸的突变，或少数碱基的缺失、插入，使正常β珠蛋白肽链合成减注或缺失。应用位点特异性寡核苷探针（Aso）进行PCR产物斑点杂交即可对其作出诊断。 普通PCR仪主要应用于科研、教学、临床医学、检验、检疫等。

    而引物3’末端后5到6个核苷酸的错配应尽可能的少。如果3’末端的错配过多，通过降低反应的退火温度来补偿这种错配不会有什么效果，反应几乎注定要失败。引物3’末端的另一个问题是防止一对引物内的同源性。应特别注意引物不能互补，尤其是在3’末端。引物间的互补将导致不想要的引物双链体的出现，这样获得的PCR产物其实是引物自身的扩增。这将会在引物双链体产物和天然模板之间产生竞争PCR状态，从而影响扩增成功。引物3’末端的稳定性由引物3’末端的碱基组成决定，一般考虑末端5个碱基的ΔG。此值的大小对扩增有较大的影响，负值大，则3’末端稳定性高，扩增效率更高，同时也更易于异位引发。需要注意的是，引物3’末端应尽量避免T。实验证明，以T结尾的引物即使与T,G或C错配仍可有效延伸。⑥PCR产物的长度及在耙序列内的位置所有的计算机程序都提供对PCR产物长度范围的选择。一般说来，PCR产物长度对扩增效率有影响。特定的应用情况下，PCR产物长度部分取决于模板材料。预期产物的特定长度经常取决于应用的需要。若目的是建立测定特异DN段的临床检验方法，120～300bp的小DNA扩增产物可能是好的。产物应具有好的特异性和高的产生效率。 PCR也被应用于目标DNA的片段克隆，该技术被称为 PCR 克隆。国产实时定量PCR仪价格比较

梯度PCR仪多应用于科研、教学机构。实时荧光PCR仪制造厂家

    选择该物种使用频率高的密码子，以降低引物的简并性。③应努力避免3’末端的简并，对于大多数氨基酸残基来说，意味着引物3’末端不要位于密码子的第三位。④在一些多义位置使用脱氧次黄嘌呤（dI）代替简并碱基。4．测序引物设计当然，测序引物的设计一般都由测序公司来完成，如果需要自己设计的话；那么除了按照上面所提到的引物设计通用标准外，还需要注意两点：①测序引物的特异性的标准掌握应该更严格一些，也就是说设计时更优先考虑特异性。因为在测序反应中，如果引物与模板在非预期位置退火并引发链延伸，会对结果对来很大的干扰甚至造成结果无法识读。②测序引物的Tm值适当高一些。现在大部分测序反应均选用耐热的测序级DNA聚合酶来催化，并采用PCR的热循环程序。选用的测序引物的Tm值稍高一些，有助于使反应顺利跨过待测模板的二级结构区，也有助于降低非特异反应。5．探针的设计探针的设计，根据不同的用途各有其设计特点，这里只是就通用的原则进行讨论：①探针的长短一般在20-50核苷酸之间，过长合成成本高，且易出现聚合酶合成错误，杂交时间长。太短则特异性下降。②注意G和C的含量努力控制在40-60％，同时一种碱基连续重复不超过4个，以免非特异性杂交产生。 实时荧光PCR仪制造厂家

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