基因zhiliao产品特有的可能会引起迟发性不良反应的风险因素包括：基因组整合活性基因zhiliao产品可能会采用修饰宿主基因组的技术，并有可能在宿主细胞或组织中持续存在。很多基因zhiliao载体的基因整合不会指向基因组的特定位点，可能在整合位点处产生插入突变、或jihuo整合位点附近的原基因等，进而破坏重要基因功能或增加恶性liu的风险，例如，国外已有多项研究报告在接受了使用γ-逆转录病毒载体转导的基因修饰细胞zhiliao的受试者中发生白血病。因此，对于存在此类风险的产品，有必要进行长期随访临床研究以评估出现迟发不良反应的风险。基因编辑可以‘指哪打哪’,四种脱靶检测方法。深圳基因编辑技术脱靶检测guide-sequence

当基因zhiliao产品在生殖qiguan持续存在时，需要进一步研究确定其在生殖细胞（例如卵母细胞、精子）的暴露水平。根据载体类型、复制能力、基因组整合特性、剂量水平、给药途径等因素，分析评估基因zhiliao产品生殖系整合风险。遗传毒性，基因zhiliao产品将遗传物质转移到宿主细胞内或整合到宿主基因组中或对宿主基因组进行编辑，存在潜在的遗传毒性风险。目前对于判断细胞基因组插入/修饰是否会产生遗传毒性、是否较终会发生变依然还缺乏系统的认知，因此，需要分析基因组改变（载体或遗传物质整合进基因组、对基因组编辑等）的特征，并评估相关潜在风险。南京育种脱靶检测企业脱靶检测分析，推荐唯可生物，实验实力强，专业性高，检测效率高，结果准确率高。

改进Cas变体使用SpCas9和SaCas9 变体：已研发出诸如SpCas9-Nickase、dCas9 、dCas9–FokI、xCas9、Cas9-NG、evoCas9、SpCas9 – HFI、eSpCas9和Hypa-Cas9等多种Cas变体，可降低脱靶效应。改进的Cas9同源物具有更广的PAM功能和特异性：实验表明Cpf1、CRISPR-Cpf1-RNP可降低脱靶效应。CRISPR 递送方法：基于病毒的递送方法：腺病毒 (AdV) 显示出整合到靶细胞基因组中的微弱潜力，这一特征有利于限制脱靶效应。然而，AdVs 会引发免疫反应，目前还不能完全排除它与宿主基因组整合的可能性。非病毒递送方法：当sgRNA和Cas9以RNP复合物形式传递时，电穿孔显示植物原生质体中的脱靶突变数量很低。通过脂质体介导的转染传递RNP复合物显示，与质粒DNA转染相比，脱靶突变的发生率较小。

BLESS：利用生物素标签对DSBs进行原位标记，后经PCR扩增实现对于生物素标记片段的富集，并通过二代测序实现脱靶位点检测。直接检测细胞中的切割位点，灵敏度与细胞、组织密切相关。LAM-HTGTS，片段化的gDNA经过LAM-PCR引入接头，然后进行全基因组易位测序。高通量的全基因组范围检测，可准确检测DSBs引发的重排。GUIDE-Seq，将dsODN    s标签整合到DSBs位点，通过二代测序检测这些标签所在的基因组区域，从而确定脱靶突变的位置。广使用的细胞内检测方法。能检测低频脱靶突变。Digenome-Seq，片段化的gDNA与CRISPR/RNP混合孵育，进行全基因组测序检测脱靶。全基因组测序，直接检测切割位点，能检测低频脱靶突变。通过对DSB的标记实现了全基因组无偏脱靶检测，如IDLVs、BLESS、GUIDE-seq技术等。

不同基因zhiliao产品的特殊考虑。关于整合性载体的特殊考虑如受试者接受整合性载体基因zhiliao产品，例如转座子元件、γ-逆转录病毒、慢病毒及其他逆转录病毒载体，或利用整合性载体或基于转座子的载体在体外修饰的细胞，长期随访中需格外关注基因zhiliao产品的基因组整合风险，建议申办方分析基因zhiliao载体在靶细胞或相关替代细胞的基因组中整合的影响（例如是否存在克隆性生长、是否存在优势克隆、克隆性生长是否导致恶性liu等）。如果基因组整合相关风险的分析可行，应注意以下几点：?在接受基因zhiliao产品的较初5年内，两次检测间的采样间隔建议不超过6个月。此后每年至少检测一次，直至检测数据表明不再存在任何安全性风险。针对已经获得的有切割能力的sgRNA，需要进一步明确其体内脱靶效应。广州基因编辑脱靶检测方法

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围绕大家关心的CRISPR基因编辑安全性问题，我们首先对CRISPR脱靶位点检测技术进行一次大盘点，在sgRNA设计阶段需要如何做才能够尽可能地避免脱靶现象的发生。较简单的脱靶位点检测方法是全基因组测序（WGS），但在实际使用中，即使测序深度达到100X，也很难发现一些低频率的脱靶位点，同时测序成本却非常高。为弥补WGS的这些缺陷，常见的脱靶位点检测技术都需要对脱靶位点进行捕获富集，来提高检测灵敏度，降低测序成本。按照实验原理的不同，脱靶位点检测技术可以分为细胞外、细胞内和其他特殊方法这3类。深圳基因编辑技术脱靶检测guide-sequence