这一步至关重要，需要选择合适的裂解液，既要保证细胞充分裂解，释放出蛋白质复合物，又要维持蛋白质之间的相互作用不被破坏。常用的裂解液含有多种成分，如缓冲剂维持 pH 稳定、蛋白酶抑制剂防止蛋白质降解、去污剂增溶蛋白质等。不同的细胞类型和研究目的，可能需要对裂解液的配方进行优化。细胞裂解后，加入针对诱饵蛋白的特异性抗体，在温和的条件下孵育，使抗体与诱饵蛋白充分结合。孵育时间和温度的选择也需要根据实验经验和预实验结果进行调整，一般在 4℃孵育过夜，以保证抗体与抗原充分结合且减少非特异性结合。凭借 anti DYKDDDDK，免疫沉淀可高效富集含该标签蛋白，为分析提供高纯度样本。广州IP免疫沉淀磁珠应用

免疫沉淀的基本实验步骤包括样品制备、抗体孵育、复合物捕获、洗涤和洗脱。首先，样品（如细胞裂解液或组织提取物）需要经过裂解和离心处理，以释放目标蛋白并去除不溶性成分。接下来，特异性抗体与样品中的目标蛋白结合，形成抗原-抗体复合物。为了捕获复合物，通常使用与抗体Fc段结合的固相载体（如ProteinA/G琼脂糖珠）。经过多次洗涤去除非特异性结合的蛋白后，目标蛋白可以通过改变缓冲液条件（如低pH值或添加还原剂）从固相载体上洗脱下来。北京Co IP免疫沉淀磁珠应用免疫沉淀操作简便，但需严格控制实验条件，以确保数据的高重复性和科学性。

另一方面，该技术特异性强，基于抗原 - 抗体的特异性结合，能够准确捕获目标蛋白，有效减少非特异性干扰，为后续的分析提供可靠的样本。然而，IP 免疫沉淀也存在一些局限性。抗体的质量和特异性对实验结果影响巨大，若抗体特异性不佳，容易导致非特异性结合增多，干扰实验结果的准确性。此外，实验条件的优化较为复杂，不同的样品类型和研究目的，需要对裂解液成分、抗体用量、孵育时间和温度等参数进行精细调整，以获得比较好实验效果。在应用方面，IP 免疫沉淀广泛应用于蛋白质功能研究、蛋白质翻译后修饰分析以及疾病机制探索等领域。

在生命科学研究的复杂版图中，蛋白质相互作用网络的解析是揭示生命奥秘的关键环节。Co-IP 免疫沉淀（免疫共沉淀）技术作为研究蛋白质相互作用的经典方法，为科研人员深入探索细胞内分子机制提供了极为有力的工具。Co-IP 免疫沉淀的原理基于蛋白质之间的相互结合以及抗原 - 抗体的特异性识别。在细胞内，许多蛋白质并非孤立存在，而是与其他蛋白质形成复合物共同行使生物学功能。当细胞裂解后，这些蛋白质复合物依然能够保持相对的稳定。免疫沉淀可用于研究蛋白质翻译后修饰，如磷酸化、泛素化等。

Co-IP实验的原理主要基于抗原-抗体反应的特异性结合。在实验中，首先需要将细胞或组织样本进行裂解，以释放其中的蛋白质。然后，加入与目标蛋白质特异性结合的抗体，通过孵育使抗体与蛋白质形成复合物。接着，利用离心等物理手段将抗体-蛋白质复合物沉淀下来。，通过Westernblot等检测手段对沉淀中的蛋白质进行鉴定和定量分析。这一系列步骤构成了Co-IP实验的内容，也是揭示蛋白质间相互作用关系的关键所在。Co-IP技术具有许多独特的优势，如操作简便、灵敏度高、能够反映细胞内蛋白质相互作用的真实情况等。然而，该技术也存在一些局限性。例如，抗体的特异性和亲和力将直接影响沉淀效果，如果抗体特异性不强或亲和力不足，可能导致假阳性或假阴性结果的出现。此外，细胞裂解条件、沉淀效率以及后续检测手段的选择也会影响实验结果的准确性。因此，在进行Co-IP实验时，需要严格控制实验条件，确保结果的可靠性。免疫沉淀结合质谱分析，可鉴定低丰度蛋白，推动疾病标志物的发现。anti DYKDDDDK免疫沉淀磁珠价格

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孵育结束后，加入 Protein A/G 珠子，再次孵育，使抗原 - 抗体复合物与珠子紧密结合。随后通过离心或磁力分离，将结合有复合物的珠子收集起来，接着用洗涤液多次洗涤，去除未结合的杂质，确保沉淀的纯度。，利用洗脱液将目标蛋白从珠子上洗脱下来，得到纯化的目标蛋白，用于后续的分析检测，如蛋白质印迹（Western Blot）、质谱分析（Mass Spectrometry）等。IP 免疫沉淀技术具有诸多优势。一方面，它能够从复杂的生物样品中高效富集低丰度的目标蛋白，极大地提高了检测的灵敏度，使研究人员能够对微量表达的蛋白质进行深入研究。广州IP免疫沉淀磁珠应用