肿瘤细胞成像：近红外荧光染料IR-780具备使多种肾透明细胞*细胞显像的能力，对正常肾胚上皮细胞则无此能力，可用于血液中肾透明细胞*细胞的特异性诊断。这为肿瘤细胞的检测和诊断提供了新的方法21。疾病标志物检测：设计合成的近红外荧光探针RB-Phenylacrylate(NOF1)，用于高选择性和高灵敏度检测半胱氨酸(Cys)，并成功应用于活细胞、斑马鱼和小鼠中半胱氨酸的近红外荧光成像检测。近红外荧光探针RB-Phenyldiphenylphosphinate(NOF2)用于过氧亚硝酸根的荧光成像，实现了活细胞和小鼠炎症模型中ONOO?的荧光成像检测。这些探针为疾病标志物的检测和成像提供了新的手段23。四、支持超分辨率成像新型近红外氧杂蒽荧光染料如KRhs，可用于超分辨率成像。KRhs显示出强烈的近红外发射峰，在700nm处具有高荧光量子产率，且在没有增强缓冲液的帮助下，表现出随机荧光开关特性，支持单荧光团的时间分辨定位。KRhs被功能化为KRh-MitoFix、KRh-Mem和KRh-Halo，分别具有线粒体、质膜和融合蛋白靶向能力，可用于活细胞中这些目标的超分辨率成像20。电压敏感型荧光染料标记机制。纳米荧光染料DID

在实际应用中，环境因素对荧光染料的性能有着重要影响，通过有效控制环境因素可以显著提高荧光染料的性能。以下是一些具体的方法：控制温度温度对荧光染料的荧光发射效率有***影响。如Robertson等人在2020年的研究中提出了一种3D打印的铜比色皿支架与基于珀尔帖的温度控制器平台相结合的方法，用于稳定读取现场溶液的荧光发射31。以罗丹明B为例，通过不同水平的直流电控制珀尔帖装置，展示了该装置的温度控制能力，并测试了不同温度水平下罗丹明B的荧光效率。实验表明，在25℃至62℃的温度范围内，通过该装置可以将温度维持在±1℃以内，从而实现对荧光染料性能的稳定控制。此外，温度还会影响荧光染料的稳定性。例如，在较高温度下，某些荧光染料可能会发生降解或结构变化，从而降低其荧光性能。因此，在实际应用中，需要根据荧光染料的特性选择合适的温度范围，并采取有效的温度控制措施。四川光敏剂荧光染料DiOLISTIC 染色标记机制。

粒子介导的荧光染料的弹道递送标记机制**近，已经使用粒子介导的荧光染料的弹道递送以快速有效的方式标记神经元种群。在单个神经元的膜与涂有亲脂性染料的颗粒接触后，该技术允许以高尔基体样的方式快速标记整个神经元。神经元可以用不同颜色的染料以受控的密度标记，以促进细胞之间结构相互作用的研究。其机制是利用粒子的高速运动将荧光染料传递到神经元中，实现快速标记17。DiOLISTIC染色标记机制DiOLISTIC染色使用基因***将荧光染料（例如DiI）引入大脑切片的神经元中。其标记机制是利用基因***将涂有荧光染料的颗粒高速发射到大脑切片中，使染料颗粒与神经元细胞膜接触，从而实现对神经元的标记。该技术可以应用于所有年龄、物种和基因型的动物，并且可以与免疫染色结合以鉴定细胞的特定亚群。

DiI染料标记机制DiI（1,1'-dioctadecyl-3,3,3',3'-tetramethylindocarbocyanineperchlorate）是一种亲脂性的荧光染料，常用于神经元标记。在大鼠中，通过结晶状的荧光DiI可以对牙初级传入神经元（DPANs）进行逆行荧光标记。在小鼠中，虽然也可以使用DiI进行标记，但之前*能使用Fluoro-Gold这种具有神经毒性的荧光染料，且其膜穿透特性优于碳菁染料。后来研究人员对DiI在大鼠中的标记技术进行了重新评估，旨在将其应用于小鼠。新型的DiI配方具有改进的穿透性能和染色效率，可以评估轴突染料从应用部位到三叉神经节的运输速度、染色的DPANs数量以及荧光强度。其标记机制主要是利用DiI的亲脂性，能够与神经元细胞膜结合，随着轴突的运输而扩散到神经元的各个部位，从而实现对神经元的标记。染料的细胞毒性也会影响其在细胞内的稳定性。

标记神经元：在动物体内，特定的荧光染料可以稳定且持久地标记皮质脊髓神经元，用于病理生理学研究和切片膜片钳研究。如将Fluoro-Red和Fluoro-Green注入麻醉新生大鼠的颈脊髓，固定的脑切片显示出离散的内部皮质层中细长或金字塔形细胞轮廓中的***荧光，与V层锥体细胞一致，并且标记的神经元使用切片膜片钳方法显示出自发突触活动4。用于细菌成像：有机荧光染料可用于大肠杆菌的超分辨率成像实验。通过分光光度计测定大肠杆菌的生长曲线，以及将大肠杆菌与有机荧光染料尼罗红共孵育，在超分辨率显微镜下实现了大肠杆菌细胞壁的荧光标记。这一实验既结合了生物化学和分析化学相关实验及仪器的原理和操作，也有利于学生深入了解新型的细菌荧光标记技术6。近红外荧光寿命成像：近红外（NIR）染料在小动物成像和漫射光学断层扫描中用作荧光标记。通过三种方式将现有的共聚焦和多光子激光扫描显微镜（LSM）与时间相关单光子计数（TCSPC）荧光寿命成像（FLIM）系统相适应，用于近红外FLIM。测试的许多近红外染料在生物组织中显示出明显的寿命变化，取决于它们所结合的组织结构，因此近红外FLIM可以提供有关组织组成和局部生化参数的补充信息7。不同类型荧光染料的稳定性直接关系到成像质量。济南荧光染料DIR

不同结构修饰的噁嗪衍生物荧光染料在对动物神经成像的效果上存在着一定的差异。纳米荧光染料DID

电压敏感型荧光染料标记机制在胚胎***系统中，花菁-若丹宁染料NK2761被证明是检测神经元活性**有用的吸收染料。研究人员还评估了电压敏感型荧光染料在胚胎***系统中进行光学记录的适用性。从7天大的雏鸡胚胎中筛选出了分离的脑干-脊髓制品中的八种苯乙烯基（半菁）染料，如di-2-ANEPEQ、di-4-ANEPPS、di-3-ANEPPDHQ等。这些染料虽然信噪比低于吸收染料，但可以检测到清晰的光学响应。其标记机制是基于染料对电压变化的敏感性，当神经元膜电位发生变化时，染料的荧光特性也会相应改变，从而可以通过光学成像技术监测神经元的活动。纳米荧光染料DID