三、脂质体组成对转染效率的影响不同脂质组成的影响：研究发现脂质体的组成对不同类型细胞的转染效率有影响。例如，四种不同的DOTAP与DOPE重量比的脂质体配方对不同细胞系的转染效率不同。Huh7和AGS细胞的比较好脂质体组成是T1P0和T3P1；COS7细胞是T3P1和T1P1；A549细胞是T1P1和T1P36。脂质体结构的影响：脂质体复合物的形状会随着DOPE比例的增加从层状结构变为倒六角形结构，但在所有使用的细胞系中，特定结构在转染效率上没有明确的优势6。四、其他因素的影响血清的影响：对于某些细胞，血清的存在会影响转染效率。如Siha细胞在无血清培养基中培养时转染效率更高，而在Caco-2细胞的转染中，血清在本实验室条件下并不影响转染效率19。细胞传代次数：Caco-2细胞在2-5次细胞传代时转染效率比较高9。综上所述，脂质体转染对不同类型细胞的影响存在多方面的差异，包括转染效率、影响因素以及脂质体组成等。在进行脂质体转染实验时，需要根据不同的细胞类型优化转染条件，以获得比较好的转染效果。但似乎找到一种既能改善基因表达又不影响细胞、不对细胞造成损害的技术也至关重要。福建脾转染试剂

阳离子聚合物作为转染试剂结合机制：以阳离子聚合物EZTransCellReagent为例，在优化RNA干扰（RNAi）条件的研究中发现，阳离子聚合物通过与RNA分子结合来实现转染14。例如，设计针对GFP的shRNA，使用EZ转染试剂将其转染到细胞中，shRNA***降低了GFP的表达。预稀释的转染试剂在室温下以及小核酸的存在可增加转染效率，且在24小时时达到峰值。与环状核酸相比，线性核酸与阳离子聚合物结合时显示出更高的转染效率和更高的基因组整合率。作用特点：阳离子聚合物介导的RNAi条件优化后，为未来的RNAi研究提供了有用的数据。小动物转染试剂检测并被困在核内小体中，从这些囊泡结构中释放出来，进入核周区域，后进入细胞核。

    对基因表达的影响：在微小RNA-1180转染对肾*细胞生长的影响的研究中，肾*细胞分为两组：dsControl组和miR-1180组。实时定量（qRT）-PCR检测p21mRNA的表达变化，结果显示转染miR-1180后，786-O和ACHN细胞中p21mRNA水平分别上调（P〈）和（P〈），p21蛋白表达趋势与qRT-PCR结果相符，CDK4、CDK6和CyclinD1蛋白的表达明显下调。同时，流式细胞术（FCM）检测细胞周期变化显示细胞周期被阻滞在G0/G1期，MTS结果显示细胞活力明显降低，集落形成实验显示细胞增殖能力降低。结论是miR-1180能******肾*细胞中p21蛋白的表达，并抑制肾*细胞786-O和ACHN的生长1。在微小RNA-330-5p过表达对宫颈*细胞C33A中肿瘤坏死因子受体相关因子4（TRAF4）基因表达的抑制作用和对C33A细胞增殖的影响的实验中，通过Lipofectamine2000转染试剂分别向宫颈*细胞系C33A瞬时转染miR-330-5p模拟物（设为实验组）或者转染miR-NC（设为对照组），结果显示与对照组相比，实验组C33A细胞中TRAF4mRNA下降（p＜），TRAF4蛋白下降（p＜）。集落形成实验显示，实验组C33A细胞的增殖能力明显下降（p＜）。结论是miR-330-5p可通过降低宫颈*细胞C33A中TRAF4的表达抑制宫颈*细胞C33A的增殖。

    核细胞、关节软骨细胞、间充质干细胞（MSCs）：选择两种合成转染试剂（阳离子脂质商业试剂LipofectamineRNAiMAX和聚乙烯亚胺（PEI））以及两种天然衍生转染试剂（多糖壳聚糖（98%脱乙酰化）和透明质酸（20%酰胺化）），用于将siRNA递送到包括髓核细胞、关节软骨细胞和间充质干细胞在内的原代间充质细胞中。以甘油醛-3-磷酸脱氢酶（***DH）作为内源性模型基因，在转染后第3天和第6天评估由20nM或200nMsiRNA引起的沉默程度。除了沉默效率外，还评估了细胞毒性、DNA含量变化和细胞分化潜能等非特异性影响。在四种转染试剂中，基于商业脂质体的试剂在20nMsiRNA时是**有效的siRNA递送试剂，其次是壳聚糖。使用阳离子脂质体、壳聚糖和PEI转染显示出不同程度的活力和DNA含量下降，这取决于所评估的siRNA剂量和细胞类型，但与***DH敲低无关。一些对DNA含量的影响并不伴随着活力的相应变化。然而，细胞周期抑制或进展的标记基因（如p21和PCNA）的表达变化不能解释DNA含量的变化。有趣的是，发现了***DH活性的非特异性上调，这***于软骨细胞15。肝*细胞HepG2和：比较两种人类细胞模型中两种转染剂，即基于脂质体的Lipofectamine?RNAiMAX和基于聚合物的GenMute?。 RNA 转染试剂在不同实验环境下表现出不同的效果。

原代细胞和干细胞的转染效率通常较低。原代细胞刚刚从组织中分离出来，还保留着体内复杂的生理特性，其细胞膜上的受体和内吞机制等可能不适应脂质体转染。例如，原代间充质干细胞的转染效率可能低于10%。干细胞由于其特殊的自我更新和分化潜能，其细胞内部的信号通路和膜运输机制对脂质体转染比较敏感，转染效率也不高。而且在转染过程中，还需要考虑不影响干细胞的干性，这也增加了转染的难度。

原代细胞和干细胞对脂质体的毒性反应比较敏感。脂质体可能会干扰它们的正常生理功能，如影响干细胞的自我更新和分化能力。对于原代细胞，可能会改变其原有的表型或者***细胞的应激反应，导致细胞提前衰老或者死亡。 纳米颗粒的主要特性使它们能够用于细胞转染。肺转染试剂动物实验

由于CRISPR/Cas的发现，基因组编辑领域经历了一场变革。福建脾转染试剂

优化电转方法筛选**适电压和脉冲时间：不同细胞种类电转所需的**适电压和脉冲时间不同。例如，人成纤维细胞电转modRNA的**适电压为440V，**适脉冲时间为30ms；Hela、293T、3T3细胞电转**适电压分别为425V、400V、440V，**适脉冲时间均为30ms；人/兔外周血来源的悬浮的单个核细胞的**适电压分别为840V和860V，**适脉冲时间均为20ms。通过筛选**适电压和脉冲时间，可以提高RNA转染效率，同时证明了电转法转染modRNA进入细胞的可行性，且可同时将两种modRNA导入同一个细胞内6。RNA电穿孔高效转染原代淋巴细胞：使用体外转录的mRNA通过电穿孔可以实现高基因转染效率和低转染相关毒性。例如，在用GFP或mCD62L转染的受激原代人和鼠T淋巴细胞中观察到90％以上的转基因表达和80％以上的活细胞。GFPRNA对未刺激的人PBMC或鼠脾细胞进行电穿孔，分别产生95％和56％的GFP?细胞。此外，基因表达迅速且持久，对经过RNA电穿孔的T淋巴细胞未观察到不良影响7。福建脾转染试剂