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上海DOTAP 转染试剂

来源: 发布时间:2025-02-07

对于容易转染的贴壁细胞如人胚肾细胞(HEK293)和人宫颈*细胞(HeLa),脂质体转染效率相对较高。这些细胞具有较强的内吞能力,能够有效地摄取脂质体-核酸复合物。例如,在标准的转染条件下,HEK293细胞的转染效率可以达到50%-70%。而对于一些难转染的贴壁细胞,如原代肝细胞和某些神经细胞,其转染效率较低。这是因为它们的细胞膜结构比较复杂,可能存在较厚的糖萼或者紧密的细胞间连接,阻碍了脂质体-核酸复合物的进入。例如,原代肝细胞的转染效率可能只有10%-20%。

一般来说,贴壁细胞对脂质体的耐受性相对较好。但是,在高浓度脂质体转染的情况下,即使是耐受性好的细胞也会受到影响。例如,HeLa细胞在高浓度脂质体转染时,可能会出现细胞膜完整性受损,表现为细胞内乳酸脱氢酶(LDH)释放增加,细胞的代谢活动也会受到一定程度的干扰。对于难转染的贴壁细胞,由于其本身比较脆弱,较低浓度的脂质体也可能产生明显的细胞毒性。比如原代神经细胞,脂质体可能会破坏其精细的神经突起结构,影响细胞的正常生理功能。 是由非离子核酸与阳离子脂质体(CLs)表面结合,形成多层脂质-核酸复合物而形成的。上海DOTAP 转染试剂

三、脂质体组成对转染效率的影响不同脂质组成的影响:研究发现脂质体的组成对不同类型细胞的转染效率有影响。例如,四种不同的DOTAP与DOPE重量比的脂质体配方对不同细胞系的转染效率不同。Huh7和AGS细胞的比较好脂质体组成是T1P0和T3P1;COS7细胞是T3P1和T1P1;A549细胞是T1P1和T1P36。脂质体结构的影响:脂质体复合物的形状会随着DOPE比例的增加从层状结构变为倒六角形结构,但在所有使用的细胞系中,特定结构在转染效率上没有明确的优势6。四、其他因素的影响血清的影响:对于某些细胞,血清的存在会影响转染效率。如Siha细胞在无血清培养基中培养时转染效率更高,而在Caco-2细胞的转染中,血清在本实验室条件下并不影响转染效率19。细胞传代次数:Caco-2细胞在2-5次细胞传代时转染效率比较高9。综上所述,脂质体转染对不同类型细胞的影响存在多方面的差异,包括转染效率、影响因素以及脂质体组成等。在进行脂质体转染实验时,需要根据不同的细胞类型优化转染条件,以获得比较好的转染效果。武汉转染试剂现货PLL(聚L -赖氨酸)是生理条件下带正电的多氨基酸,当链长超过20个残基时,它与质粒DNA结合并凝聚成致密颗粒。

转染时间对奶牛子宫内膜原代上皮细胞转染的影响:在奶牛子宫内膜原代上皮细胞中,应用带有FAM标记的miRNA-185mimics为报告基因,检测两种不同转染试剂(LipofectamineRNAiMAX与Lipofectamine2000)在细胞接种不同时间后的转染效率33。结果显示,无论使用哪种转染试剂,12h的转染效率均极***高于18、24h,LipofectamineRNAiMAX各时间点的转染效率均极***高于Lipofectamine2000。并且,使用LipofectamineRNAiMAX作为转染试剂时,12h的荧光强度也比较高。这说明在奶牛子宫内膜原代上皮细胞中,选择合适的转染试剂和转染时间可以提高转染效率。同时,该研究未明确转染对细胞死亡的影响,但可以进一步研究不同转染条件下细胞的存活率,以确定在提高转染效率的同时降低细胞死亡的比较好条件。

    对基因表达的影响:在微小RNA-1180转染对肾*细胞生长的影响的研究中,肾*细胞分为两组:dsControl组和miR-1180组。实时定量(qRT)-PCR检测p21mRNA的表达变化,结果显示转染miR-1180后,786-O和ACHN细胞中p21mRNA水平分别上调(P〈)和(P〈),p21蛋白表达趋势与qRT-PCR结果相符,CDK4、CDK6和CyclinD1蛋白的表达明显下调。同时,流式细胞术(FCM)检测细胞周期变化显示细胞周期被阻滞在G0/G1期,MTS结果显示细胞活力明显降低,集落形成实验显示细胞增殖能力降低。结论是miR-1180能******肾*细胞中p21蛋白的表达,并抑制肾*细胞786-O和ACHN的生长1。在微小RNA-330-5p过表达对宫颈*细胞C33A中肿瘤坏死因子受体相关因子4(TRAF4)基因表达的抑制作用和对C33A细胞增殖的影响的实验中,通过Lipofectamine2000转染试剂分别向宫颈*细胞系C33A瞬时转染miR-330-5p模拟物(设为实验组)或者转染miR-NC(设为对照组),结果显示与对照组相比,实验组C33A细胞中TRAF4mRNA下降(p<),TRAF4蛋白下降(p<)。集落形成实验显示,实验组C33A细胞的增殖能力明显下降(p<)。结论是miR-330-5p可通过降低宫颈*细胞C33A中TRAF4的表达抑制宫颈*细胞C33A的增殖。 小RNA和质粒DNA的共转染可用于评估转染效率。

动物视网膜成像技术为基础研究提供了有力工具。从小鼠视网膜多种成像方式探讨眼科光学成像技术进展:张鹏飞、张廷玮、宋维业阐述了近年来在小鼠和人眼视网膜高精度光学成像领域出现的技术突破6。几种在人眼视网膜成像中广泛应用的光学成像技术在动物视网膜中得到了成功应用,实现了对动物视网膜的高精度细胞级别成像,为科研工作者提供了有力工具。同时,动物视网膜的研究工作也开发了一些新型成像技术或增强了对人眼视网膜功能机理的理解。综上所述,动物成像技术在磁共振成像、热成像、X射线发光成像、近红外高光谱成像、非人灵长类动物超高场磁共振脑成像、新型动物摇篮的小动物多重成像、红外成像以及动物视网膜成像等方面都取得了***的发展,为动物研究和相关领域的发展提供了重要的技术支持。转染时推荐使用血清减少或无血清培养基包括阳离子转染试剂,如Lipofectamine、HiperFect 和EndofectinMax。安徽转染试剂便宜

化学转染的效率可能取决于几个因素,如使用的试剂类型、靶细胞的来源和性质,以及选择的DNA与试剂比例。上海DOTAP 转染试剂

RNA转染试剂在不同细胞类型中的转染机制存在多种差异。以下将详细阐述不同RNA转染试剂在不同细胞类型中转染机制的差异表现。脂质体转染试剂:机制概述:脂质体转染试剂通常由阳离子脂质和中性脂质组成,其转染机制主要是通过与带负电的RNA分子结合,形成脂质体-RNA复合物。这个复合物能够与细胞膜相互作用,通过内吞作用或膜融合等方式进入细胞。进入细胞后,脂质体-RNA复合物逐渐释放RNA分子,使其能够在细胞内发挥作用。在不同细胞类型中的表现:在肾*细胞系786-O和ACHN中,目前虽未明确提及脂质体转染试剂的作用,但可以推测其可能通过类似的机制进入细胞,影响细胞内的基因表达和细胞生长。例如,微小RNA-1180(miR-1180)转染对肾*细胞生长产生影响,虽然未明确指出转染试剂类型,但脂质体转染试剂可能在类似的研究中发挥作用1。在MEF细胞、3T3细胞、Hela细胞及MCF-7细胞中,MessageMax脂质体转染试剂能将modGFP高效转染入细胞,并实现modGFP和modmCherry在MEF细胞中的共转及核内因子nGFP和mTBX5在MEF细胞核中的定位。这表明脂质体转染试剂在不同类型的细胞中能够有效地将RNA分子转运到细胞内,并实现特定蛋白的表达。上海DOTAP 转染试剂

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