转染时间对奶牛子宫内膜原代上皮细胞转染的影响：在奶牛子宫内膜原代上皮细胞中，应用带有FAM标记的miRNA-185mimics为报告基因，检测两种不同转染试剂（LipofectamineRNAiMAX与Lipofectamine2000）在细胞接种不同时间后的转染效率33。结果显示，无论使用哪种转染试剂，12h的转染效率均极***高于18、24h，LipofectamineRNAiMAX各时间点的转染效率均极***高于Lipofectamine2000。并且，使用LipofectamineRNAiMAX作为转染试剂时，12h的荧光强度也比较高。这说明在奶牛子宫内膜原代上皮细胞中，选择合适的转染试剂和转染时间可以提高转染效率。同时，该研究未明确转染对细胞死亡的影响，但可以进一步研究不同转染条件下细胞的存活率，以确定在提高转染效率的同时降低细胞死亡的比较好条件。提高 RNA 转染试剂的转染效率同时降低细胞死亡。中国澳门郑州转染试剂

考虑实验目的和应用场景不同的实验目的和应用场景可能需要不同类型的转染试剂。***应用：如果转染试剂用于基因***或药物研发等应用，那么需要选择具有良好生物相容性和安全性的试剂。在安全有效的递送mRNA使用改性PEI基脂质聚合物的研究中，探索了All-Fect和Leu-FectC作为新型转染试剂，这些试剂具有优异的生物相容性、高效的递送能力和强大的溶酶体逃逸能力，可直接增加mRNA稳定性并促进高效基因翻译，适用于基因***等应用4?；⊙芯浚憾杂诨⊙芯渴笛?，可能更注重转染效率和实验的可重复性。在不同转染方式用于modRNA转染人脂肪干细胞的初步研究中，比较了不同转染方式的转染效率和蛋白表达情况，以及在体内促进血管再生的效果，为基础研究提供了参考10。综上所述，选择**适合的RNA转染试剂需要综合考虑转染效率、细胞毒性、RNA需求、血清兼容性、多因子转染能力以及实验目的和应用场景等多个因素。在选择转染试剂时，可以参考已有的研究文献，进行预实验以评估不同试剂的性能，并根据实验需求和条件选择**合适的转染试剂。宁夏体外转染试剂肌内注射脂质体不能引起强烈的毒性反应，这与肺内或静脉注射途径的情况不同。

    RNA转染试剂在不同细胞类型中的效果存在***差异。以下将详细阐述不同细胞类型对RNA转染试剂效果的具体影响。肾*细胞系786-O和ACHN：微小RNA-1180（miR-1180）转染对肾*细胞系786-O和ACHN生长有影响。实时定量（qRT）-PCR检测显示转染miR-1180后，786-O和ACHN细胞中p21mRNA水平分别上调。Westernblot检测表明p21蛋白表达趋势与qRT-PCR结果相符，同时细胞周期蛋白依赖性激酶（CDK）4、CDK6和CyclinD1蛋白的表达明显下调。流式细胞术（FCM）结果显示转染miR-1180后，位于G0/G1期的细胞比例明显增大，而位于S期和G2/M期的细胞比例明显下降，表明细胞周期被阻滞在G0/G1期。MTS结果显示转染miR-1180后，两种肾*细胞活力明显降低。集落形成实验显示miR-1180组的集落数数量明显较少，表明细胞增殖能力降低1。HeLa细胞：两种常见的RNA干扰（RNAi）转染试剂DharmaFECT1和INTERFERin，在使用非靶向siRNAs的模拟转染中，会引起HeLa细胞脂质组的改变。一些脂质对两种可能化学性质不同的转染试剂都有反应，而其他脂质种类只对其中一种试剂有反应。虽然这些脂质组改变的功能影响尚待研究，但实验表明在RNAi实验中使用适当的模拟转染对照非常重要，比较好辅以正交扰动。

选择合适的转染试剂GenMute试剂在人肝*细胞模型中的应用：在人肝*细胞HepG2和Huh7.5中，研究对比了脂质体类的Lipofectamine?RNAiMAX和HepG2特异性的聚合物类GenMute?两种转染试剂30。通过细胞成像分析发现，GenMute处理的细胞对荧光标记的阴性对照siRNA的摄取高于LipofectamineRNAiMAX转染的细胞。并且，MTT实验表明，GenMute转染的细胞比LipofectamineRNAiMAX处理的细胞具有更高的存活率。这提示在人肝*细胞模型中，GenMute试剂可能是更适合的转染试剂，在提高转染效率的同时降低了细胞死亡。siRNA共轭壳聚糖纳米颗粒在脊髓损伤模型中的应用：在创伤性脊髓损伤（SCI）模型中，通过制备带有抗体靶向部分的siRNA共轭壳聚糖复合物，以抑制诱导型一氧化氮合酶（iNOS）的表达，该复合物主要靶向M1巨噬细胞31。实验结果表明，Ab-siRNA共轭壳聚糖纳米颗粒在体外***降低了M1极化巨噬细胞中的iNOS表达，具有高转染效率和低细胞毒性。在体内应用该纳米颗粒后，SCI后的iNOS表达和细胞凋亡均减少。这说明在特定的病理模型中，针对性设计的纳米颗粒转染试剂可以在提高转染效率的同时降低细胞死亡。在大肠杆菌细胞中复制的质粒通常含有二核苷酸频率为1:16的CpG基序，这与细菌DNA中的频率相似。

转染试剂用量：转染试剂的用量是影响转染效率的重要因素之一。过多或过少的转染试剂都可能导致转染效率降低。在阳离子脂质体Lipofectamine2000对PC12细胞的转染实验中，发现lipo2000用量为5μL，DNA2μg，转染时间为6h时，PC12细胞转染率高达40%，且未影响细胞的正常分泌3。在脂质体介导法转染肿瘤细胞效率的优化实验中，研究了细胞接种密度、DNA用量、脂质体与DNA的比例等因素对脂质体转染效率的影响。结果表明，2-5次细胞传代，2×105接种密度、4μgDNA用量、2.5:1的脂质体与DNA比例、30min脂质体-DNA复合物形成时间以及6h细胞与复合物孵育时间，转染效率比较高9影响物理转染或机械转染效率的因素在很大程度上取决于这些方法的基本原理。山东非脂质体转染试剂

脂质复合物又称阳离子脂质-核酸复合物(CLNACs)。中国澳门郑州转染试剂

RNA电穿孔高效转染原代淋巴细胞：使用体外转录的mRNA通过电穿孔可以实现高基因转染效率和低转染相关毒性。例如，在用GFP或mCD62L转染的受激原代人和鼠T淋巴细胞中观察到90％以上的转基因表达和80％以上的活细胞。GFPRNA对未刺激的人PBMC或鼠脾细胞进行电穿孔，分别产生95％和56％的GFP?细胞。此外，基因表达迅速且持久，对经过RNA电穿孔的T淋巴细胞未观察到不良影响7。五、优化共转染方法整合共转染和平行共转染：研究不同的共转染和连续转染方法，特别是体外转录信使RNA（IVTmRNA）。对于在纳米载体形成之前预混合的IVTmRNAs（整合共转染）和同时用单独形成的纳米载体转染细胞（平行共转染），分析决定共转染效率的定量参数。同时递送siRNA和mRNA也表明整合方法的比较高共转染效率，但由于两个**运营实体的峰值输出在动力学上不同，连续交付的效率比较高。中国澳门郑州转染试剂