对基因表达的影响:在微小RNA-1180转染对肾*细胞生长的影响的研究中,肾*细胞分为两组:dsControl组和miR-1180组。实时定量(qRT)-PCR检测p21mRNA的表达变化,结果显示转染miR-1180后,786-O和ACHN细胞中p21mRNA水平分别上调(P〈)和(P〈),p21蛋白表达趋势与qRT-PCR结果相符,CDK4、CDK6和CyclinD1蛋白的表达明显下调。同时,流式细胞术(FCM)检测细胞周期变化显示细胞周期被阻滞在G0/G1期,MTS结果显示细胞活力明显降低,集落形成实验显示细胞增殖能力降低。结论是miR-1180能******肾*细胞中p21蛋白的表达,并抑制肾*细胞786-O和ACHN的生长1。在微小RNA-330-5p过表达对宫颈*细胞C33A中肿瘤坏死因子受体相关因子4(TRAF4)基因表达的抑制作用和对C33A细胞增殖的影响的实验中,通过Lipofectamine2000转染试剂分别向宫颈*细胞系C33A瞬时转染miR-330-5p模拟物(设为实验组)或者转染miR-NC(设为对照组),结果显示与对照组相比,实验组C33A细胞中TRAF4mRNA下降(p<),TRAF4蛋白下降(p<)。集落形成实验显示,实验组C33A细胞的增殖能力明显下降(p<)。结论是miR-330-5p可通过降低宫颈*细胞C33A中TRAF4的表达抑制宫颈*细胞C33A的增殖。 与DNA转染类似,RNA可以通过基于RNA的病毒或非病毒载体导入真核细胞。湖南转染试剂教做
考虑细胞毒性低细胞毒性的转染试剂对于保持细胞的活性和正常生理功能至关重要。评估细胞活力:可以通过检测细胞的存活率、增殖能力等指标来评估转染试剂的细胞毒性。在研究不同转染试剂对C2C12细胞的转染效率时,通过优化DNA:转染剂比例和细胞密度,使所有试剂在达到较高转染效率的同时,对细胞生长和活力的影响有限6。在比较不同转染试剂递送siRNA的摄取、敲低效率和毒性情况的研究中,新开发的CALNPRNAi转染试剂转染效率***高于传统转染试剂,同时毒性比较低7。选择温和的试剂:一些转染试剂可能对细胞的毒性较小,例如基于脂质的转染试剂通常比基于病毒的转染试剂更温和。在颅内递送合成mRNA的研究中,使用常用的转染试剂将合成mRNA递送至小鼠大脑,结果表明该模型中合成mRNA可以成功递送至大脑,且没有可测量的毒性8。山东神经细胞转染试剂不同种类的纳米颗粒转染细胞系后,产生不同的效率、毒性和组织特异性。
二、影响因素的差异细胞接种密度:不同类型的细胞在比较好转染效率下的细胞接种密度不同。例如,宫颈*细胞Hela和Siha的比较好接种密度为每24孔板的每孔1.5×10?个细胞1,而研究中Caco-2细胞的比较好接种密度为2×10?9。DNA用量:各种细胞所需的DNA用量也存在差异。如PC12细胞转染的比较好DNA用量为2μg3,而Caco-2细胞转染时比较好DNA用量为4μg9。脂质体与DNA的比例:不同细胞类型对应的比较好脂质体与DNA的比例不同。Hela细胞中miRNA与脂质体比例为1:0.5,Siha细胞中为1:0.71;Caco-2细胞转染时比较好脂质体与DNA比例为2.5:19。复合物形成时间和孵育时间:不同细胞类型对脂质体-DNA复合物的形成时间和细胞与复合物的孵育时间要求不同。例如,Hela和Siha细胞未明确提及复合物形成时间和孵育时间,而Caco-2细胞的比较好脂质体-DNA复合物形成时间为30min,细胞与复合物孵育时间为6h9。
脂质体组成:脂质体的组成对转染效率有重要影响。不同的脂质体可能具有不同的电荷性质、大小和稳定性,这些因素都会影响脂质体与细胞的相互作用。阳离子脂质体通常具有较高的转染效率,因为它们可以与带负电荷的DNA结合,并通过静电作用与细胞表面结合。例如,Lipofectamine2000和Lipofectamine3000都是常用的阳离子脂质体,它们在不同类型的细胞中都表现出较高的转染效率11316。脂质体的组成还可能影响其在细胞内的释放和稳定性。一些脂质体可能更容易被细胞内的酶降解,从而降低转染效率。是由非离子核酸与阳离子脂质体(CLs)表面结合,形成多层脂质-核酸复合物而形成的。
热成像技术在动物检测方面也具有很大的潜力。AnimaldetectionusingthermalimagingandaUAV:Rafa?Fr?ckowiak和Z.Goraj的研究测试了多旋翼无人机搭配热成像相机用于检测大型野生动物的方法2。他们在波兰的CzarnaBialostocka森林区进行了研究,选用了视角为33°×26.6°、热传感器分辨率为640×512像素的热成像相机E20TvxYuneec,并以YuneecH520E六旋翼无人机作为搭载工具。研究结果表明,热成像相机在检测和识别大型野生动物方面具有潜力,如欧亚麋鹿和马鹿等。在2022年冬季,还能够确定马鹿的性别。三、X射线发光成像技术X射线发光成像技术结合了X射线成像的高空间分辨率和光学成像的高测量灵敏度,可用于小动物成像。小动物的X射线发光成像:MichaelCLun、WenxiangCong和Md.Arifuzzaman综述了两种类型的X射线发光计算断层扫描(XLCT)成像方法,并介绍了他们正在建立的聚焦X射线发光断层扫描(FXLT)成像系统7。该系统将开发基于机器学习的FXLT重建算法,并合成不同发射波长的纳米级磷光剂。基于病毒的转染,或者更具体地称为转导,涉及使用病毒载体将特定的核酸序列带入宿主细胞。山东神经细胞转染试剂
阳离子聚合物是一种非病毒载体。湖南转染试剂教做
X射线发光成像技术结合了X射线成像的高空间分辨率和光学成像的高测量灵敏度,可用于小动物成像。小动物的X射线发光成像:MichaelCLun、WenxiangCong和Md.Arifuzzaman综述了两种类型的X射线发光计算断层扫描(XLCT)成像方法,并介绍了他们正在建立的聚焦X射线发光断层扫描(FXLT)成像系统7。该系统将开发基于机器学习的FXLT重建算法,并合成不同发射波长的纳米级磷光剂。四、近红外高光谱成像技术近红外高光谱成像技术在动物饲料成分分析中具有应用前景。NIRhyperspectralimagingforanimalfeedingredientapplications:P.Dantes探索了近红外高光谱成像(NIRHSI)在动物饲料中的应用8。该技术能够在像素级别提供样品的化学成分信息,相比传统的近红外光谱具有优势。研究中使用CorningNIRHSI仪器预测了豆粕中的蛋白质和油含量,并可视化了整个豆粕样品中预测的蛋白质分布。预处理方法如标准正态变量和Savitzky-Golay导数能够有效提高校准模型性能。此外,还将NIRHSI仪器与两种商业单点近红外光谱仪进行了比较。湖南转染试剂教做