为什么要使用荧光染料?虽然不同的染色技术(即考马斯染色、银染色、荧光染色)可用于可视化凝胶电泳分离的蛋白质,但使用荧光染料具有其独特的优势。他们提供:高灵敏度:对于大多数分析物,荧光测量的灵敏度比吸光度测量高1000倍,即使在使用小样本时也可以令人满意地达到ppt(万亿分之一)的检测限??硐咝远段АJ涑鲇胙放ǘ瘸烧取5透扇牛河捎谖展獾牟牧鲜恐诙啵止夤舛炔饬客ǔ;嵊龅礁扇盼侍?。在进行荧光测量时不会遇到这个问题,因为只有少数材料具有荧光能力。高通量:荧光测量具有简单而强大的协议,并且可以自动化用于高通量应用。CY5荧光染料是一种被广泛应用于生物分子检测和荧光成像等领域的高效、稳定的荧光标记试剂。贵州苏州荧光染料
Cy3 (Cyanine 3) 是一种发橘黄色荧光的花青素荧光染料。Cy3染料的激发峰和发射峰分别在550 nm和570 nm左右,它的荧光肉眼观察很明亮,并且对pH不敏感,在共聚焦显微镜中可以用532nm(肩峰)或者556nm(顶峰)的激光束激发,在普通荧光显微镜中可以用 TRITC (tetramethylrhodamine) 的滤片观察,所以在绝大部分荧光仪器上都可以使用。Cy3也是Dil等细胞电位追踪剂的母核,所以它是在生物技术中非常有用的荧光染料。在荧光成像时,Cy3的背景荧光一般认为比TAMRA等TRITC系列的染料低。 Cy3可以用来标记蛋白,抗体,多肽等,它常见的使用是标记核酸分子(DNA和RNA)。基于荧光图谱的相似性,Cy3可以被TAMRA,TRITC, BODIPY TMR等染料替代,在需要更明亮,更稳定的替代物时,可以考虑使用AF547或者AF555等。云南广州荧光染料吲哚菁绿(Indocyanine Green,简称ICG)是一种广泛应用于医学和生物领域的荧光染料。
纳米粒子纳米颗粒是指尺寸在1到100纳米之间的颗粒。由于它们的小尺寸,纳米粒子通常用于不同类型的细胞和组织的荧光成像。当今生物成像中常用的一些纳米材料包括碳点、贵金属纳米颗粒、聚合物点、量子点和荧光掺杂二氧化硅等。在成像中,与其他分子荧光团和探针相比,纳米颗粒/纳米材料具有多种优势,使其成为理想的选择。除了提高亮度外,纳米粒子是惰性的并且往往分布均匀,这有助于在成像过程中获得更好的结果。此外,与各种分子荧光团相比,纳米颗粒和纳米材料没有细胞毒性,并且不受非特异性结合问题的影响。由于这些特性,大多数荧光纳米颗粒(染色纳米颗粒)可以内化到细胞/组织中,并容易靶向给定部位。
CY5.5-NHS荧光染料是一种广泛应用于生物标记和成像的荧光染料,CY5.5-NHS荧光染料具有优异的荧光性能。其激发波长约为675nm,发射波长约为695nm,位于红色光谱区域,这使得它在生物样本中具有较强的穿透力,能够深入组织内部进行标记和成像。此外,CY5.5-NHS荧光染料具有较高的荧光量子产率和光稳定性,可以在较长时间的激发下保持稳定的荧光信号,从而确保实验结果的准确性和可靠性。CY5.5-NHS荧光染料作为一种***的荧光染料,在生物科学研究领域具有广泛的应用前景。其优异的荧光性能、良好的生物相容性、***的适用范围以及易于合成和修饰的优点,使得它成为生物医学研究中不可或缺的重要工具。Hoechst 33342是一种可透过细胞膜并对DNA染色的细胞核染色试剂,它在嵌入双链DNA后释放强烈的蓝色荧光。
一种发光杂环化合物,存在于生物发光的生物体中,如萤火虫。在含有三磷酸腺苷的情况下,通过荧光素酶氧化脱羧产生光??捎糜谟馑孛干锓⒐獬上窈拖赴咄可秆∮τ?。D-荧光素(D-Luciferin)是萤火荧光素酶底物,其量子效率为0.88,是Luminol的20倍。反应原理:首先,在镁离子存在下荧光素酶使荧光素与ATP反应,接着它被氧化形成二氧杂环丁烷结构并发出黄绿色的光。Luciferin-luciferase发光用于ATP监控以测定细胞活力以及细菌计数。它还用于报告基因检测??捎胄《?**成像系统配套使用,用于标记LUC基因后的体内***荧光检测。D-荧光素游离酸(D-Luciferin,freeacid)、D-荧光素钾盐(D-Luciferin,potassiumsalt)和D-荧光素钠盐(D-Luciferin,sodiumsalt),钾盐、钠盐的形式是**通用的,因为它们都易溶于水。钾盐也是***动物检测使用的主要形式。它们的激发和发射波长分别为328nm和533nm。Cy3染料的激发峰和发射峰分别在550 nm和570 nm左右。广东高分子荧光染料
荧光素的衍生物包括异硫氰酸荧光素、俄勒冈绿和羧基萘并荧光素等。贵州苏州荧光染料
使用萤火虫荧光素酶(Fluc)作为报告基因和 D-荧光素作为底物的生物发光成像(BLI)是目前应用*****的技术。将总信号强度相对于 D-荧光素注射后的时间进行绘制,以生成时间-强度曲线。除了峰值信号外,还确定注射 D-荧光素后固定时间点(5、10、15 和 20 分钟)的信号作为峰值信号的替代。给定时间-强度曲线中的信号针对曲线中的峰值信号进行归一化,以表示 D-荧光素注射后时间变化的模式[3]。每克体重注射 10 μL D-荧光素(腹膜内或静脉注射)储备液:对于 20 g 小鼠,标准 150 mg/kg 注射通常约为 200 μL。在室温下解冻 D-荧光素(钾盐或钠盐)并溶解在 dPBS(不含钙或镁)中,**终浓度为 15 mg/mL。通过吸取 5-10 mL 无菌水来预湿 0.22 μm 过滤器。贵州苏州荧光染料