siRNA脂质体

RNA干扰(RNAi)途径允许siRNA和miRNAs负向调节蛋白表达。siRNA是21～23对核苷酸组成的双链RNA，可诱导同源靶mRNA沉默。为了发挥作用，双链siRNA分裂成两个单链RNA:乘客链和引导链。乘客链被argonaute-2蛋白降解,而引导链则被纳入RNAi诱导的沉默复合体中，该复合体结合与引导链互补的mRNA并将其切割。siRNA似乎具有***多种疾病的巨大潜力，因为它们可以很容易地下调各种靶mRNA，而不考虑它们的位置(即在细胞核或细胞质中)，并且它们的特异性结合表明它们比传统化学药物诱导的副作用更少。作为一种新型的基于核酸的***策略，siRNA***与传统的化学药物相比具有许多优势。然而，为了促进基于siRNA的***方法的发展，必须克服一些挑战，包括需要识别适当的靶基因和开发优化的递送系统。许多研究人员试图利用阳离子脂质体提高siRNA的细胞递送和基因沉默效率。例如，由DC-6-14、DOPE和胆固醇组成的阳离子脂质体被用于递送萤火虫荧光素酶特异性的siRNA。当阳离子脂质体与siRNA持续剧烈搅拌混合时，转染效率提高，说明将siRNA加载到阳离子脂质体上的方法可以调节转染效率。siRNA脂丛的***应用因靶蛋白而异。 增强成像性能，荧光标记的定量分析，探索药物的药代动力学以及研究药物的靶向性等。辽宁氢化卵磷脂脂质体载药

脂质体制备方法：二次乳化法该方法已被DepoCyte、DepoDur和Expel三种商业产品?于?产MVLs。整个?产过程通常包括以下四个顺序操作:(1)形成“油包?”乳液，(2)形成“油包?”乳液，(3)在汽提?体或真空压?的帮助下进?溶剂萃取，(4)微滤去除游离药物，浓缩和交换外部溶液。在?产过程中，应提供?菌保证，因为由于微粒径的MVLs不能通过0.22μm过滤作为?菌批次?产。Lu等研究了?艺对布?卡因MVLs关键质量属性的影响，发现第?乳的粒径随着脂质浓度的增加?增?，剪切速度对粒径影响较?。对于第?种乳液，在溶剂去除过程中，由于?些MVLs坍塌，药物从内?相泄漏，导致包封效率降低。此外，?温促进了脂质双分?层的迁移和重排，导致脂质融合和?腔的坍塌。辽宁氢化卵磷脂脂质体载药脂质体疫苗可以机器体内的免疫应答。

与化学增敏剂共同递送为了增强***活性，研究人员研究了将***siRNA和化学药物共同装载到阳离子脂质体中的共递送方法。例如，将丝裂原活化的蛋白激酶抑制剂PD0325901包封在由N、N-二油基谷酰胺阳离子脂质、DOPE和胆固醇组成的阳离子脂质体中，通过静电相互作用与Mcl-1siRNA络合。在小鼠模型中，瘤内给药这些阳离子脂质体可***抑制**生长。在另一项研究中，开发了基于三叶赖氨酸油酰酰胺的阳离子脂质体，用于共同递送Mcl-1siRNA和***药物亚酰苯胺羟肟酸。与Mcl-1siRNA脂质体或含亚甲基苯胺羟肟酸脂质体的单药***相比，使用载药聚乙二醇化脂质体与Mcl-1siRNA复合物可提高荷瘤小鼠的体内***效果。***，将多柔比星包裹的阳离子脂质体与编码磷酸化缺陷小鼠survivin蛋白的质粒DNA复合，该蛋白是BIRC5基因编码的一种致*蛋白，是凋亡抑制剂家族的成员，苏氨酸34-丙氨酸突变体，然后用缩短的人碱性成纤维细胞生长因子肽修饰，对表达成纤维细胞生长因子受体的细胞产生选择性。在静脉给药这些复合物后，在患有肺*的C57BL/6小鼠中观察到**生长的***降低。目前临床应用面临的挑战。

脂质体质量控制的重要性与常规药物剂型(如?分?注射溶液)不同，脂质体中装载的***性分?在全?给药后(如静脉注射)转运到肿瘤细胞的过程更为复杂主要经历以下?个步骤:(1)从?管内间隙外渗到组织间质:脂质体通过扩散和/或对流穿越**?管壁不连续的内?连接点(100nm-2μm)进?**间质。同时?部分脂质体被MPS从体循环中***，特别是对于?尺?(>200nm、疏?和带电颗粒表?(带负电荷或正电荷)的颗粒。(2)通过扩散和对流进?间质运输，以接近单个肿瘤细胞。利?主动靶向对脂质体进?表?修饰将克服颗粒在细胞外基质(ECM)中扩散的物理阻?，因为颗粒上的靶向配体与肿瘤细胞表?的受体之间产?了更?的亲和?(3)通过?特异性或特异性结合的?式附着于细胞膜(4)通过内吞作?、膜融合或扩散进?细胞。内吞作?的途径取决于颗粒??即??为200nm，500nm的颗粒为?格蛋?介导的内吞作?和?泡介导的内吞作?，?胞吞作?可达5μm。(5)细胞内转运和药物释放。基于脂质体的这种运输过程由于循环脂质体颗粒?法穿过?脏?管的连续内?连接，与传统的阿霉素给药相?，Doxil明显降低了?脏毒性。与常规药物相?DaunoXome可使多柔?星的**递送量增加约10倍，并在体内提供持续释放。Zeta电位被认为是影响细胞摄取和药物传递的重要因素之一。

阴离子脂体由带负电荷的脂质组成，如磷脂酰甘油、磷脂酰丝氨酸和磷脂酸，由于它们被巨噬细胞摄取，循环时间缩短。带负电的小脂质体比其对应的中性和带正电的脂质体被***得更快。此外，在带负电荷的小脂质体中观察到一种双相***模式。 另一方面， 与中性和带正电的脂质体相比， 血液单核细胞和肺在带负电的大脂质体的摄取中起主要作用。表面修饰的脂质体(携带配体)比天然脂质体更容易被***。 然而， 脂质体通过掺入胆固醇可在一定程度上减少肝脏对脂质体的摄取， 这可能会使磷脂包装转变为更坚硬有序的膜。一些常用于标记脂质体的荧光染料包括：DiO、DiI、Rhodamine PE、NBD、BODIPY、Cy3和Cy5等。云南DLin-MC3-DMA脂质体载药

载药脂质体的稳定性和储存方式。辽宁氢化卵磷脂脂质体载药

2脂质体的主要成分

?油磷脂(GP)、鞘磷脂(SM)和胆固醇(Chol)是市场上脂质体产品中使?的基本成分。GP含有?油，它连接?对疏?脂肪酸链和?个亲?极性头基。脂肪酸和极性头基团的类型。在?理pH下，不同的头部组提供负(PA、PS、PG和?磷脂)或中性(PC和PE)电荷的脂质体。带负电的DSPG?于AmBisome(注射?两性体脂质体)，可与带正电的AmpB胺基相互作?，形成稳定的离?配合物，??于Vyxeos的DSPG通过强?的库仑斥?使脂质体聚集**?。?于DaunoXome(柠檬酸柔红霉素脂质体注射液)、Onivyde(伊?替康脂质体注射液)和Vyxeos的DSPC是?种中性合成脂质，具有明确的脂肪酸组成(两分?硬脂酸)、?纯度和相对?的相转变(Tm为55?C)。EPC作为赋形剂加?Myocet和Visudyne(维替泊芬粉为输液溶液)中。EPC是从蛋?中纯化的天然磷脂(NPL)。与半合成脂和合成脂相?，NPL的?产成本较低，但转变温度较宽，难以获得完全相同的NPL，并且脂质体可能存在批次差异。此外，EPC的不饱和脂肪酸导致了?15～?5?C的低相变温度，表明脂质体双分?层在体温中处于?序和药物“漏出”状态。 辽宁氢化卵磷脂脂质体载药