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来源: 发布时间:2024-05-29

SuperFluor活化酯(与Invitrogen的AlexaFluor活化酯完全相同)SuperFlour系列荧光探针,具有更强的荧光强度,更广的pH应用范围(pH4~10),更好的抗淬灭性。在生物荧光领域已逐渐替代FITC,Cy3,Cy5,Cy5.5,Cy7等荧光染料。1.标记效率低——计算结果显示每摩尔145,000MW的蛋白标记的荧光团少于4mol有以下原因:1)缓冲液中含有痕量伯铵成分,与染料反应降低了标记效率。如果蛋白已经溶于含氨基的缓冲液(如Tris或氨基乙酸),标记前用PBS透析。2)蛋白含量较低(≤1mg/mL)会影响标记效率。3)标记步骤中加入碳酸氢钠的作用是将反应混合物的pH升高至~8,因为在弱碱性环境中标记反应的效率比较高。如果蛋白溶液的缓冲范围在低pH,加入重碳酸盐也无法将pH调节至**适水平。要么加大重碳酸盐的量,要么将缓冲液换成PBS,或用0.1M碳酸氢钠透析等。4)研究显示pH升至9.0~9.4,标记效率和标记速度(只需10min)明显改善。5)不同抗体与荧光团的反应速率不同,染料标记后保留的生物活性程度也不同,因此标准步骤也不是总有比较好的标记结果。为增加标记率,可以对同一样品进行再标记,或减少蛋白的量加大染料的量重新标记。有研究者在室温孵育1小时后再4℃孵育过夜,情况有所改善。异硫氰酸荧光素含有一个异硫氰酸酯反应基团这有助于其对通常存在于生物分子中的动漫和巯基基团具有反应性。长沙荧光染料水溶

在荧光显微术中,不仅蛋白质结构感兴趣,而且对核酸也感兴趣。有时有必要通过检测细胞核来确定细胞的确切位置或数量。最常见的DNA染色剂之一是DAPI(4',6-二氨基-2-苯基吲哚),主要与DNA双螺旋富含A-T的区域结合。与未结合态相比,DAPI在DNA上的荧光强度增加。染料被UV(紫外线)光激发,比较大激发波长为358nm。发射光谱较宽,峰值在461nm。弱荧光也可以检测到RNA结合。在这种情况下,发射转移到500nm。有趣的是,DAPI能够渗透完整的细胞膜。因此,该染料既可用于固定细胞也可用于活细胞。广东水溶荧光染料吲哚菁绿的主要作用之一是在医学影像学中作为造影剂。

花青类荧光染料属于共振染料,其特征在于具有离域电荷的氮原子(两个氮原子)之间的聚甲炔染料。由于与生物分子的低非特异性结合以及明亮的荧光,花青类荧光染料已成为一些当下流行的用于标记核酸的荧光染料。花青类染料分为两大类:非磺化花青类染料-该组中的一些染料包括cy3、cy3.3、cy5、cy5.5、cy7和cy7.5。在大多数情况下,这些染料的特点是水溶性低,但胺的盐酸盐和酰肼除外。它们首先溶解在有机溶剂(共溶剂)中,然后在生物分子标记期间添加到含有生物分子的溶液中。而“Cy”**花青,***个数字**存在于亚油啉基团之间的碳原子数。另一方面,添加0.5后缀以表示苯并稠合花青。这些荧光染料通常用于有机介质。磺化类花青染料-该组由磺基-Cy3、磺基-Cy5和磺基-Cy7组成。顾名思义,这些花青的特征是一个磺基,它有助于染料分子在水相中的溶解。与非磺化花青相比,这些花青更易溶于水,因此不需要溶解在有机溶剂中进行标记。磺化花青通常用于标记疏水性蛋白质、水溶液中的纳米颗粒以及可能被DMSO或DMF变性的敏感蛋白质。两组染料均可用于标记以下生物分子:肽、寡核苷酸和DNA、抗体、可溶性蛋白质。

FITC荧光标记蛋白的应用及特点:活性荧光染料,如FITC、7-氨基-4-甲基香豆素(AMC)、罗丹明B(RhodamineB)或AlexaFluor染料,可用于标记抗体或蛋白质功能基团,生成分子探针,并通过荧光成像进行检测。当用荧光染料化学标记特异性抗体或其他纯化生物分子时,它们成为用于检测靶抗原或相互作用配偶体的荧光探针,用于细胞成像、流式细胞手术、蛋白质痕迹和酶联免疫吸附实验(ELISA)。由于荧光标记物具有无放射物污染、操作简单等优点,在蛋白质功能研究、药物筛选等许多研究领域得到了越来越广泛的应用。

南京星叶生物科技有限公司Super Fluor 系列(效果同Alexa Fluor系列)

且Super Fluor活化酯(与Invitrogen的Alexa Fluor活化酯完全相同) 异硫氰酸荧光素(FITC) 是一种有机荧光染料,目前,这种荧光染料仍用于免疫荧光和流式细胞术中。

光热***是另一个吲哚菁绿的重要应用领域。在光热***中,吲哚菁绿可以被引入**组织,并在近红外激光的照射下吸收光能转化为热能,从而使**组织受到热损伤,达到***的效果。吲哚菁绿的荧光性质使得其在光热***中具有很高的选择性,可以精确地破坏**组织而对正常组织几乎没有影响。这种精细的***方式有助于减少***的副作用,提高***效果。吲哚菁绿在生物识别和药物输送方面也有广泛的应用。在生物识别中,吲哚菁绿可以与特定的生物分子结合,通过检测其荧光信号来实现对这些生物分子的定量分析。这种技术在生物医学研究、药物筛选和疾病诊断中具有重要的意义。另外,吲哚菁绿还可以作为药物输送系统的一部分,将药物包裹在其分子结构中,并通过光***释放药物,实现对疾病靶点的精确***。吲哚菁绿作为一种具有优良绿色溶解度的荧光染料,在医学和生物领域发挥着重要的作用。它的应用领域涉及医学影像学、光热***、生物识别和药物输送等方面,并且具有较高的选择性和精细性。随着科学技术的不断进步,相信吲哚菁绿将在未来更***地应用于临床实践中,为人类的健康和医学科研做出更大的贡献。DiD、DiR、DiO和DiI染料是最常见的细胞膜染料,它们是一族亲脂性的荧光染料,用于细胞的形态学和结构研究。免疫荧光荧光染料DAPI

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染料DiI, DiO, DiD 和 DiR是一类亲脂性荧光染料家族,用于标记细胞膜和疏水性组织。这是一类环境敏感型荧光染料,当它们与膜结合或者与亲脂性生物分子(例如蛋白质,虽然在水中其荧光强度很弱)结合时,其荧光强度***增强。它们具有很高的淬灭系数,偏光依赖性和很短的激发寿命。一旦应用于细胞中,这种染料会在细胞内质膜中逐步扩散,导致在其比较好浓度条件下,将整个细胞染色。它们不同的荧光颜色:DiI(橙色荧光)、DiO(绿色荧光)、DiD(红色荧光)、DiR(深红色荧光),为活细胞多色彩荧光成像分析和流式细胞术提供了一种便捷的工具。DiO和DiI可以分别与标准的FITC和TRITC滤光器一同使用。其中,DiO可以被633 nm He-Ne激光激发,并且具有比DiI更长的激发和发射光波长,为标记细胞和组织的那些本身就具有本底荧光的染料提供了非常***的替代品。DiR在***成像或者示踪中非常有用,因为它们所发射的红外光可以高效地穿过细胞和组织,并且在红外光范围内,其本底荧光水平很低。长沙荧光染料水溶

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