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广西多肽荧光染料

来源: 发布时间:2024-05-27

藻红蛋白-藻红蛋白(PE)是一种红色蛋白色素复合物,属于藻胆蛋白家族。它可以在红藻和隐植物中找到,它作为叶绿素色素的附属物。在生物科学中,荧光团可以与蛋白质结合,例如用于抗原检测的抗体等,因为它能够发出明亮的荧光。由于荧光团往往会很快发生光漂白,因此很少在荧光显微镜中使用。它经常用于流式细胞术?!鹪謇兜鞍?APC)-与藻红蛋白一样,别藻蓝蛋白也属于藻胆蛋白家族,是从红藻中分离出来的。在594和633nm的激光线激发下,荧光团的比较大吸光度在650nm处,而荧光发射峰在66nm处。与荧光素偶联物相比,荧光团的灵敏度已显示高5至10倍,并具有许多其他有益特性,包括大斯托克斯位移、高水溶性、长波长发射和耐猝灭。虽然别藻蓝蛋白通常不用于需要光稳定性的应用,但它***用于流式细胞术、ELISA、微阵列等过程以及各种依赖高灵敏度的应用。D-荧光素钾盐是荧光素酶的水溶性底物,存在于多种发光生物体中。广西多肽荧光染料

琥珀酰亚胺酯(Succinimidylesters)/NHS酯活性荧光染料用于标记抗体,蛋白质,肽,胺修饰的寡核苷酸和其他生物分子上的游离氨基(-NH2)2、马来酰亚胺(Maleimides)活性荧光染料用于标记抗体,蛋白质和肽上的巯基3、叠氮化物(Azides)活性荧光染料通过点击化学法(Click)标记乙烯基4、炔烃(Alkynes)活性荧光染料通过点击化学方法标记叠氮化物5、羧酸(Carboxylicacids)活性荧光染料经碳二亚胺预活化后用于标记胺或用于醇的Steglich酯化6、氨基(Amines)活性荧光染料具有游离氨基的荧光染料,用于与各种亲电子化合物(如活化的酯和环氧化物)偶联。抗体荧光染料细胞核目前常用标记蛋白/抗体的荧光素主要有BODIPY类、香豆素类、罗丹明类、近红外类、NBD胺类以及菁染料等。

一:染色液制备1、配制储液:储液用无水DMSO或无水EtOH配制,浓度1~5mM。注:未使用的储液建议分装后储存在-20℃,避免反复冻融。2、工作液制备:用合适的缓冲液(如:无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储液,配制浓度为1~5μM的工作液。注:工作液**终浓度建议根据不同细胞系和实验体系来优化。建议从推荐浓度的10倍范围内开始比较好浓度的摸索。二:悬浮细胞染色1、加入适当体积的染色工作液重悬细胞,使其密度为1×106/mL。2、37℃孵育细胞2~20min,不同的细胞比较好培养时间不同??梢?0min作为起始孵育时间,之后优化体系以得到均一的标记效果。3、孵育结束,1000~1500rpm离心5min。倾倒上清液,再次缓慢加入37℃预热的生长培养液重悬细胞。4、重复步骤3两次以上。

荧光染料在细胞实验中具有广泛的应用1、细胞膜标记:可以使用荧光染料标记细胞膜,以观察和研究细胞膜的动态和结构变化。2、染色体和DNA标记:用荧光染料标记染色体或DNA,可以观察和分析DNA复制、转录、修复等过程3、蛋白质标记:通过荧光染料标记蛋白质,可以研究蛋白质的相互作用、定位和运动等特性。4、细胞器标记:使用特定波长的荧光染料可以标记和可视化细胞中的线粒体、溶酶体等细胞器。5、神经科学应用:荧光染料在神经科学中也有广泛应用,如标记神经元和突触,观察神经信号的传递等。6、基因表达分析:通过荧光染料标记基因表达产物,可以定量分析基因的表达水平和细胞中的分布情况。南京星叶生物科技有限公司Super Fluor系列(效果同Alexa Fluor 系列)。

3.粘壁细胞的染色(1)使粘壁的细胞在无菌实验室培养。(2)从培养基中移走盖玻片,吸走过量培养液,将盖玻片放在潮湿的环境中。(3)在盖玻片的一角加入100μL的染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。(4)在37℃培养细胞2~20分钟,不同的细胞比较好培养时间不同。(5)吸干染料工作液,用培养液洗盖玻片2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养5~10分钟,然后吸干培养基。

4.显微镜检测(1)DiD,DiO,DiI,DiR和DiS滤光器的选择参见表1。(2)多色染料的同时检测,滤光器按照以下设定:a)DiI和DiO=OmegaXF52,Chroma51004;b)DiI和DiD=OmegaXF92,Chroma51007;c)DiI,DiO和DiD=OmegaXF93,Chroma61005

5.流式细胞仪的检测DiD,DiO,DiI,DiR和DiS染色的细胞可以分别用经典的FL1,FL2,FL3和FL4流式细胞仪检测。 脂溶性荧光染料cy3、cy5、cy7等。湖北荧光染料Cy3

吲哚菁绿的主要作用之一是在医学影像学中作为造影剂。广西多肽荧光染料

花青类荧光染料属于共振染料,其特征在于具有离域电荷的氮原子(两个氮原子)之间的聚甲炔染料。由于与生物分子的低非特异性结合以及明亮的荧光,花青类荧光染料已成为一些当下流行的用于标记核酸的荧光染料?;ㄇ嗬嗳玖戏治酱罄啵悍腔腔ㄇ嗬嗳玖?该组中的一些染料包括cy3、cy3.3、cy5、cy5.5、cy7和cy7.5。在大多数情况下,这些染料的特点是水溶性低,但胺的盐酸盐和酰肼除外。它们首先溶解在有机溶剂(共溶剂)中,然后在生物分子标记期间添加到含有生物分子的溶液中。而“Cy”**花青,***个数字**存在于亚油啉基团之间的碳原子数。另一方面,添加0.5后缀以表示苯并稠合花青。这些荧光染料通常用于有机介质?;腔嗷ㄇ嗳玖?该组由磺基-Cy3、磺基-Cy5和磺基-Cy7组成。顾名思义,这些花青的特征是一个磺基,它有助于染料分子在水相中的溶解。与非磺化花青相比,这些花青更易溶于水,因此不需要溶解在有机溶剂中进行标记?;腔ㄇ嗤ǔS糜诒昙鞘杷缘鞍字?、水溶液中的纳米颗粒以及可能被DMSO或DMF变性的敏感蛋白质。两组染料均可用于标记以下生物分子:肽、寡核苷酸和DNA、抗体、可溶性蛋白质。广西多肽荧光染料

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