其他荧光物质：酶作用后产生荧光的物质某些化合物本身无荧光效应，一旦经酶作用便形成具有强荧光的物质。例如4-甲基伞酮-β-D半乳糖苷受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基伞酮，后者可发出荧光，激发光波长为360nm，发射光波长为450nm。其他如碱性酸酶的底物4-甲基伞酮磷酸盐和辣根过氧化物酶的底物对羟基乙酸等。镧系螯合物某些3价稀土镧系元素如铕（Eu3）、铽（Tb3）、铈（Ce3）等的螯合物经激发后也可发射特征性的荧光，其中以Eu3应用较广。Eu3螯合物的激发光波长范围宽，发射光波长范围窄，荧光衰变时间长，较适合用于分辨荧光免疫测定。荧光抗体法和荧光抗原法都属于免疫荧光技术的范畴。CD86免疫荧光检查

以帕金森病为例，其主要病理特征是中脑黑质致密部的多巴胺能神经元变性死亡，以及α-突触**白异常聚集形成路易小体。利用多色免疫荧光技术，我们可以用一种颜色标记α-突触**白，用另一种颜色标记多巴胺能神经元的特异性标志物，如酪氨酸羟化酶。这样就能在脑组织切片中清晰地观察到α-突触**白在多巴胺能神经元中的聚集情况，以及随着疾病进展，神经元数量的减少和路易小体分布的变化。在亨廷顿病的研究中，多色免疫荧光同样大有用途。亨廷顿病与亨廷顿蛋白（Htt）的异常扩展有关，我们可以用不同颜色分别标记异常扩展的Htt蛋白、神经元内的其他重要蛋白以及神经胶质细胞的标志物。通过这种方式，可以深入探究异常Htt蛋白对神经元功能的影响，以及神经胶质细胞在疾病发展过程中的作用，从而为寻找***神经退行性疾病的新靶点提供依据。Glut2免疫组化免疫荧光技术可以用于研究细胞凋亡、细胞增殖和细胞分化等生物学过程。

在病毒性肝炎的研究中，多重免疫组化可以同时标记肝炎病毒的抗原，如乙肝病毒表面抗原（HBsAg）、乙肝病毒**抗原（HBcAg），以及肝脏内的免疫细胞标志物，如 CD8 + T 细胞、巨噬细胞标志物 CD68 和细胞因子如干扰素 - γ（IFN - γ）。HBsAg 和 HBcAg 在肝细胞中的分布反映了乙肝病毒的***状态，而免疫细胞和细胞因子则与机体对病毒的免疫反应密切相关。通过观察这些标志物的关系，可以深入了解乙肝病毒在肝脏内的复制、传播过程，以及机体免疫系统是如何对病毒***作出反应的。例如，如果发现 HBcAg 主要位于肝细胞的细胞核内，且周围有大量 CD8 + T 细胞浸润，这可能表示机体正在对病毒***的肝细胞进行免疫***。

注意:从加荧光二抗起,后面所有操作步骤都尽量在较暗处进行.DAPI复染核:爬片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。切片稍甩干后在圈内滴加DAPI染液，避光室温孵育10min。封片：爬片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。玻片稍甩干后用抗荧光淬灭封片剂封片。镜检拍照：切片于荧光显微镜下观察并采集图像。（DAPI紫外激发波长330-380nm，发射波长420nm，发蓝光；FITC激发波长465-495nm，发射波长515-555nm，发绿光；CY3激发波长510-560，发射波长590nm，发红光）。两种抗体同时孵育：由于FIT容易萃灭，因此在孵育抗体时后孵育FITC二抗(孵育二抗一定要避光。免疫荧光技术具有高灵敏度和高特异性，可以检测非常低浓度的目标分子。

细胞免疫荧光在蛋白定位研究以及细胞内信号转导方面发挥着极为重要的作用。细胞免疫荧光技术乃是将免疫技术与荧光标记技术进行有机融合。其具体原理为，在抗原-抗体发生反应之后，运用荧光进行标记，当标记工作完成，通过显微镜去观测细胞内某种抗原成分的具体数量情况，由此能够开展一个详尽的定位研究，并且还能够为细胞内信号传导给予一个清晰明确的指引方向。细胞免疫荧光具备敏感性极强、特异性超高、速度极快等明显特点，是当下相当常用的一种组织学技术，同时也是颇为精确的。免疫荧光染色的重点原理在于借助抗原抗体之间所具有的特异性结合来对目的蛋白予以显示，这主要涵盖了蛋白与一抗进行结合，其次是带有荧光基团的二抗能够识别并与一抗相结合，如此一来，在荧光显微镜下便能够清晰地观察到荧光的存在。例如，当我们想要研究某种特定蛋白在细胞内的位置时，就可以利用细胞免疫荧光技术，通过抗原-抗体反应和荧光标记，准确地确定该蛋白在细胞中的具体分布情况；又如在探究细胞内信号传导途径时，细胞免疫荧光也能发挥关键作用，帮助我们清晰地了解信号分子的传递和变化。这些都充分体现了细胞免疫荧光技术在生物学研究中的重要价值和广泛应用。免疫荧光技术通过荧光信号的观察来确定抗原或抗体的分布和定位。S100 beta免疫

免疫荧光技术可以用于研究免疫系统的功能和异常。CD86免疫荧光检查

免疫组化对于内分泌系统疾病的诊断有着重要的助力作用。内分泌系统通过分泌***来调节身体的各种生理功能，内分泌***如甲状腺、肾上腺、胰腺等发生病变会导致多种疾病。在甲状腺疾病的诊断中，免疫组化是一种重要的辅助手段。例如，在桥本甲状腺炎的诊断中，免疫组化可以检测甲状腺组织中的自身抗体，如甲状腺过氧化物酶抗体（TPOAb）和甲状腺球蛋白抗体（TgAb）。这些抗体在桥本甲状腺炎患者的甲状腺组织中常常呈现高表达，通过免疫组化可以直观地观察到抗体与甲状腺细胞的结合情况，辅助诊断桥本甲状腺炎，并判断疾病的严重程度。在肾上腺疾病方面，如肾上腺皮质*的诊断，免疫组化可以检测肾上腺皮质*细胞中的标志物，如inhibin-A、Melan-A等。这些标志物有助于区分肾上腺皮质*与其他肾上腺**，为制定合理的治疗方案提供依据。CD86免疫荧光检查