在定量PCR时,我们常常纠结一个问题,究竟是相对定量还是***定量呢?如今,你无需纠结了,因为数字PCR(digital PCR)来了。尽管这两种技术有些类似,都是估计起始样品中的核酸量,但它们有一个重要的区别。定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量,而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的***定量。因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域:拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究(如等位基因不平衡表达)、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。MicroDrop?数字PCR可广泛应用于科研、医疗、出入境检验检疫等领域。广州流式数字PCR如何选型
目前数字PCR技术在临床领域已经有着非常***且***地应用,例如在病原微生物检测中的应用:HBV检测、HIV检测、甲型流感病毒检测等;在产前诊断中的应用:13/18/21号染色体三倍体检测、遗传性耳聋检测、地中海贫血检测及优生五项的病毒检测等;在**靶向***相关基因检测中的应用:肺*EGFR基因突变、ALK基因融合检测、结直肠*KRAS、BRAF基因突变检测、乳腺*HER2基因扩增检测、神经胶质瘤IDH基因突变检测等。以**靶向***相关基因检测为例,在**形成的超早期,会出现**细胞的坏死和凋亡,这些凋亡或坏死的**细胞会释放其DNA进入外周血,因此通过分析循环血液中是否含有**特异的游离DNA就可以达到**早期筛查的目的。然而此时DNA含量极低,对检测的灵敏度和精确性要求极高,目前只有数字PCR技术可以检测出来。另外进行个体化***时,需要对基因组样本进行分析,此时利用数字PCR技术也能**提高结果的可信性,进而建立合理***方案。宁波流式数字PCR如何选型液体活检:早筛、用药、监测、复发。
数字PCR(Digital PCR-dPCR)技术是一种新的核酸检测和定量方法,与传统定量PCR(qPCR)技术不同,数字PCR采用***定量的方式,不依赖于标准曲线和参照样本,直接检测目标序列的拷贝数。由于这种检测方式具有比传统qPCR更加出色的灵敏度和特异性、精确性,dPCR迅速得到***的应用,这项技术在极微量核酸样本检测、复杂背景下稀有突变检测和表达量微小差异鉴定方面变现出的优势已被普遍认可,而其在基因表达研究、microRNA研究、基因组拷贝数鉴定、**标志物稀有突变检测、致病微生物鉴定、转基因成分鉴定、NGS测序文库精确定量和结果验证等诸多方面具有的广阔应用前景已经受到越来越多的关注。
与常规PCR方法相比,数字PCR有如下优势:
1、能够完全定量:常规PCR定量需要制定已知拷贝数的标准DNA曲线,但是由于待检样本与标准曲线不在统一体系,条件上会存在差异,另外加上PCR扩增效率的差异从而影响定量结果的准确性。而数字PCR不受标准曲线和扩增动力学影响,可进行完全定量。
2、样本需求量低:适用于珍贵样本或核酸降解严重的样本
3、灵敏度高:数字PCR是将传统PCR反应体系分割成数万个**PCR反应,这些反应可以精确地检测很小的目的片段差异、单拷贝甚至低浓度的混杂样本。且能避免非同源异质双链的形成。
4、高耐受性:由于目的序列被分配到多个**反应体系中,明显降低了背景信号和yì zhì物对反应的干扰,扩增基质效应大大减小。
准确的定量结果和优异的重复性。
仪器特点:
MicroDrop-100A样本制备仪
1、单张芯片一次可处理8个样本;
2、20微升体系生成100,000微滴;
3、单次微滴生成*需2分钟;
4、一键式自动化操作。仪器参数样本体积20μl容量1~8个样本微滴总数100,000反应时间2分钟/芯片仪器尺寸(宽x深x高)300*400*145mm
MD Detector 微滴检测仪
1、全封闭体系,自动化流程操作;
2、FAM、VIC双通道荧光检测;
3、检测灵敏度高达万分之一;
4、通量达96个样品。仪器参数线性范围6个数量级通量1~96个样本检测通道FAM 、HEX (VIC)仪器尺寸(宽x深x高) 700*500*325mm 能检测低至0.01%的突变基因。上海数字PCR代理商
CRISPR-Cas9基因编辑结果验证。广州流式数字PCR如何选型
MicroDrop-100系统产品特点
一、适应性广,灵活性高
1、理论上可覆盖qPCR(荧光定量PCR)的所有应用
2、样本多样性,样本通量可达96个样本,支持灵活设定
3、开放式平台,支持用户自行开发试剂、产品。
二、灵敏度高,准确性高
1、***定量——无需依赖标准曲线
2、采用微滴式技术高达100,000个的微滴
3、线性范围达到6个数量级,灵敏度高达万分之一
三、可分析复杂混合物
1、准确度不完全依赖于扩增效率
2、双通道荧光检测,支持EvaGreen染料及探针法
3、支持多重数字PCR
四、操作简单,使用方便
1、全封闭防污染设计,一键式自动化操作。
2、可选全中文分析软件 广州流式数字PCR如何选型
浚和(上海)仪器有限公司是一家供应国内外先进仪器和设备的专业供应商和服务商,致力于为客户提供专业的定制化解决方案。多年来,持续为医药、化工、高校、科研单位、检测院等多个行业提供先进的产品和专业的服务。
浚和在不断引进国内外先进仪器设备的同时,结合行业和市场需求,加强和客户之间的沟通,并与国际上多家**仪器设备制造商保持着长期稳定的合作关系,不定期地与合作商进行技术交流,努力加强自身技术力量。公司配备了数名有着多年行业经验的技术人员,依靠雄厚的技术实力、科学合理的配置方案、专业的安装调试和周到的售后服务,得到了广大用户的支持与信赖。
公司主要经营产品包括:等离子清洗机、真空泵、喷雾干燥器、数字PCR、高压灭菌锅、培养箱、切片机、水分测定仪、激光粒度仪、光谱仪、温湿度记录仪等,目前主要合作品牌有:日本雅马拓YAMATO、日本KASHIYAMA、日本HORIBA、广州永诺 、日本KEM等。同时,公司还提供专业的技术服务,如设备的维护、验证等。
浚和仪器将始终以行业特点为立足点,以客户需求为导向,不断地提高自身专业技术能力,不停地完善客户服务质量,在发展中保持创新的精神,力求与客户共同进步,为行业的发展作出不懈的努力。