具体实施方式以下结合附图和具体实施例，对本实用新型进行详细说明。如图1至图5所示，一种新型原代细胞培养箱，包括若干个用于存放细胞培养皿的内箱盒2、及用于存放所述内箱盒的外箱体1，所述外箱体1内设有若干列中空的矩形槽11，各所述矩形槽11的两侧分别设有若干层对称的滑槽111，若干层所述滑槽111由上至下等间距依次设置，每一层所述滑槽111的正面及背面各存设有一内箱盒2，所述内箱盒2包括底盒21、紫外灯23及上盖22，所述紫外灯23设于底盒21内，所述底盒21与上盖22的一侧通过合页铰接，所述底盒21与上盖22的另一侧通过锁扣24扣合连接，所述底盒21上设有推拉把手25，所述底盒21的两侧分别设有与滑槽111适配的滑轮211，所述底盒21两侧的头部分别设有与滑槽111适配的滑块212。如图1至图3所示，内箱盒2内可存放细胞的培养皿，外箱体1的正面及背面均可存放内箱盒2，正背两面可同时存放内箱盒2的设计，提高了细胞培养箱的空间利用率，使得细胞培养箱在同一占地面积的情况下可存储更多的细胞培养皿。存放时，只需将内箱盒2的滑轮211对准滑槽111，手持在底盒21上的推拉把手25，通过滑轮211滑动的方式，将内箱盒2推送至滑槽111内。骨骼肌的一般形态特征肌细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方。湖南大鼠原代细胞实验室

    又称螯合剂，对一些组织，尤其是上皮组织分散效果好。与细胞上的钙、镁离子结合形成螯合物后，形成的机械力可使细胞分散。Q：细胞量太少，长不起来怎么办？A：有几种办法，如对没消化完的组织块反复消化，尽量多收集一些细胞；并且尽量传代到小皿里，如6孔板都可以。若是细胞仍太少，应耐心等待，尽量不要传代，只换液。Q：细胞难以贴壁？A：尽快使接种的细胞贴壁，是决定培养能否成功的关键。为了尽快促进细胞贴壁，可以提前1h将千分之的明胶铺于培养板。Q：原代细胞培养方法与细胞系不同之处在哪里？A：培养基一般选用RPM1640，DMEM等，建议能加入促生长的物质：如胰岛素、氢化可的松、EGF等因子。二、原代正常组织分离皮肤是人体长久以来，表皮细胞一种被认为是难以培养的细胞，限制了皮肤生物学基础研究的发展。作为表皮的主要细胞，角质形成细胞已经成为我们了解皮肤生物学至关重要的许多原创性研究的焦点。下面就介绍下小鼠角质形成细胞的分离和培养。基本过程如下图：原代小鼠角质细胞的分离步骤实验结果：分离出的小鼠角质细胞常见问题解答：Q：皮肤组织作为正常组织，组织分离主要区别在哪里？A：首先，皮肤组织需要用中性分离酶dispaseII将表皮分离出来；其次。云南外包原代细胞服务本公司分离的SD大鼠间充质干细胞取自新鲜的组织材料，并且按照标准操作流程进行原代细胞的分离和培养。

    易操作原代细胞和细胞系的比较3.原代细胞的应用由于原代细胞生物学特性未发生很大改变，接近和反映体内生长特性，因此是：(1)研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的工具；(2)更好实现医诊治模式，实现个体化用药的目的。第二部分：原代细胞分离和培养技术原代培养的原理将动物机体的各种组织从机体中取出，经各种酶(常用胰蛋白酶/胶原酶)、螯合剂(常用EDTA)或机械方法处理，分散成单细胞，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖，这一过程称原代培养。主要包括取材——分离——培养等3部分；在原代细胞应用较多的包括：组织（如实体瘤、皮肤等）、悬浮细胞的取材等。下面依次介绍：一、组织的取材病人自体的原代细胞由于更接近临床患者标本，可以更好实现医疗的诊治模式，实现个体化用药的目的。所以对病人自体细胞体外分离与培养十分必要。基本过程如下图所示：原代细胞的分离步骤备注：上图细胞为肉瘤患者的原代细胞具体步骤如下：1.在无菌条件下的冰上对新鲜离体的组织，剔除包膜及坏死组织，无菌PBS清洗3-5次；切成约1mm3组织块；2.加入2mmol的EDTA，摇匀后放置冰上约30-60min；3.离心，并加入胶原酶消化（含蛋白酶）；4.消化期间，置于37°培养箱。

    换液时间隔一般较短。原代细胞培养问题解答1、原代细胞与细胞系有什么区别？根据传统定义，自组织收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney,.(1987)..(NewYork,.)].这类细胞直接从组织分离，生命周期有限，经数次传代后会逐渐停止生长。原代细胞在有限的生命周期内需掌握好细胞的生长空间，以保持细胞群中基因型和表型的一致性。细胞系是不断生长、分化的细胞群，因其经过遗传改造，致使其具有无限增长的潜能。体外生长的细胞系用于医疗或科研。但实际上，经过长时间、连续的传代培养后，细胞系随着代数的增加，细胞的基因型和表型都有可能发生改变。需要指出的是，在不同的科研小组中这些术语的定义会有所不同。许多研究员不用细胞系这个词表示细胞群，除非细胞经过了遗传改造。2、倍增和代数有什么区别？倍增是培养物中细胞总数的翻倍，通常是指细胞指数或对数生长期。代数是指细胞群从培养瓶中移出，传代培养过程的次数，传代培养的目的，是使细胞处于低密度以刺激其进一步生长。3、接收到的冻存细胞该如何处理？收到包装箱后，立即将冻存细胞从干冰移入液氮中冻存。此过程尽量快，以避免升温。不要将细胞储存在-80℃，这样会对细胞造成不可挽回的伤害。若有原代细胞的培养条件及相关的实验方案或参考文献也可提供给我方（保密信息除外）。

    原代细胞的优势与不足细胞培养很好的补充了体内实验的不足，它让细胞功能和进程的研究更具可操作性。细胞系的一个缺点是它们往往与原始的组织有不一样的遗传和表型。相比之下，原代细胞保持了细胞在体内的许多重要标志和功能。原代细胞的生长：虽然原代细胞有诸多优点，但是获得高纯度的原代细胞是一个非常艰巨的过程。比起细胞系，原代细胞可谓是极其敏感，需要额外添加经典培养基所没有的营养。原代细胞要在专为每种细胞定制的特殊培养液中存活和生长。例如内皮细胞与上皮细胞或神经元营养需求就大为不同。因此需要特殊培养基。传统细胞培养基靠血清提供生长因子、脂类和其他未知成分供细胞生长。但高血清会导致原代细胞分化或助长成纤维细胞等污染。此外，使用血清还会顾虑费用增高和批次差异等问题。使用低血清或无血清的特殊成分培养基不仅可以避开这些问题，还能更好的促进原代细胞的生长。另外，将原代细胞接种在生理亲和性的基板上可以显著提高细胞贴壁率、生长状态和纯度。基因表达分析：基因表达直接影响细胞功能，基因表达分析对研究原代细胞起重要作用。传统的报告基因检测和cDNA芯片方法往往需要转染或大量高质量RNA。但是原代细胞是出了名的难转染。干细胞的诱导分化是干细胞功能学研究的主要途径。西藏组织原代细胞培养

2~4h后轻轻翻转培养皿,补足培液使肌小粒浸浴于培养液中，3d换液一次,待细胞长满即可传代。湖南大鼠原代细胞实验室

    导语原代细胞培养也叫初代培养，是建立细胞系的步，其步骤包括取材→分离→培养和维持，给大家带来原代细胞培养的一些技巧，希望大家能有所收获！原代细胞培养原代细胞培养的应用1、为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段；2、为传代培养创造条件；3、服务于临床实践，用于药物筛选等。原代细胞培养之取材取材作为原代细胞培养过程中的部至关重要，以下几种取材技术，你都用过哪些方法呢？兔髓核原代细胞培养之分离注意事项1、组织块培养法1）组织块接种后的天，在观察和移动的过程中，注意不要引起液体的振荡。要避免经常翻动和振动，否则组织块不易附着于瓶壁上或附着后也会脱落飘起。2）加入的培养液不宜过多，避免浸泡的组织块受轻微的波动而脱落下来。3）当细胞向外迁徙出来后要注意记录并去除漂浮的组织块和残留的细胞，它们产生的有毒物质会影响原代细胞的生长。4）为促进组织块尽快粘贴在培养瓶皿上，可以在种植前先将胶原薄层涂在培养瓶底壁上。2、贴壁型原代细胞1)原代培养的分离细胞在初次接触体外环境时，它们之间会互相影响，在这些细胞之间能产生一些促生长的活性物质，使细胞彼此互相促进存活和生长。如果接种的细胞密度过低。湖南大鼠原代细胞实验室