冷冻步骤用预热的PBS溶液洗涤细胞,吸取溶液,含有胰蛋白酶和EDTA的溶液覆盖细胞(薄薄的液层足够,胰蛋白酶和EDTA的浓度需要根据细胞系确定)。37℃孵育细胞3-5分钟。细胞从底部脱离之后,终止孵育,加入含有血清的培养基,用移液器轻轻地悬浮细胞。离心细胞悬液(500xg,5分钟),用含有血清的培养基重新悬浮。细胞计数。离心细胞悬液(500xg,5分钟),去除上清液,用适量体积的含有血清的培养基重新悬浮细胞。以1:1体积比混合细胞和冻存液(60%培养基,20%胎牛血清,**MSO),然后转移到Cryo.sTM冻存管中。冻存的细胞密度为1-5×106个/毫升。含有细胞的Cryo.sTM冻存管建议以?1K/min的速率降温,可以将冻存管置于?70℃含有异丙醇的容器中。如果Cryo.sTM冻存管存储其他样品,可以直接放置在?20℃,?70℃或者液氮的气相。为了确保样品冷冻均匀,4mL和5mL的Cryo.sTM冻存管需要先置于在?20℃冰箱过夜,然后再转移到?70℃或者液氮的气相。然后转移Cryo.sTM冻存管到液氮罐。为了避免污染(如支原体)和安全考虑,请将Cryo.sTM冻存管置于液氮的气相,切勿置于液相。无硅胶密封圈,采用特殊螺纹结构设计,防样品渗漏。昆山冷冻管定制
冷冻管选用质量聚丙烯制成,高温高压消毒不变形。冷冻管分为0.5ml冷冻管、1.8ml冷冻管、5ml冷冻管、10ml冷冻管,冷冻管也有塑料冷冻管、细胞冷冻管、细菌冷冻管等等。 应用于样品的低温储存,用于保存全血、血清和细胞等样品。
离心管可以做冷冻管吗?一般情况下,离心管可以代替冷冻管的用途,但在温冷冻时,离心管就不能做为冷冻管了.不能光看材质,虽然离心管也是聚丙烯(PP)的,但是与冻存管的使用要求不一样,生产工艺是不同的,所以不能相互代替。 浙江微量冷冻管批发应用于样品的低温储存,用于冻存全血、血清和细胞等样品。
冻存管安全使用建议使用冻存管储存样本时,严格要求应把冻存管放入液氮的气相层或冰箱中保存!如果冻存管储存于液氮液体中,液氮有一定几率会渗入冻存管内部,复苏时液氮气化导致管内外压力不平衡,这样极易造成冻存管的炸裂,并具有生物危害性。操作冻存管复苏,全程使用安全防护设备,建议穿实验服、戴棉质手套且在安全的实验台上进行操作。条件允许情况下,请佩戴护目镜或防护面罩。由于夏季室内温度会高于冬季,请格外小心。冻存细胞储存过程中,冻存管的冷冻温度须均匀。不均匀的受冻将会导致冰塞的产生,冰塞会抑制两侧的液体温度传递进而产生危险的高压力并导致冻存管受损。冻存的样本量不要超过冻存管要求的比较大工作体积。
进口冻存管的概况和特点:冷冻管采用医用聚丙烯(PP)为原料,是于储存生物样本的一次性实验室耗材。在液氮的气体状态环境下,可耐低温至零下187℃。独特的外旋设计避免了交叉污染的可能性。管帽内装有硅胶垫以避免液体泄漏,即使在比较低保存温度下也能保证密封性,终确保了管内样本的安全。管帽配有的多种可嵌入的色标易于识别。管体上的白色记号区和清晰的刻度,方便使用者做进口冻存管标记与校准容量。比较大离心力可达17000g。所有冷冻管都采用伽马消毒灭菌,无DNA酶、无RNA酶、无热源。外旋冷冻管为冻存样品而设计,外旋盖的螺纹盖可以降低处理样品时的污染几率。内旋冷冻管为液氮相中冻存样品而设计,管口硅胶垫增强了冷冻管的密封性。管帽纹路易于旋转盖子。 可提供开盖和封盖扭矩,满足自动化需求。
冻存管特性:聚丙烯制成,可以经受-196℃;大标记区域;黑色刻度;经过无DNA/RNA酶认证;管中有硅胶垫圈确保密封;可以用色标进行标示;经过伽马射线灭菌;无热源认证。冻存管使用不当,会有爆、生物安全威胁及人身伤害等风险冻存管使用不当,会有爆、生物安全威胁及人身伤害等风险冻存管使用不当,会有爆、生物安全威胁及人身伤害等风险细胞冻存流程细胞冻存流程用预热过的PBS对细胞进行冲洗,弃去对细胞进行冲洗,弃去PBS后,加入含后,加入含后,加入含EDTAEDTAEDTAEDTA的胰酶消化液对细胞进行消(薄地覆盖表面即可,浓度须化液对细胞进行消(薄地覆盖表面即可,浓度须化液对细胞进行消(薄地覆盖表面即可,浓度须根据不同的细胞系进行调整)。根据不同的细胞系进行调整)。冷冻管选用质量聚丙烯制成的实验管,高温高压消毒下不变形。研究所冷冻管哪家好
意水面不可超过冷冻管盖沿,否则容易发生污染情形。昆山冷冻管定制
如何操作才能避免冻存管?上海柏根生物2022-01-2111:42很多时候,我们需要把细胞冷冻起来,以便于长期保存,以备不时之需。而复苏,就是使冷冻的细胞苏醒过来,恢复活力。我以为的细胞复苏:冻存管取出,37℃水浴,离心,换液,培养。后来真正上手养了一段时间细胞才发现短短的操作过程中尽是“Bug”啊!冻存管原因液氮渗入冻存管内,当把冻存管从液氮罐取出时,液态氮挥发,导致体积迅速膨胀而不能及时排出引起。具体原因就是:冻存管质量差操作不规范保护配套不到位昆山冷冻管定制
上海嘉迪塑料制品有限公司是一家塑料制品,五金交电,电子产品,计算机,建材,金属材料,文具,洁具,纸张,汽摩配件,针纺织品,化工原料及产品(除危险品),日用化学品(除专控),日用百货,批发,零售;商务咨询。 【依法须经批准的项目,经相关部门批准后方可开展经营活动】的公司,致力于发展为创新务实、诚实可信的企业。公司自创立以来,投身于离心管,冻存管,取样杯,试剂瓶,是医药健康的主力军。上海嘉迪塑料不断开拓创新,追求出色,以技术为先导,以产品为平台,以应用为重点,以服务为保证,不断为客户创造更高价值,提供更优服务。上海嘉迪塑料始终关注医药健康行业。满足市场需求,提高产品价值,是我们前行的力量。