Dulbecco’s改良培养基–DMEM（Dulbecco’sModifiedEagleMedium）是在MEM培养基的基础上研制的，与MEM培养基相比，氨基酸的含量增加了2倍，维生素的含量增加了4倍，同时还增加了非必须氨基酸、微量铁离子以及**酸钠。DMEM培养基**初设计葡萄糖含量为1000mg/L（低糖型），后来又发展出葡萄糖含量为4500mg/L（高糖型），现已广泛应用于各种细胞的培养。针对***的细胞培养应用，我们提供多种组分的DMEM改良培养基。高糖型培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、各种原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产，例如利用CHO细胞表达EPO和生产乙肝疫苗。低糖培养基更适合代谢作用较慢、依赖性贴壁细胞的培养。不含葡萄糖的培养基可以根据研究需要，随意调节葡萄糖的浓度，方便快捷。L-谷氨酰胺（Glutamine）是细胞培养中所必需的一种营养元素，但其在溶液中不稳定，会自发降解，不含L-谷氨酰胺的培养基，可以根据研究需要任意调整L-谷氨酰胺的用量，在使用时添加新鲜的L-谷氨酰胺或其替代物更利于细胞的生长。 RPMI-1640是改进型的McCoy ‘s 5A培养基，使用碳酸氢盐缓冲系统。医用细胞培养基

DMEM 培养基成分复杂且精妙，除了富含氨基酸、维生素、葡萄糖、等主要成分外，还包含多种无机盐。这些无机盐在维持细胞内外渗透压平衡方面发挥着关键作用，确保细胞不会因渗透压异常而出现失水皱缩或吸水膨胀等情况，维持细胞正常形态。同时，无机盐中的离子，如钙离子、镁离子等，参与细胞内的信号传导过程，影响细胞的生长、分化和代谢等生理活动，为细胞的生命活动提供稳定的离子环境，与其他营养成分协同作用，共同促进细胞的健康生长。贵州RPMI-1640细胞培养基源头直供Ham’sF-10营养混合物（Ham’sF-10Nutrient Mixture）是由Ham针对CHO细胞无血清培养设计出的一种培养基。

    培养液的渗透压是一个非常重要的因素,细胞通常可耐受260mOsm/kg～320mOsm/kg。标准培养液的渗透压在此范围内波动。特别注意：向培养液中加入其它物质有可能会明显改变培养液的渗透压，特别是溶于强酸或强碱中的物质。向培养液中添加HEPES时需按以下方法调节钠离子浓度。缓冲系统大多数细胞所需pH在-。但是，细胞培养适pH值随培养的细胞种类不同而不同。成纤维细胞喜欢较高pH(-),而传代转化细胞系则需要偏酸pH(-)。由于多数培养液靠碳酸氢钠（NaHCO3）与CO2体系进行缓冲，因此，气相中的CO2浓度应与培养液中碳酸氢钠浓度相平衡。如果气相或培养箱空气中CO2浓度设定在5％，培养液中NaHCO3的加入量为；如果CO2浓度维持在10％，培养液中NaHCO3的加入量为。细胞培养瓶盖不应拧得太紧，以保证气体交换。HEPES是一种非离子缓冲液，在pH-范围内具有较好的缓冲能力，但是非常昂贵，在高浓度时对一些细胞可能有毒。HEPES缓冲液可与低水平的碳酸钠（）共用，以抵消因额外加入HEPES引起的渗透压增加。在这种培养条件下，细胞培养瓶的盖子应拧紧，以防止培养液中所需的少量碳酸盐散入空气中。大多数培养液中含有酚红作为pH指示剂，酸性培养液呈橙黄色，碱性培养液呈深红色。

    随意调节葡萄糖的浓度，方便快捷。高糖型培养基普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、各种原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产，例如利用CHO细胞表达EPO和生产乙肝疫苗。低糖培养基更适合代谢作用较慢、依赖性贴壁细胞的培养。HEPES是一种优良的生物缓冲剂，对细胞无毒性作用，添加HEPES的培养基能够较长时间保持恒定的PH范围，可以有效的防止培养液PH波动较大对细胞生长产生不利的影响。可用于无CO2培养箱。酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂，用以持续监测培养液的酸碱度，在低PH值时酚红使培养液呈黄色，而较高的PH值时使培养液呈紫色，PH值～，适合细胞培养。但酚红也有一些缺点，使用不含酚红的培养基。酚红会干扰流式细胞分析时候的检测。此外，一些无血清培养基的配方中若存在酚红会干扰钠-钾平衡。青霉素-链霉素混合液通常也被称为“双抗”，青霉素能够干扰细菌细胞壁的合成，对革兰阳性菌特别有效；而链霉素能够与细菌核糖体30S亚单位结合，抑制细菌蛋白质的合成，对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有效，但对革兰氏阴性菌特别有效。青霉素和链霉素联合使用可以预防绝大部分的细菌污染。高糖 DMEM 适合生长快、粘附低的细胞，如肿瘤细胞的培养 。

    动物细胞培养（animalcellculture）就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞（使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶）然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。细胞培养基的种类有哪些？按照细胞培养基的发展历史，细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。DMEM（Dulbecco’smodifiedMinimalEssentialMedium）是由Dulbecco在MEM培养基的基础上改良获得的，各成分份量加倍，分低糖（1000mg/L）、高糖（4500mg/L）两种类型。细胞生长快。附着稍差的肿瘤细胞、克隆培养用高糖效果较好，常用于杂交瘤的骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞培养。2.神经元基础培养基可为神经元生长提供基础营养物质。IPL-41昆虫培养基（IPL-41InsectMedium）旨在用于大规模扩增草地贪夜蛾（Spodopterafrugiperda）细胞系，也常用于通过杆状病毒表达系统（BEVS）进行蛋白表达。IPL-41培养基是对原始IPL配方的改良，由美国农业部昆虫病理实验室Weiss等人开发，用于大规模扩增草地贪夜蛾衍生细胞系。Weiss向基础培养基中加入了胎牛血清和TPB培养基（TryptosePhosphateBroth），成功地实现了IPL-21AE。MEM α 培养基不含核苷和脱氧核苷的MEM α培养基常常用作DG44和其他DHFR-缺陷型细胞的筛选培养基。北京医用细胞培养基批发厂

DMEM培养基**初设计葡萄糖含量为1000mg/L（低糖型），后来又发展出葡萄糖含量为4500mg/L（高糖型）。医用细胞培养基

    1.细胞培养基的种类按照细胞培养基的发展历史，细胞培养基大致可分为平衡盐溶液、天然细胞培养基、合成细胞培养基、无血清细胞培养基、限定化学成分细胞培养基等几大种类。（balancedsaltsolution，BSS）BSS主要是由无机盐、葡萄糖组成，它的作用是维持细胞渗透压平衡，保持pH稳定及提供简单的营养。其主要用于细胞的漂洗、配制其他试剂等。几种常用的BSS配方如下（表1-1）。D-Hank's与Hank's的一个主要区别是前者不含有Ca2+和Mg2+，因此D-Hank's常用于配制胰酶溶液。因为Ca2+、Mg2+是细胞膜的重要组成成份，参与细胞粘附等功能，使用不含Ca2+、Mg2+的BSS可避免细胞结团。此外，Hanks液和Earle液是常用的BSS基础溶液，前者缓冲能力较弱，适合于密闭培养；后者缓冲能力较强，适合于5%CO2的培养条件。天然培养基指来自动物体液或利用组织分离提取的一类培养基，如血浆、血清、鸡胚浸出液等。其优点是营养成分丰富，培养效果良好，但缺点是成分复杂，来源受限且制作过程复杂、批间差异大。目前使用的天然培养基是血清，另外各种组织提取液、促进细胞贴壁的胶原类物质在培养某些特殊细胞也是必不可少。水解乳蛋白是乳白蛋白经蛋白酶和肽酶水解的产物。医用细胞培养基

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