定量测定是医学发展的重要保证。WHO1980年出版了男科实验室手册***版及以后版本[1]?对有关男科的实验进行了详细的阐述。对计算机辅助精子分析进行质量管理包括:计算机本身的软硬件、CASA分析结果、工作人员的具体操作几方面。CASA参数包括精子数量和各种活动力变量?其质量包括所测得数据的可靠性、精确度、如何避免差错和数据的正确性及确认?以及分析中的标准[2]。
CASA质量管理关系到男科实验室中**分析的质量?具有以下特点:⑴在实验室内部质量和医生处置质量方面?优于其它测定精子运动的方法;⑵CASA结果及结果质量的评估较困难;⑶WHO标准是医生处置质量保证的基础;⑷今后应加强操作人员的培训。 ?精子分析可以分析参数有,曲线速率(VCL)?:精子头沿其实际曲线运动的时均速率。上海快速运动精子分析DSL
精子分析仪使用方法
仪器的使用方法因型号、厂家差异不尽相同,操作人员上岗前必须经过严格培训,了解工作原理、操作规程、校正方法等,使用前必须仔细阅读说明书。一般仪器都会经历如下操作步骤 [1]:开机接通电源,打开计算机辅助**分析系统。1.输入患者信息及**理学检查结果。2.加样取液化的**1滴,滴入精子计数板的计数池中,置显微镜操作平台上,点击“活动显示”菜单,调节好显微镜焦距,显示器上即可显示待测标本的精子运动图像。3.分析点击“计算分析”菜单,系统进入自动分析状态,图像显示区出现精子分割图像并进行分析。4.打印报告分析结束后,可根据需要打印出分析结果。 鱼精子分析精确温度控制该设备还支持多种分析模式,包括精子浓度、活力、形态和DNA损伤等参数的测量,满足用户的多样化需求。
扩展性检查:可以在某些情况下由实验室选择或根据临床医生的特殊要求而使用的项目。手册增加了精子DNA损伤、遗传学和炎症细胞等相关检查项目。提出了基因突变是导致不育和精液常规检查异常的原因。新增了精液相关细胞因子、趋化因子等检测的方法、试剂、检测步骤等内容。在精液参数异常的男性中普遍存在精子DNA损伤,并且已有报道指出其与精液参数正常男性的不育有关。由于与精液质量相关,精子DNA损伤检测是男性不育检查中的重要补充内容,已成为男科学基础和临床中论述**多、**有前景的精子损伤分子标志物之一。本版手册增加了大量篇幅对其原理和检测方法进行了描述。新增了基因和基因组测序内容。临床上,越来越多的人意识到染色体异常[数量异常、结构异常(包括微缺失和微重复)]和基因突变是导致各种男性不育症的基础病因,而这正是在精液分析中观察到的许多异常的原因。尽管基因和基因组测序常规在医学遗传学实验室进行,但一些男科实验室也在做同样的检测。为明确生殖道炎症对于男性不育的影响,泌尿男科医生可能提出对精液中的趋化因子和细胞因子进行评估。本手册纳入了精液中白细胞介素检测方法。
CASA系统也可用于精子形态学评估。CASA系统可用来定量分析精子头部形态学、中段甚至主段的形态,可以把精子头部和中段分类为正常或者不正常,还可以给出头部和中段尺度、头部椭圆率和匀称性的均数、标准差和中位数,以及对染色的精子顶体区进行测量[3]。
与人工操作相比,自动化系统更具客观性,精确度和重复性的潜力[4]。精确度和重复性不低于7%[5],这优于有经验的技术人员的手工评估。两个研究已经提示在CASA结果与生育力之间存在***联系。Coetzee等发现自动分析的正常精子形态的结果是预示体外受精率和妊娠率的有意义指标[6]。Garrett等发现**中能与透明带结合的、具有某些头部形态特征的精子所占的百分比(Z%),和直线速度(VSL)的精子的百分比,与大样本的低生育力夫妇的自然妊娠率是有***且**的关系。Z%和VSL与生育力间的关系显示是连续的,而且没有显示临界值;高于临界值,妊娠率也不会进一步增加[7]。 精子分析仪参数,精子头侧摆幅度(ALH)?:精子头关于其平均路径的侧向位移幅度。
Hamilton Thorne精子分析仪IVOS Ⅰ与IVOS Ⅱ一致性比对分析
根据质量控制的要求,对新精子分析系统进行性能验证后,应与旧系统进行一致性评价,从而保证检测结果的准确性。方法:选用原有Hamilton Thorne精子分析仪IVOSⅠ为参比仪器,新购仪器IVOSⅡ为实验仪器,对精子分析系统的主要参数(精子浓度、前向运动精子百分率、总活力)进行分析比对。结果:两台仪器的方法内和方法间离群值检验、偏倚图和散点图的线性关系和离群值检测所有参数均能符合比对要求,检测结果具有相关性;对实验仪器的检测结果适合范围的检验,当其精子浓度r=0.988,前向运动精子百分率r=0.975,总活力r=0.981,r均≥0.975,表明取值范围合适;对预期偏倚(Bc)的接受性评价表明当精子浓度在12×10~6/ml,允许总误差(TEa)为6.67%;当前向运动精子百分率<31%,TEa为2.34%,两项检测的Bc上限<1/2允许误差(Ea),实验仪器经比对分析显示符合质控要求。结论:通过比对分析,得出两台精子分析系统的主要参数(精子浓度、前向运动精子百分率、总活力)结果具有可比性,检测结果一致,可同时用于临床标本的检测。 精子分析仪参数,平均路径速率(VAP)?:精子头沿其平均路径移动时的时均速率。北京全自动化精子分析ALH
WHO第6版明确提出:使用CASA系统须遵循适当的程序步骤,才能获得可靠和可重复的结果。上海快速运动精子分析DSL
精液一般检查
(1)精液量:正常人一次排精2~5ml。(2)颜色和透明度:正常刚射出的精液呈乳白色或灰白色,液化后呈半透明乳白色,久未排精者可呈淡黄色。鲜红色或暗红色的血精见于生殖系统炎症、结核、和**,黄色脓样精液,见于精囊炎或前列腺炎。(3)粘稠度和液化:正常新鲜的精液排出后数秒呈粘稠胶冻状,在精液中纤溶酶的作用下30分钟后开始液化。如果粘稠度降低呈米汤样,可能是精子数量减少,见于生殖系统炎症,精液不凝固见于精囊阻塞或损伤;如果精液1小时后不液化,可能是由于炎症破坏纤溶酶所致,如前列腺炎,精子不液化可以抑制精子活动力而影响受孕。(4)酸碱度:pH值。正常精液呈弱碱性pH7.2~8.0,以利于中和酸性的阴道分泌物,pH值小于7或大于8都能影响精子的活动和代谢,不利于受孕。 上海快速运动精子分析DSL