参考原理:血液中单个蛋白质分子的检测有助于识别许多新的诊断性蛋白质标记物。我们报告了一种同时检测数百至数千个单独蛋白质分子的方法,该方法能够检测到非常低浓度的蛋白质。蛋白质被捕获在显微珠上,并用酶标记,每个显微珠上有一个或零个酶标记的蛋白质。通过将这些显微珠分离成50飞米的阵列反应室,单个蛋白质可以通过荧光想象检测到。通过单化这些阵列中的分子,~10-20种酶可以在100μL(~10?19M)中检测到。单个基于酶标记的分子酶联免疫吸附试验(数字ELISA)能够检测血清中临床相关的蛋白质,其浓度(<10?15M)远低于传统ELISA3-5。数字ELISA在所有接受防冶性前列腺切除术的患者血清中检测到前列腺特异性抗原,比较低至14fmol/mL(0.4fmol)。
数字化高敏ELISA芯片,可以进行8孔、4孔的灵活检测。单分子蛋白数字ELISA极速
创新性的解决方案:芯弃疾JX-8B数字ELISA
我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。
将200,000个功能化DNA捕获探针与100μL孵育含有目标DNA的溶液(5‘-TTGACGGCGAAGACCTGGATGTATTGCTCCTCTGAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘孵育2小时后,移除DNA靶标溶液,用0.2×SSC缓冲液洗涤珠子三次含有0.1%Tween-20的微球重新悬浮并与10nM混合生物素标记的信号探针(5‘-TACATCCAGGTCTTCGCCGTCAA/生物素/-3’)对目标DNA具有特异性,孵育1小时。然后将珠子在去除信号探针后用含0.1%吐温-20的0.2×SSC缓冲液洗涤三次。随后向珠子沉淀中加入10pMS阝G溶液,混匀并混合1小时。然后将珠子分离并在含0.1%吐温-20的5×PBS缓冲液中洗涤六次。重悬于10μLofPBS中并加载到飞升微升孔阵列上。 单分子蛋白数字ELISA极速芯弃疾JX-8B数字ELISA,极速检测,检测用时只需要 15-30min!
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测我们的方法利用了亚飞克尔反应室阵列(图1C)我们称之为单分子阵列(SiMoA)——可以分离和检测单个酶分子20-24。这种方法借鉴了Walt等人20-23的工作阵列用于研究单个酶的动力学和抑制作用。我们的目标是利用捕获和检测单个酶的能力来检测用酶标记的单个蛋白质分子。在这个单分子免疫测定的第一步(图1A),在微球(直径μm)上形成一个三明治抗体复合物,结合的复合物用酶标记,如同常规的基于微球的ELISA。当测定含有极低浓度蛋白质的样品,蛋白质的比值分子(以及由此产生的酶标记复合物)与微球的比例很小(通常小于1:1),因此含有标记免疫复合物的微球百分比遵循泊松分布,导致单个微球上存在单一免疫复合物。例如,如果在(3000个分子)的蛋白质中捕获并标记了50μM的蛋白质,并且在200,000个微球上进行标记,则珠子,然后,。无法检测到这些低数量的酶使用标准检测技术(例如,平板阅读器)的标签,因为荧光染料由每种酶生成的产物扩散到一个大卵试验体积(通常为),并进入其中需要数十万种酶标签才能产生高于该水平的荧光信号背景。
芯弃疾JX-8B数字化高灵敏ELISA芯片检测产品为什么能做到?
先进新型的单分子检测方法的普及版;每个生物/医学实验室都用得起的单分子免疫检测;使用现有平台就能做的单分子免疫检测且具有以下特点:多重、超敏微量、极速灵活、开放;
我们的芯弃疾.单分子ELISA产品:同样的单分子技术方案,但创新性芯片方案,主要过程均芯片上完成,只有需搭配简单小型实验室设备,或实验室常见已有设备;实现单分子检测方案的小型化、灵活使用、低成本。更符合国内实验室的各种科研使用场景 每个生物/医学实验室都用得起的单分子免疫检测;
POCT芯片的即时诊断革新:芯弃疾POCT芯片采用卡片式设计(尺寸8×5cm),集成8个检测通道,搭配全自动加样仪(加样精度±0.1μL)与便携式荧光扫描仪(分辨率5μm),实现“样本进-结果出”的15分钟极速检测。其**性能媲美化学发光,如超敏肌钙蛋白T(hs-cTnT)检测限达10pg/mL(线性范围0-1000pg/mL),可在急诊科快速鉴别心肌梗死(阈值>14pg/mL)。在脓毒症管理中,PCT与IL-6联合检测灵敏度达95%,较单一指标提升20%。芯片操作全程自动化,医护人员*需加载样本即可完成检测,无需复杂培训。在基层医疗场景中,该技术已应用于核酸快检(灵敏度98%)、流感分型(A/B型同步检测)及糖尿病酮症酸中毒(β-羟丁酸检测)等场景,检测时间从2小时缩短至15分钟,误诊率降低至5%以下。自动版芯片操作简便稳定,2-4μl 微量样本可测多项指标,满足高通量检测需求。创新性数字ELISA检测通量
芯弃疾JX-8B数字ELISA,微量检测,使用微量样本就能测试;单分子蛋白数字ELISA极速
全自动加样与图像分析系统:智能化检测的关键环节,全自动加样仪与图像分析软件构成数字ELISA芯片的智能化**,实现从样本处理到结果输出的全流程自动化。加样仪的8通道设计确保精细定量加样,避免人工操作误差,加样精度达±1%;图像分析软件通过荧光信号识别与四参数Logistic曲线拟合,自动计算浓度值,相关系数r2≥0.999,结果可靠性高。在自动版芯片检测中,系统可实时监控磁珠捕获效率,自动剔除异常数据点,确保CV值<5%。该智能化体系不仅提升检测效率,更降低了对操作人员的技术依赖,适用于基层医疗单位与高通量检测场景,推动免疫检测从人工操作向自动化、标准化转型。单分子蛋白数字ELISA极速