芯弃疾JX-8B数字ELISA产品是什么?怎么做到单分子技术的低成本实现?参考原理:
分子水平的疾病检测正在推动早期诊断和治病的新兴变革。该领域面临的一个挑战是,用于早期诊断的蛋白质生物标志物可能存在于非常低的丰度中。传统免疫分析技术的检测下限为飞摩尔范围(10?13M)。数字免疫分析技术将检测灵敏度提高了三个数量级,达到了飞摩尔范围(10?16M)。这一能力有可能在诊断和治病领域开辟新的进展,但这些技术已被限制为不适合高效常规使用的手动程序。我们描述了一种新的实验室仪器,该仪器能够完全自动化单分子阵列(Simoa)技术进行数字免疫分析。该仪器具有单分子灵敏度和多重检测,具有快速周转时间和每小时处理66个样本的能力。针对心血管、肿标、传染病、神经学和炎症研究中的16种感兴趣的蛋白质,开发了单分子和多重数字免疫分析方法。与传统方法相比,Simoa免疫分析方法的平均灵敏度提高了lELISAwas>1200倍,变异系数为<10%。数字免疫分析在推进人类诊断方面具有潜力,这在两个临床领域得到了体现:创伤性脑损伤和传染病的早期检测 具有以下特点: 多重、超敏、微量、极速 灵活、开放!单分子检测数字ELISA优势
数字ELISA芯片的标准化生产与质量控制,依托自研的单分子PDMS芯片产线,数字ELISA芯片实现了从材料制备到成品质检的全流程标准化。硅模制备精度控制在±1μm,确保磁珠捕获结构的一致性;PDMS预聚体真空脱气处理消除气泡干扰,键合强度>3MPa保障反应体系密封。成品质检环节通过荧光显微镜与自动计数系统,对磁珠捕获率(>95%)、荧光背景值(<500RLU)进行100%全检,良品率稳定在98%以上。标准化生产流程不仅保障了芯片性能的批次间一致性,更通过SPC统计过程控制持续优化工艺,为临床大规模应用提供了可靠的质量保证,推动数字ELISA技术从实验室走向产业化。单分子检测数字ELISA优势芯弃疾JX-8B数字ELISA,每个生物实验室都能用的单分子检测;
抗体筛选芯片的正交验证能力,抗体筛选芯片支持同一反应体系下不同样本的交叉反应测试,为抗体的正交验证提供了高效平台。在筛选IL-6抗体对时,可同时测试8种捕获抗体与8种标记抗体的组合,通过阴性质控品与阳性质控品的比值分析,快速排除非特异性配对,筛选出亲和力常数(KD)<10??M的高特异性抗体。该能力在复杂样本(如含有异嗜性抗体的血清)检测中尤为重要,可提前识别潜在干扰因素,提升诊断试剂盒的临床适用性。此外,芯片的低密度阵列设计(如3×7排列)便于后续单克隆抗体的克隆化筛选,形成从初步筛选到精细优化的完整技术链条,加速抗体药物与诊断试剂的研发周期。
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测
数字ELISA测量蛋白质浓度远低于传统ELISA的能力源于两种效应:1)SiMoA对酶标记的高度敏感性;以及2)通过数字化蛋白质检测可以实现的低背景信号。任何免疫测定的灵敏度由其灵敏度决定。检测技术到标签,抗体亲和力,试验背景,以及背景测量值的变异(%CV)27.SiMoA对酶非常敏感标签(图2)为在数字ELISA中检测亚飞摩尔浓度的标记蛋白提供了基础。也就是说,对于给定亲和力的抗体,其灵敏度为免疫测定将由测定背景决定,SiMoA的高标记灵敏度有助于降低这种背景。对照实验表明,数字ELISA的背景来自于检测抗体和酶的非特异性结合(NSB)与捕获珠表面结合(补充表2)。AsSiMoA相比传统检测方法具有更高的标记灵敏度,明显减少了检测抗体(~1nM)和酶标记物(1–50pM)的需要,以检测结合事件,与传统方法相比(标记试剂浓度~10nM)。降低的标记物浓度减少了NSB到捕获表面,从而导致背景信号明显降低。 芯弃疾JX-8B单分子普惠化ELISA检测产品,微量检测,使用10uL样本就能测试;
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品
数字化高敏ELISA芯片,低成本、便捷、快速进行微量样本的检测:1)微量样本即可检测;微量样本、微量试剂检测:流道高度只有几十微米,是原来微孔板高度的几十分之一,可有效节省样本量、试剂量;常规检测比较低只需要10ul样本即可进行完整检测。2)单个样本可以同时进行多指标的检测多重指标检测:单个样本,同时进行2-4个指标检测,可定制更多指标;芯片单孔同时检测2个指标芯片单孔同时检测4个指标3)灵活多通道检测:可以手动完成,主要在芯片上进行,对仪器不依赖(只需要移液枪和现成的荧光显微镜,即可实现检测),更小单元可做4-8个样本检测;初始的尝试成本极低(活动期8孔芯片只需要200元即可测试实验);相比普通ELISA试剂盒,更少96孔板价格2-4千元,每个检测孔20-40元;4)数字化的检测方式和检测结果;检测反应基底为阵列化、单分散排列的磁珠,可使用荧光显微镜进行可视化的免疫检测,原来的ELISA信号,转化成0或1,每个磁珠是否参与反应,反应效率如何。 芯弃疾JX-8B单分子ELISA检测产品,低成本、便捷、快速进行微量样本的检测;高灵敏的数字ELISA检测速度快
多指标高通量芯片替代传统技术,快速初筛蛋白标记物,为疾病诊断提供多维依据。单分子检测数字ELISA优势
芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测SiMoA通过将单个酶产生的荧光团限制在极小范围内,从而能够检测到非常低浓度的酶标记物体积(~50fL),导致荧光产物分子的局部高浓度。为了在免疫测定中实现这种定位,在第二步中,将珠子加载到一个阵列为离散的微升大小的孔(图1C)。本研究中使用的2毫米宽阵列有~50,000个孔,孔径为μm,孔深为μm。加载后的阵列在含有荧光酶底物液滴的情况下,用橡胶密封圈密封。Rissin等人,第3页将每个微球隔离在飞升反应室中。具有单一酶的微球标记的免疫复合物在50飞升的反应室中产生局部高浓度的荧光产物(图1D)。通过使用标准显微镜光学系统获取阵列的时间变化荧光图像,可以区分与单一酶分子相关的微球(“开启”孔)和不与酶相关的微球(“关闭”孔);补充图1显示了“开启”和“关闭”孔的荧光直方图。成像阵列可以成千上万的单个免疫复合物同时检测。通过测定供试品中的蛋白质浓度来确定计算含有珠子和荧光产物的孔数相对于含有珠子的孔数(图1D)。使用SiMoA,浓度是因此,我们称SiMoA应用于检测单个免疫复合物为数字ELISA。 单分子检测数字ELISA优势