芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测我们的方法利用了亚飞克尔反应室阵列（图1C）我们称之为单分子阵列（SiMoA）——可以分离和检测单个酶分子20-24。这种方法借鉴了Walt等人20-23的工作阵列用于研究单个酶的动力学和抑制作用。我们的目标是利用捕获和检测单个酶的能力来检测用酶标记的单个蛋白质分子。在这个单分子免疫测定的第一步（图1A)，在微球（直径μm）上形成一个三明治抗体复合物，结合的复合物用酶标记，如同常规的基于微球的ELISA。当测定含有极低浓度蛋白质的样品，蛋白质的比值分子（以及由此产生的酶标记复合物）与微球的比例很小（通常小于1：1)，因此含有标记免疫复合物的微球百分比遵循泊松分布，导致单个微球上存在单一免疫复合物。例如，如果在(3000个分子）的蛋白质中捕获并标记了50μM的蛋白质，并且在200，000个微球上进行标记，则珠子，然后，。无法检测到这些低数量的酶使用标准检测技术（例如，平板阅读器）的标签，因为荧光染料由每种酶生成的产物扩散到一个大卵试验体积（通常为)，并进入其中需要数十万种酶标签才能产生高于该水平的荧光信号背景。 单分子POCT产品，帮您数字化高灵敏检测，且微量样本多重指标检测；芯弃疾单分子数字ELISA快速检测

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只有少量分泌蛋白可测量的可能性突显了蛋白质测量领域面临的挑战：医学上相关的生物标志物可能存在于非常低的丰度中。免疫测定仍然是是蛋白质生物标志物敏感和特异性测量的基础。然而，传统的免疫分析技术在检测不可测量的生物标志物时灵敏度不足，这些生物标志物肯定位于当前可检测范围之下。主流的传统免疫分析方法——包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、化学发光和电化学发光——的灵敏度下限约为10^-13M（~<0.1pM)。许多降低灵敏度的方法已被描述，包括拉曼增强信号检测、电感耦合等离子体质谱，但这些方法的数据表明其成功有限。非常规方法如亚飞摩尔级检测具有明显的权衡，例如程序较长或无法提供定量答案。
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检测方法为阵列成像。阵列成像涉及对阵列中的每个孔进行检测以确定是否存在微球并判断微球是否具有酶活性。为此，开发了一种图像分析软件，该软件首先创建一个阵列的“掩模”，以定义孔定位和边界进行检测。然后将孔掩模应用于阵列的荧光图像，以确定孔内微球和酶的存在。对于阵列的荧光图像，当进行多重检测时，会生成微球群体或微球亚群的荧光强度直方图。直方图中的峰值自动识别并用于确定微球群体。

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为了证明检测极低浓度的可能诊断价值使用数字ELISA检测血液中的蛋白质，对接受治理性前列腺切除术（RP）的患者血清样本中的PSA进行了测量。PSA是前列腺病的血清生物标志物病症既用作筛查工具，也用于监测住院患者的复发接受治理性前列腺切除术28。治理性前列腺切除术后，绝大多数PSA被消除，水平低于标准商用检测方法的检测限（3pM或0.1ng/mL)。定期监测这些患者的PSA恢复情况可以检测前列腺病的复发，但术后几年内生化复发可能不会被发现。 抗体筛选芯片单通道预设 18-21 个抗体检测区，288-336 测试 / 小时，5μl 吸样适配珍稀样本。

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