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阵列单分子数字ELISA超敏检测

来源: 发布时间:2025-06-06

芯弃疾JX-8B数字ELISA:芯弃疾JX-8B数字ELISA  具有超敏的优势:

超敏:芯弃疾.数字ELISA,与Simoa同样的检测方案,将检测结果二维化,使用成像方式,可精确量检测区多少个微球载体上发生免疫反应,具有阳性荧光信号,理论可达fg级;使用常规ELISA试剂,测试IL-6等演示指标,也可轻松达到亚pg级(0.2-0.5pg/mL);使用显微图像处理方法,得到数万个磁珠中,阳性的个数和亮度,建立标准曲线,得到待测指标的浓度。极低浓度时,检测信息为数字化信号,有效提高检测灵敏度到0.2 pg/ml级; 芯弃疾JX-8B单分子ELISA检测产品,微量样本可同时测2-4个指标;!阵列单分子数字ELISA超敏检测

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我公司推出的数字化高灵敏ELISA芯片检测产品应用场景:适合生物实验室、医学实验室、科研市场、产品预研、产品开发、ELISA检测、动物病情检测等各种应用场景应用范围:各种高灵敏多重免疫检测,可替代各种ELISA试剂盒,及其他免疫检测产品。

用DNA捕获探针(5‘-NH2/C12-GTTGTCAAGATGCTA)功能化的微球CCGTTCAGAG-3‘)是按照制造商的说明制备的。这些珠子与生物素化互补DNA的1μM(5’-生物素-CTCT)孵育。在含有0.5MNaCl和0.01%Tween-20的TE缓冲液中过夜(16h)孵育GAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘。孵育后,用PBS洗涤珠子三次含0.1%Tween-20的缓冲液。将珠子样品分装至微孔板中100μL中每孔给予400,000个微球。从微孔板孔中吸取缓冲液,将微球重悬后与不同浓度的ofSβG孵育。 IVD数字ELISA使用效果POCT 芯片推动急诊检测向多指标联检升级,15 分钟内出具心肌损伤等多项结果。

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芯弃疾JX-8B数字ELISA产品

每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测

数字ELISA测量蛋白质浓度远低于传统ELISA的能力源于两种效应:1)SiMoA对酶标记的高度敏感性;以及2)通过数字化蛋白质检测可以实现的低背景信号。任何免疫测定的灵敏度由其灵敏度决定。检测技术到标签,抗体亲和力,试验背景,以及背景测量值的变异(%CV)27.SiMoA对酶非常敏感标签(图2)为在数字ELISA中检测亚飞摩尔浓度的标记蛋白提供了基础。也就是说,对于给定亲和力的抗体,其灵敏度为免疫测定将由测定背景决定,SiMoA的高标记灵敏度有助于降低这种背景。对照实验表明,数字ELISA的背景来自于检测抗体和酶的非特异性结合(NSB)与捕获珠表面结合(补充表2)。AsSiMoA相比传统检测方法具有更高的标记灵敏度,明显减少了检测抗体(~1nM)和酶标记物(1–50pM)的需要,以检测结合事件,与传统方法相比(标记试剂浓度~10nM)。降低的标记物浓度减少了NSB到捕获表面,从而导致背景信号明显降低。

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将200,000个功能化DNA捕获探针与100μL孵育含有目标DNA的溶液(5‘-TTGACGGCGAAGACCTGGATGTATTGCTCCTCTGAACGGTAGCATCTTGACAAC-3‘孵育2小时后,移除DNA靶标溶液,用0.2×SSC缓冲液洗涤珠子三次含有0.1%Tween-20的微球重新悬浮并与10nM混合生物素标记的信号探针(5‘-TACATCCAGGTCTTCGCCGTCAA/生物素/-3’)对目标DNA具有特异性,孵育1小时。然后将珠子在去除信号探针后用含0.1%吐温-20的0.2×SSC缓冲液洗涤三次。随后向珠子沉淀中加入10pMS阝G溶液,混匀并混合1小时。然后将珠子分离并在含0.1%吐温-20的5×PBS缓冲液中洗涤六次。重悬于10μLofPBS中并加载到飞升微升孔阵列上。 芯弃疾JX-8B数字ELISA,低成本单分子检测;

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单分子酶检测到的比较低酶分子数假设蛋白质检测分析的更终灵敏度为背景信号可能由非特异性相互作用产生。为了评估内在敏感性,我们通过将400,000个带有生物素的珠子与不同浓度的酶缀合物链霉亲和素-阝-半乳糖苷酶(S阝G)混合,创建了具有明确酶与珠子比例的珠子群体。为了方便起见,生物素化珠子是通过将生物素化DNA与功能化的珠子杂交提供的。互补DNA。[我们注意到,该实验不应被视为敏感的DNA检测;该检测的敏感性受到非特异性相互作用的限制,如补充图2所示,这些相互作用发生在酶缀合物和表面结合的DNA之间。 数字 ELISA 芯片生物相容性优异,表面处理减少蛋白吸附,保障复杂样本检测稳定性。微型数字ELISA易用性

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芯弃疾JX-8B数字ELISA高敏检测产品具有微量的优势:

微量:芯片上反应,流道区只有几十微米高度,极大降低试剂、样本用量;微量试剂检测:更少只需10ul样本、试剂只为常规的1/10;

芯弃疾JX-8B数字ELISA高敏检测产品具有灵活的优势:

灵活:可手动、可只使用8孔芯片,总成本、更小实验成本均较低,搭配使用常用实验室小型设备即可使用

测试结果:宽波长扫描仪结果-明场+荧光场同时看到磁珠与荧光,可观测每个磁珠上免疫反应的程度

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