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创新性数字ELISA使用效果

来源: 发布时间:2025-05-07

芯弃疾JX-8B数字ELISA产品

每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测

动力学上,对于200,000个微球分散在100μL中,珠子之间的平均距离约为80μm。大小为TNF-α和PSA(分别为17.3和30kDa)的蛋白质将在不到1min的时间内扩散80μm。表明,在2小时的孵育过程中,蛋白质分子的捕获不会受到限制动力学上。其次,必须有足够的珠子被加载到阵列上以限制泊松噪声。200,000个珠子加载到50,000孔阵列中,通常会导致20,000–30,000个微球被困在1mL孔中。对于典型的背景信号为1%活性微球(见下文),这种装载导致背景信号为200-300个活性微球检测到,对应于泊松噪声的可接受变异系数(CV)为6-7%。第三,过高的微球浓度可能导致:a)非特异性结合增加,降低信噪比;以及b)分析物与微球的比例过低,导致活性微球的比例过低,从而导致泊松噪声引起的高CV。这些因素的平衡NatBiotechnol.作者手稿;可在PMC2010年12月1日获得。Rissin等人第5页因素意味着每100μLoftest样品含有20万到100万颗珠子是比较好的数字ELISA。同时,为了获得可接受的背景信号(1%)和泊松噪声)。 数字 ELISA 芯片采用高透光基底与表面涂层,减少非特异性吸附,提升磁珠捕获效率。创新性数字ELISA使用效果

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    芯弃疾JX-8B数字ELISA产品每个生物实验室都用得起的单分子免疫检测我们的方法利用了亚飞克尔反应室阵列(图1C)我们称之为单分子阵列(SiMoA)——可以分离和检测单个酶分子20-24。这种方法借鉴了Walt等人20-23的工作阵列用于研究单个酶的动力学和抑制作用。我们的目标是利用捕获和检测单个酶的能力来检测用酶标记的单个蛋白质分子。在这个单分子免疫测定的第一步(图1A),在微球(直径μm)上形成一个三明治抗体复合物,结合的复合物用酶标记,如同常规的基于微球的ELISA。当测定含有极低浓度蛋白质的样品,蛋白质的比值分子(以及由此产生的酶标记复合物)与微球的比例很小(通常小于1:1),因此含有标记免疫复合物的微球百分比遵循泊松分布,导致单个微球上存在单一免疫复合物。例如,如果在(3000个分子)的蛋白质中捕获并标记了50μM的蛋白质,并且在200,000个微球上进行标记,则珠子,然后,。无法检测到这些低数量的酶使用标准检测技术(例如,平板阅读器)的标签,因为荧光染料由每种酶生成的产物扩散到一个大卵试验体积(通常为),并进入其中需要数十万种酶标签才能产生高于该水平的荧光信号背景。 芯弃疾单分子数字ELISA极速单分子POCT产品-数字化ELISA芯片,帮您数字化高灵敏检测,且微量样本多重指标检测;

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 数字化高敏ELISA芯片,低成本、便捷、快速进行微量样本的检测:1)微量样本即可检测;微量样本、微量试剂检测:流道高度只有几十微米,是原来微孔板高度的几十分之一,可有效节省样本量、试剂量;常规检测比较低只需要10ul样本即可进行完整检测。2)单个样本可以同时进行多指标的检测多重指标检测:单个样本,同时进行2-4个指标检测,可定制更多指标;芯片单孔同时检测2个指标芯片单孔同时检测4个指标3)灵活多通道检测:可以手动完成,主要在芯片上进行,对仪器不依赖(只需要移液枪和现成的荧光显微镜,即可实现检测),更小单元可做4-8个样本检测;初始的尝试成本极低(活动期8孔芯片只需要200元即可测试实验);相比普通ELISA试剂盒,更少96孔板价格2-4千元,每个检测孔20-40元;4)数字化的检测方式和检测结果;检测反应基底为阵列化、单分散排列的磁珠,可使用荧光显微镜进行可视化的免疫检测,原来的ELISA信号,转化成0或1,每个磁珠是否参与反应,反应效率如何。

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珠子以两种不同的方式读出。首先,在与100μMresorufin-阝-D孵育1小时后,用荧光板读出器以100μL方式读出珠子结合-半乳糖苷(RGP),一种荧光底物for阝-半乳糖苷酶。在平板阅读器上,检测限为15fMofS阝G(图2)。其次,将珠子加载然后将RGP溶液密封到阵列的孔中,单个酶的信号被允许在反应室中积累,并每30秒获取一次荧光图像。实验结束时获取阵列的白光图像以识别含有珠子的孔(含有珠子的孔散射光与空井不同)。荧光图像用于确定哪些微球具有相关的结合酶(从时间变化的荧光图像中强度增加)。图2显示了微球中含酶的比例与总体S阝G浓度的关系的对数-对数图。检测到的比较低酶偶联物浓度为350飞摩尔(zM),并通过外推信号等于的酶浓度计算得出的检测限(LOD)。 芯弃疾JX-8B数字ELISA,超敏检测,理论可达飞克级;

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多指标高通量数字ELISA芯片:微量样本多重检测的理想方案,多指标高通量数字ELISA芯片聚焦微量样本的多重检测需求,单个样本可同时测试2-8个指标,单个芯片支持8样本并行检测,实现“片内反应-片内检测”的一体化设计,有效推动设备小型化。其检测性能兼具超敏性与极速性,IL-6灵敏度达1pg/ml,检测范围1-1000pg/ml,PCT灵敏度10pg/ml,线性范围覆盖临床常见浓度区间。该芯片可替代高敏ELISA、Simoa等技术,在疾病初筛中快速筛选特异性蛋白标记物组合,为**分期判断、新药安全性评价提供准确数据。其开放灵活的设计支持2-10个单通道扩展检测区定制,适配不同检测场景,尤其适合珍稀样本的多因子分析,如长期化疗患者、婴幼儿的微量血样检测,在保证数据准确性的同时,比较大限度节省样本与试剂消耗。芯弃疾JX-8B单分子普惠化ELISA检测产品,微量检测,使用微量样本就能测试;什么是数字ELISA快速检测

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只有少量分泌蛋白可测量的可能性突显了蛋白质测量领域面临的挑战:医学上相关的生物标志物可能存在于非常低的丰度中。免疫测定仍然是是蛋白质生物标志物敏感和特异性测量的基础。然而,传统的免疫分析技术在检测不可测量的生物标志物时灵敏度不足,这些生物标志物肯定位于当前可检测范围之下。主流的传统免疫分析方法——包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光和电化学发光——的灵敏度下限约为10^-13M(~<0.1pM)。许多降低灵敏度的方法已被描述,包括拉曼增强信号检测、电感耦合等离子体质谱,但这些方法的数据表明其成功有限。非常规方法如亚飞摩尔级检测具有明显的权衡,例如程序较长或无法提供定量答案。
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