猪只可经自然放血或颈动脉放血(上图),本文只介绍自然放血。2.1将合乎要求的康复猪放置在操作台上,捆住四肢保定牢固。2.2颈部作剪毛和消毒处理(酒精棉球擦拭);杀猪刀消毒。生理盐水洗刷盛血容器一次,控干,盖好盖子。注意:少量剩余生理盐水在容器内无大碍,且有利于血清析出。2.4杀猪、放血至容器。自然放血很大的问题就是放血是否彻底。在实践中,经常出现猪只已死,血还没有放完的情况,加之自然放血也很易收到污染,因此作者建议,有条件的应尽量采取颈动脉放血术实行放血。3.血清析出。3.1将盛血的容器静置于室内,让其自然凝固,析出血清。不可摇晃,以免溶血。3.2一般在秋冬季10-20℃环境下,3-4小时即可析出血清。3.3在血清析出过程中,可在中间检查一次,若见血清上漂浮大块血凝块,则可用消毒手术刀轻轻划动,让血块分散,以利血清更好析出。3.4不同情况下,猪只采集血量和制得的血清量有差异。若放血完全,可参考表1得出血清量。我们的新生牛血清,具有良好的批次稳定性,确保您的实验数据准确可靠,助力科研成果产出。苏州动物血清哪家好
4.血清分装。4.1血清完全析出后,将血凝块捞出丢弃并妥善处理。4.2将容器内的血清用注射器抽取后,或用漏斗直接分装至空的生理盐水瓶中。注意装量不可太满,一般以容量的80%为宜,即标称500ml的实际装400ml。4.3剩余血清若混有较多血细胞,仍可收集使用。如有离心机,也可经3000转/分,经3分钟离心取上清液.5.血清水浴灭活;加入“双抗”。5.1将水浴锅加水调至56℃。水线以淹没血清的高水平线为宜。5.2血清置水浴锅,经30分钟水浴。5.3将血清冷却,加入“双抗”。建议按照每400ml血清添加青霉素1,000万单位、链霉素300万单位。现在也有按照100ml血清添加2.5ml的5%恩诺沙星注射液的。二者皆可。宁波羊血清厂家云海生物致力于为客户提供优良的产品和专业的服务,我们的专业团队将竭诚为您解答疑问。
何谓热灭活?有必要做热灭活吗?一般以56℃、30分钟来处理已解冻的血清,因为这一加热步骤可使补体去活性。补体所参与的反应有:溶细胞活性、平滑肌的收缩、肥大细胞和血小板组胺的释放,可增强吞噬作用,促使淋巴细胞、巨噬细胞的趋化。实验显示,经过正确处理的热灭活丨血清,对大多数的细胞而言是不需要的。因为,经过处理的血清对细胞生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。经过热处理的血清,沉淀物的形成会明显增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察像是“小黑点”,常会让研究者误以为是血清遭受污染。而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者认为是微生物的分裂扩增。因此,若非必须,可不做热灭活。
胎牛血清功能及作用牛血清是细胞培养中用量很大的天然培养基,含有丰富的细胞生长必需的营养成分,常用于动物细胞的体外培养,具有极为重要的功能。1.提供对维持细胞指数生长,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他等,能结合或调变它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。血清,在血浆中除去纤维蛋白分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白已被除去的血浆。其主要作用:1.血清提供:营养和能量来源;生长和粘附因子,肽和类固醇;载体蛋白。2.保护细胞:免受蛋白酶、毒性物质、PH值波动、机械剪切力、氧化及自由基的损伤。云海生物提供专业的技术支持和客户服务,我们的团队随时为您解答疑问,并提供实验方案和建议。
胎牛血清的主要作用:1、提供对维持细胞指数生长的,某些含量微小营养物、低分子营养物质,促进细胞生长繁殖;2、提供贴壁因子,是细胞贴壁、铺展在玻璃或塑料培养基质上所需因子的来源;3、提供蛋白酶抑制剂,中和剩余的胰蛋白酶的消化,使其失活,保护细胞不受伤害;4、提供pH缓冲,有酸碱缓冲液的作用,保护细胞不受伤害;(注:因此培养基加入胎牛血清后pH可能会发生变化,应根据实际情况再次调节pH)5、有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到祛毒作用。6、提供营养,内含各种蛋白可提供细胞分裂所需的营养物质。有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到祛毒作用。(注:如培养基成分已经较为丰富完善,例如DEME培养基,则血清提供的营养物质作用不明显。)选择云海生物的新生牛血清,就是选择专业与放心,我们始终与您并肩,共创美好未来。四川羊血清生产厂家
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当血清需要被解冻时,我们不建议大家把刚从-20℃中拿出的冰冻血清,直接放入4℃冰箱中过夜融化,也不要在室温进行过夜解冻。由于血清含有蛋白质等干物质,这类物质容易先融化析出,水这类溶剂后融化,导致血清产生沉淀,影响使用效果。因此,要尽可能保证所有成分同步融化,因此我们建议使用三步法融化,具体步骤见下表。需要注意的是,如果血清是储存在-80℃冰箱中,三步法解冻前,应先将血清转移至-20℃冰箱中存放1-2天。一次解冻后,分装至无菌离心管中,尽量保证每管是一次的用量,分装管解冻也遵循三步法,解冻后需全部用完。苏州动物血清哪家好