血清出现沉淀的问题:血清非人工产品,有些东西沉淀出来系自然现象;纤维蛋白原、盐析出,如磷酸钙等;胆固醇和脂肪酸;蛋白析出。沉淀在下列情况下还会增加:热灭活、37℃培养(常常由此引发歧异)、反复冻融、熔化中没有摇匀、gamma照射、长期存放在2-8°C。另外我们还发现:血清加入到RPMI1640中时,沉淀往往会发生或增加:pH升高时,沉淀会增加;在培养板或培养皿中,因为培养基的蒸发也会导致沉淀的增加。如何避免血清中产生沉淀“”按如下操作可避免沉淀的产生:(1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。(2)血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。(3)勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。(4)勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质;(5)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。(6)若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。我们拥有完善的冷链运输系统,确保马血清在运输过程中始终保持活性,为您的实验保驾护航。威海马血清采购平台
鸡血清成分的分析将鸡血通过离心技术分为血浆和血细胞,得到的血浆再进行冷冻处理后,利用快速融解法除去纤维蛋白原分离出的淡黄色透明液体或指纤维蛋白原即是血清。血浆约占血液总量的55%,其中含8%的血浆蛋白,通过盐析法可将其分为3类:白蛋白、球蛋白和纤维蛋白原,其中纤维蛋白原所占比例比较好小,所以比较好终得到的血清为60%~80%。血清中有90%~91%的水,6.5%~8.5%的蛋白质,2%左右的低分子量蛋白质,近年来对血清中的低分子量蛋白质研究较多,但在利用血清之前需要进行过滤提纯,除去血清中的血清蛋白和免疫球蛋白,然后对提纯的低分子量蛋白进行试验,BjorhallK等人[2]对目前多种去除血清中大蛋白的方法进行了分析研究,发现除蛋白的试剂盒更适用于试验使用,该试剂盒操作简易、方便,因只供一次性使用,所以很大降低了样品的交叉污染,其中多维亲和层析柱还可同时除去多种大蛋白。因此,血清样品利用之前要与多种技术相结合进行预处理,之后再进行相关研究。郑州新生牛血清生产厂云海生物的鸡血清,源自健康鸡只,经过严格筛选与提取,保证每一滴都纯净无比。
牛胎球蛋白的作用牛胎球蛋白是一种糖蛋白,它含多肽74%,己糖8.3%,氨基己糖5.5%,唾液酸8.7%,分子量为48.4kDa。牛胎球蛋白是由肝细胞分泌,体内有抑制胰蛋白酶活性,也是成骨作用的抑制剂。在体外试验中,牛胎球蛋白具有促进细胞贴壁、生长和分化的活性,可选择性诱导某些细胞程序性死亡,增强人巨噬细胞的吞噬作用。有研究发现,肿瘤细胞在无血清培养基中需要10个小时才能在塑料器皿上贴壁,而加入胎球蛋白后只需要2小时。悬浮细胞可内吞摄取胎球蛋白,细胞内钙离子升高,促使外泌体从细胞内分泌出来,从而介导细胞黏附。胎球蛋白是脊椎动物的血浆蛋白。具有高度同源性,在爬行动物、鱼、鸟、有袋类动物和哺乳动物中大量存在。它也是胎牛血清中丰富的球蛋白。
很多血清客户,会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题,这是没有根据的。血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,和厂家的加工生产方式密切相关。国产的血清,大多来自北方,由于价格低廉,保存环境都不好,从采集血、冷冻、运输到生产会经过多次冻融,每次冻融过程,就会析出部分纤维蛋白沉淀,这样,血清成品过滤后看起来反而更加的“干净”,很少有沉淀产生。进口的胎牛血清,过滤分装前很少会反复冻融,生产后的成品也是清澈的,但随着时间的推移,血清中的大量纤维蛋白会析出形成沉淀,当然,进口的新生牛血清,一般牛龄都在2周左右,血清中的各种蛋白含量明显偏高,生产后血清可能会浑浊,甚至有大量沉淀。当然,购买回来的血清都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程比较好在温度较低的状态下慢慢进行,否则沉淀相对较多,虽然沉淀并不直接影响血清的质量,但对细胞的显微观察有一定的阻碍。我们的鸡血清营养丰富,含有多种生长因子和必需营养物质,助力细胞培养更成功。
胎牛血清和新生牛血清的区别胎牛血清是在母牛怀孕3-8个月的时候,通过剖腹,心脏密闭穿刺采集血获取的胎牛的血清,丰富的营养因子能够满足科研客户多种细胞类型的需求。新生牛血清是小牛生下来之后取血,根据采集血时间的不同,分为类标准胎牛血清(特级新生牛血清)、优级新生牛血清和标准新生牛血清。其中有国内厂家所谓的“胎牛血清”,实际上是类标准胎牛血清,是小牛出生2小时内不吃母乳的情况下采集血获得的血清。保存血清的方法:我们建议血清应保存在-10℃至-20℃。若存放于4℃时,请勿超过一个月。若一次无法用完一瓶,建议无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。选择云海生物,就是选择了高质量的猪血清,我们严格把控生产流程,确保每一滴血清都符合标准。淄博羊血清培养基
云海生物的马血清,采用先进的生产工艺提取,保留了血清中的天然成分,更贴近生理状态。威海马血清采购平台
为什么要热灭活丨血清?加热可以灭活补体系统。焕活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,焕活淋巴细胞和巨噬细胞,在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活丨血清。有必要做热灭活吗?实验显示,经过正确处理的热灭活丨血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会明显的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。威海马血清采购平台