血清出现沉淀的问题:血清非人工产品,有些东西沉淀出来系自然现象;纤维蛋白原、盐析出,如磷酸钙等;胆固醇和脂肪酸;蛋白析出。沉淀在下列情况下还会增加:热灭活、37℃培养(常常由此引发歧异)、反复冻融、熔化中没有摇匀、gamma照射、长期存放在2-8°C。另外我们还发现:血清加入到RPMI1640中时,沉淀往往会发生或增加:pH升高时,沉淀会增加;在培养板或培养皿中,因为培养基的蒸发也会导致沉淀的增加。如何避免血清中产生沉淀“”按如下操作可避免沉淀的产生:(1)解冻血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。(2)血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。(3)勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。(4)勿将血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质;(5)血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。(6)若必须做血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。我们的胎牛血清经过严格的筛选和检测,确保不含任何有害物质,为您的细胞培养提供专业的生长环境。日照胎牛血清批发商
为什么要热灭活丨血清?加热可以灭活补体系统。焕活的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,焕活淋巴细胞和巨噬细胞,在免疫学研究,培养ES细胞,昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活丨血清。有必要做热灭活吗?实验显示,经过正确处理的热灭活丨血清,对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物的形成会明显的增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常?;崛醚芯空呶笠晕茄逶馐芪廴?,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。海南马血清厂家云海生物精选新生牛血清,严格把控生产环节,确保每一滴血清都符合高标准要求。
很多血清客户,会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题,这是没有根据的。血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,和厂家的加工生产方式密切相关。国产的血清,大多来自北方,由于价格低廉,保存环境都不好,从采集血、冷冻、运输到生产会经过多次冻融,每次冻融过程,就会析出部分纤维蛋白沉淀,这样,血清成品过滤后看起来反而更加的“干净”,很少有沉淀产生。进口的胎牛血清,过滤分装前很少会反复冻融,生产后的成品也是清澈的,但随着时间的推移,血清中的大量纤维蛋白会析出形成沉淀,当然,进口的新生牛血清,一般牛龄都在2周左右,血清中的各种蛋白含量明显偏高,生产后血清可能会浑浊,甚至有大量沉淀。当然,购买回来的血清都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程比较好在温度较低的状态下慢慢进行,否则沉淀相对较多,虽然沉淀并不直接影响血清的质量,但对细胞的显微观察有一定的阻碍。
何谓热灭活?有必要做热灭活吗?一般以56℃、30分钟来处理已解冻的血清,因为这一加热步骤可使补体去活性。补体所参与的反应有:溶细胞活性、平滑肌的收缩、肥大细胞和血小板组胺的释放,可增强吞噬作用,促使淋巴细胞、巨噬细胞的趋化。实验显示,经过正确处理的热灭活丨血清,对大多数的细胞而言是不需要的。因为,经过处理的血清对细胞生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。经过热处理的血清,沉淀物的形成会明显增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察像是“小黑点”,?;崛醚芯空呶笠晕茄逶馐芪廴?。而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者认为是微生物的分裂扩增。因此,若非必须,可不做热灭活。云海生物的鸡血清,源自健康鸡只,经过严格筛选与提取,保证每一滴都纯净无比。
1、牛血清的主要成分血清是一种很复杂的混合物,其组成成份虽大部分已为人所知,但还有一部分尚不清楚,而且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。(1)蛋白质:是牛血清中主要成份之一。除白蛋白外还有包括球蛋白,胎球蛋白,脂蛋白等,(2)多肽:血小板促生长因子能促细胞分裂,是多肽家庭的主要成员之一,是主要的促细胞增殖因子。(3)激丨素:激丨素对细胞的作用是多方面的。(4)其他成份除上述外,血清中还含微量元素,脂肪酸,特殊离子,维生素等。我们的马血清经过严格的质量控制,确保每批产品的稳定性和一致性,让您的实验数据更加准确。浙江胎牛血清生产商
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4.血清分装。4.1血清完全析出后,将血凝块捞出丢弃并妥善处理。4.2将容器内的血清用注射器抽取后,或用漏斗直接分装至空的生理盐水瓶中。注意装量不可太满,一般以容量的80%为宜,即标称500ml的实际装400ml。4.3剩余血清若混有较多血细胞,仍可收集使用。如有离心机,也可经3000转/分,经3分钟离心取上清液.5.血清水浴灭活;加入“双抗”。5.1将水浴锅加水调至56℃。水线以淹没血清的高水平线为宜。5.2血清置水浴锅,经30分钟水浴。5.3将血清冷却,加入“双抗”。建议按照每400ml血清添加青霉素1,000万单位、链霉素300万单位。现在也有按照100ml血清添加2.5ml的5%恩诺沙星注射液的。二者皆可。日照胎牛血清批发商