为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀?储存在2-8℃时,血清中的各种蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)和脂蛋白可能聚集而形成沉淀或可见的混浊物。这些沉淀的产生不会影响血清的质量。推荐在-20℃储存胎牛血清,避免反复冻融。如何避免沉淀物的产生?我们建议您在使用血清的时候,注意下列操作:?解冻血清时,请按照上述逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若血清解冻时温度变化太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。?解血清时,请随时轻轻地将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。?请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊,同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害,影响血清的质量。?血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,无需做此步骤。?若必须做血清的热灭活,请遵守56℃、30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。原则上血清添加量不要太多,通常分为5%、10%、20%几档。上海羊血清采购平台
-20°C冻存。胎牛血清解冻后,应按单次习惯用量分装,分装后的血清仍-20°C冻存。若置于4°C的血清,应在一周内用完,用量频率少推荐使用EvaCell免分装50ml的规格哦血清和培养基的配制,应遵循“现用现配”原则,保证更好的细胞培养效果。配好的培养液,应于一周内用完。血清避免反复冻融,避免在4°C或更高温度储存过久,否则会破坏血清中有效活性成分和被污染,影响血清品质。血清融化注意:在水浴过程中,血清的平面要完全浸在水中。在融化过程中要慢慢摇动瓶身,使血清混匀,但摇动中尽量不要产生泡沫!胎牛血清使用说明血清从-20℃取出后,融化,按推荐体积加入到基础培养基中,混匀,制备成新鲜完全培养基(整个操作需在无菌超净台中进行,注意无菌操作)。配制好的完全培养基推荐在4℃保存,应在1周内用完。海南动物血清订购动物血清补偿根底培养基中没有或量缺少的营养成分。
不管是国产还是进口血清,都是不测的(无四环素胎牛血去除外)。国外,的使用很严格,用量也很少,每头奶牛的产品包括血清都可以溯源的,因此可以做到胎牛血清中不含或含量极低;国内,的滥用已成了普遍现象,血清中残留很高,对细胞培养极为不利,这是国产血清质量差的根本原因。血源市场上的血清血源主要分为中国、北美、南美和澳洲。1、国产血清质量差,这是公认的,主要原因并不是生产厂家的责任,而是天然环境差和的大量使用。国内环境污染严重,同时饲养过程中极其滥用,有毒有害物质会大量残留在血清中,比较终不利于细胞的生长。2、南美血清,来源很多,如Bioind的巴拿马、Gibco的乌拉圭、巴西等,这些血清由于采集血的不可控性,质量参差不齐,当然,相对于国内血清来说好的多。另外,国内销售的南美血清大多颜色鲜红,如Sera Pro、Bioind、Gibco、Hylone等品牌,但阿根廷的血清例外,这可能和各国的采集血、生产工艺有关。
内含量越低,级别越高,以胎牛血清为例:血清中内含量≤10EU/ml时,此血清为特级胎牛血清;血清中内含量﹥10EU/ml,≤25EU/ml时,此血清为优级胎牛血清;血清中内含量≥25EU/ml时,此血清为标准级胎牛血清;不同厂家,不同批次的血清,内数值也可能有较大差异,因此很多血清厂家在名称上已不注明级别。但使用者仍可通过检测报告,自行甄别挑选,*胎牛血清,是由胎牛血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物,含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、、无机物等,其中大部分是已知的,小部分不清楚,这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。其中不含细胞、纤维蛋白和凝血因子。*胎牛血清在细胞培养方面通常优于其他类型的血清。由于胎牛从未接触过外界,与新生牛和小牛血清相比,抗体含量明显降低,抗体与培养细胞发生交叉反应的风险也较低,是理想的细胞生长补充剂。*为避免不同供体间的个体差异,能够更好保证实验数据的连续性和稳定,应使用同批次血清所有的血清可能保留一些纤维蛋白原。
鸡血清提取丁酰胆碱酯酶试验以通过离心提纯鸡血清得到的胆碱酯酶,继续进行农药残留相关敏感性检验,检验中同样采用Ellman法。探究鸡血清丁酰胆碱酯酶的酶学特性及其对有机磷和氨基甲酸酯类农药的敏感性[8],为农药残留的快速检验提供新的敏感酶源。虽然很多报道指出,丁酰胆碱酯酶对农药存在敏感性,但大多数试验研究对象都为马血清提取的丁酰胆碱酯酶,并没有用鸡血清进行比较,而李维[10]在试验前期对多种动物血清内丁酰胆碱酯的农药敏感性比较中发现,鸡血清内丁酰胆碱酯的农药敏感程度优于其他试验数据的禽畜类动物血清。并提供了体外丁酰胆碱酯酶对农药敏感性的基础研究结果,鸡血清中丁酰胆碱酯酶的比较适反应活性为35℃,pH值8.0;对农药的敏感测试反应中不存在过量底物的抑制效应,尤其对毒扁豆对碱性表现敏感试验中发现相比于马血清的丁酰胆碱酯酶,鸡血清的丁酰胆碱酯酶对盐酸多奈哌齐较为敏感。在通过试验中5种农药对2种酶活性抑制率的比较后发现,除了克百威外,鸡血清中的丁酰胆碱酯酶对其他4种农药的敏感性均高于马血清中的丁酰胆碱酯酶。因而,鸡血清中丁酰胆碱酯酶在含量丰富的同时对多种农药的敏感程度还高,必然可以作为检测源应用于酶抑制法检验中。采集血量达到采集血管容积的 1/3 为宜,不要超过 2/3。上海新生牛血清厂家
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胎牛血清在细胞培养中的作用:1.提供对维持细胞指数生长的,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。2.提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他等,能结合或调节它们所结合的物质活力。3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合,起到祛毒作用。4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。5.起酸碱度缓冲液作用。6.提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。7.参与细胞冻存。在细胞培养中,胎牛血清加入基础培养基的浓度大多为5%~20%(比较常见为10%)的。具体到不同试验,应依据文献报,或细胞类型或基础培养基的成分来确定相应浓度。胎牛血清应在-20℃储存,运输应干冰冷链运输,避免反复冻融,确保血清中因子活性不受影响,保证血清优良品质上海羊血清采购平台
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