佐剂由于不同个体对同一抗原的反应性不同,而且不同抗原产生免疫反应的能力也有强有弱,因此常常在注射抗原的同时,加入能增强抗原的抗原性物质,以刺激机体产生较强的免疫反应,这种物质称为免疫佐剂。佐剂除了延长抗原在体内的存留时间,增加抗原刺激作用外,更主要的是,它能刺激网状内皮系统,使参与免疫反应的免疫活性细胞增多,促进T细胞与B细胞的相互作用,从而增强机体对抗原的细胞免疫和抗体的产生。常用的佐剂是福氏佐剂(Freundadjuvant),其成分通常是羊毛脂1份、石腊油5份羊毛脂与石腊油的比例,视需要可调整为1:2~9(V/V),这是不完全福氏佐剂,在每毫升不完全佐剂加入1~20mg卡介苗就成为完全佐剂。我们通过多次传代,分辨同细胞、同代次、不同血清样品培养的细胞形态间的细微差异。郑州新生牛血清批发商
放射免疫法以不同稀释度的抗血清与质量标记抗原混合,孵育24h后,测定其结合率。通常以结合率为50%的血清稀度和为效价。如某抗血清的结合率为50%时的稀释度为1:15000,则该血清的效价就是1:15000。抗血清的效价,除由抗血清本身的性质决定外,还受标记抗原的质量、孵育时间,所用稀释液的成分及其pH等因素的影响,在工作中必须引起注意。(2)双向扩散法利用大分子抗原和抗体在琼脂平板上扩散,两者在相交处产生沉淀线,以观察和判断抗血清中是否有抗体及其浓度。球脂板的制备:100mlpH7.1的磷酸盐缓冲液加到15g的琼脂内,于水浴中加温搅拌,使琼脂完全溶解,趁热用纱布过滤,待溶液冷却到65°C左右时,加入叠氮钠(NaN3),使其在溶液中的浓度为0.1%。用移液管把琼脂放在干净平皿或玻片上,约3mm厚,待其冷却,完全凝固后,用打孔器打孔。中间孔内加适量抗原(容量为50ul)周围各孔内分别加入50ul1:2、1:4、1:8、1:16、1:32及不稀释的抗血清,37°下孵育24h,观察有无沉淀线产生,以判断血清的稀释度。常州牛血清生产商包括售前的标本收集,使用过程中不明白的地方,实验结束后的数据分析--云海生物。
2.取血方式不同胎牛血清:母牛怀孕3-8个月时,采用剖腹心脏密闭穿刺取血新生牛血清、小牛血清、供体牛血清:分别是取自新生牛(小牛)、成牛的血3.血清成分不同胎牛血清还未接触外界,血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分比较少;促细胞生长因子、促附因子、及其他活性物质等组分也不同于其他几类血清4.用途不同某些细胞的培养必须使用胎牛血清才行,如:干细胞、淋巴细胞、神经细胞、星状胶质细胞等;而有些细胞需要小牛血清就可以,如:肿瘤细胞等。使用浓度也不同,一般在10%-15%,有特殊要求的浓度在20%
瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃至-70℃低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀.一般厂商提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.血清中的沉淀物絮状物:主要是血清中的脂蛋白变性及解冻后血清中纤维蛋白造成,这些絮状物不会影响血清本身的质量.可用离心3000rpm,5分钟去除,也可不用处理.显微镜下"小黑点":经过热处理过的血清,沉淀物的形成会明显增多.有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点",常误认为血清受污染.一般情况下,此小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清质量,则应立即停止使用,更换另一批号的血清.切勿将血清在37℃放置太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中的有效成分会破坏而影响血清质量.在微生物的培育中要为培育的微生物供给成长因子。
决定血清的颜色的因素胎牛血清的颜色会根据血红蛋白(鲜红色)、胆红素(黄色)含量的不同而表现出黄色、淡黄色、橘红色、微红色。因胎牛血清为动物来源,同一品牌的不同批次间的胎牛血清颜色也会因为血红蛋白、胆红素含量的不同而有差异。造成血清沉淀较多的原因:①对血清进行了热灭活处理;②血清反复冻融;③血清长期4℃储存;④室温或者37℃融化血清;⑤长期室温储存。有关血清批间差异的疑问血清来源于动物,其组成成分有1000多种,血清成分的组成及含量受供体动物年龄、生理条件、营养条件而有差别。每个批次的血清成分百分比含量是不确定的,批间差异是存在的。尤其是一些较为难培养的敏感细胞,批间差异会表现得较为明显。供应蛋白酶克制剂,维护细胞免受死细胞开释的蛋白酶的损害。江西新生牛血清哪里有卖
长期保存血清必须在-10℃以下储存,并避免反复冻融。郑州新生牛血清批发商
IR(辐照)血清辐照型血清是将正常血清经过三次无菌过滤后再用钴-60辐射灭菌制得的血清。辐照血清是细胞培养中比较重要的天然培养基,它具有促进细胞增殖和诱导细胞分化等的生物学功能其质量的好坏直接影响着生物制品的安全性。功能:提供对维持细胞指数生长的,基础培养基中没有或量很少的营养物,以及主要的低分子营养物。提供结合蛋白,能识别维生素、脂类、金属和其他等,能结合或调变它们所结合的物质活力。是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。起酸碱度缓冲液作用。提供蛋白酶抑制剂,使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活,保护细胞不受伤害。应用适用于正常封闭与增殖旺盛的常规细胞系的培养等。郑州新生牛血清批发商
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