外泌体提取，PEG-base沉淀法，聚乙二醇（PEG）可与疏水性蛋白和脂质分子结合共沉淀，早先应用于从血清等样本中收集病毒，现在也被用来沉淀外泌体，其原理可能与竞争性结合游离水分子有关。利用PEG沉淀外泌体存在不少问题：比如纯度和回收率低，杂蛋白较多（假阳性），颗粒大小不均一，产生难以去除的聚合物，机械力或者吐温-20等化学添加物将会破坏外泌体等，因此发表文章时易受质疑。通过差速超速离心法（Differential Ultracentrifugation）从细胞培养基上清或血浆血清中提取外泌体。外泌体鉴定透射电镜，英瀚斯生物。河北外泌体电镜

外泌体表面有其特异性标记物（如CD63、CD9蛋白），用包被抗标记物抗体的磁珠与外泌体囊泡孵育后结合，即可将外泌体吸附并分离出来。磁珠法具有特异性高、操作简便、不影响外泌体形态完整等优点，但是效率低，外泌体生物活性易受pH和盐浓度影响，不利于下游实验，难以***普及。外泌体是大多数细胞分泌的40 - 150nm的膜泡，存在于细胞培养基、血浆、血清、唾液、尿液、羊水和恶性腹水等生物液体中。外泌体检测可找英瀚斯生物，测序、电镜、粒径分析都可做。河北外泌体电镜南京外泌体检测服务，优先南京英瀚斯。

外泌体中常见的细胞质蛋白是Rabs蛋白，是鸟苷酸三磷酸酶(GTPases,)家族的一种。它可以调节外泌体膜与受体细胞的融合，有文献报道称RAB4, RAB5和 RAB11主要出现于早期以及回收的核内体中，RAB7 和 RAB9主要出现于晚期的核内体。现有大量的研究发现外泌体中含有40种RAB蛋白。除了RAB蛋白，外泌体中富含具有外泌体膜交换以及融合作用的膜联蛋白（包括膜联蛋白1、2、4、5、6、7、11等）。外泌体膜上富含参与外泌体运输的四跨膜蛋白家族（CD63, CD81 和CD9)）、热休克蛋白家族（(HSP60, HSP70, HSPA5, CCT2 和HSP90以及一些细胞特异性的蛋白包括A33（结肠上皮细胞来源）、MHC-Ⅱ(抗原提呈细胞来源)、CD86(抗原提呈细胞来源)以及乳凝集素（不成熟的树突状细胞）。

外泌体没有限定单一的分离手段，多种手段都可以进行细胞外囊泡的富集。《指导要求》编写者们认为“高回收率，低特异性”的富集手段是指那些富集囊泡的同时会有大量的非囊泡组分被富集，甚至细胞的整个分泌组都会被掺入其中，归入这一类的分离手段主要包括通过改变电荷或通过高聚物作用的沉淀试剂盒、低分子量截流的超滤分离、超长时间和超高离心力的超速离心等。 目前较常用的外泌体提取方法是differential centrifugation (DC)——差速离心法。也有用试剂盒提取外泌体，但效率均不高。南京英瀚斯生物-外泌体检测服务_疾病医学模型_。

外泌体鉴定分为三个层面：透射电镜（transmission electron microscope，TEM）、Nanosight粒径、蛋白标志物。透射电镜分辨率为0.1~0.2nm，适合外泌体双层囊膜超微结构观察，可观测样本中是否存在外泌体样结构（通常为茶托型或一侧凹陷的半球形），同时可测量外泌体大小。外泌体表面存在特异性标志物分子，如CD9、CD81、CD63等。以琳生物可以提供Western blot和流式细胞术的鉴定结果。外泌体（Exosome）参与细胞之间的交流，物质的运输以及正常生理过程的维持、还与许多疾病息息相关。外泌体检测服务|外泌体检测服务|科研课题外包|实验外包服务。河南外泌体测序

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外泌体的研究是一个活跃的研究领域，正在进行的技术和实验进展可能会产生关于它们的异质性和生物学功能的有价值的信息，并增强利用它们的***和诊断潜力的能力。是否外泌体的产生和内容物随年龄变化？这些信息可以为组织衰老、***退化和程序化或过早老化提供新的见解。EVs和/或外泌体是否先于地球上单细胞有机体初次出现？这是一个大胆而诱人的猜测。单外泌体的鉴定和分离以及低温电子显微镜分析有可能明显提高我们对外泌体基础生物学的理解以及它们在应用科学和技术中的应用。河北外泌体电镜