临床资料 31例乳腺患者均为女性,年龄26~62岁,中位年龄49岁。病程5天~18个月。其中浸润性导管23例,浸润性小叶*6例,粘液2例。肿块比较大径1.4~6.5cm。
2.2 组织芯片质量 自行设计和制做的组织芯片能够满足观察研究的要求,但由于为手工所制,组织芯排列不够整齐,且0.5mm直径组织芯在HE染色和免疫组化染色过程中易发生位置滑动,并有少量脱片。
2.3 组织学检查 乳腺浸润性导管细胞异型性较显现,胞质丰富,红染、淡红染或透明,核大,核仁明显,核分裂像易见,成不规则条索、巢状、片状排列,可见腺样结构。浸润性小叶**细胞较小,相互间粘附性差,稍松散,常呈单排列样浸润于胶原纤维束间,围绕正常导管呈同心圆状排列,部分病例见小巢状、腺泡状结构。粘液腺*见小簇细胞成腺状、小巢状散在漂浮于粘液湖中。
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目的 比较抗原修复对多聚甲醛固定脑组织冰冻切片免疫组化结果的影响。 方法 成年SD大鼠用4%多聚甲醛经心腔灌注、固定后,分别经15%及30%蔗糖梯度脱水后进行冰冻切片(10μm),取相同部位切片20张,用兔抗Ach-M 2 受体多克隆抗体和小鼠抗DA-D 2 受体多克隆抗体作S-P免疫组化染色。 结果 经抗原修复的冰冻切片组的阳性结果比未经抗原修复组有明显提高。 结论 本实验次发现多聚甲醛固定的组织冰冻切片经抗原修复可以提高免疫反应敏感性或提升抗体效价。机制可能与多聚甲醛固定后对抗原有封闭作用有关。山东组织免疫组化公司电话融享生物公司提供免疫组化,低价格,高服务,提供售后服务。
众所周知,冰冻切片较突出的优点就是能够较完好地保存抗原的免疫活性 ,即具有抗原敏感性高的优点 。因此对冰冻切片通常不进行抗原修复 ,而在作免疫组化的研究时往往需要对组织进行固定,固定液(如多聚甲醛、福尔马林)使组织中的许多氨基酸残基在分子内或分子间形成醛键,使得不少抗原决定簇被封闭。同时,由于甲醛的聚合作用,使蛋白分子间相互交联形成大分子网络,也导致了抗原有一定的封闭作用 ,从而降低了抗原敏感性。考虑到以上原因,我们对冰冻切片进行高温高压抗原修复并作对比研究。
目的 探讨不同规格组织芯片在乳腺相关基因产物检测中的应用价值。方法 采用微波修复免疫组织化学S-P法和组织芯片技术,检测ER、PR、nm23、Her-2、p53在31例乳腺组织中的表达,并与常规病理学方法进行比较分析。结果 不同规格组织芯相比较,免疫组化结果几乎完全一致。常规制片免疫组化阴性,而组织芯片免疫组化阳性者包括ER2例,PR1例;常规制片免疫组化阳性,而组织芯片免疫组化阴性者包括nm23、Her-2各1例。部分病例常规制片免疫组化和组织芯片免疫组化阳性表达强度略有不同。结论 组织芯片的免疫组化结果与常规制片免疫组化比较,经统计学处理,差异无显现性(P>0.05)。组织芯片技术有良好应用价值和广阔发展前景。上海免疫组化切片 不掉片,厚薄均匀找上海融享生物科技有限公司价格更低 服务更好。
色反应的控制 免疫酶染色应注意控制:①成色质浓度和温育时间可调节 ,增加成色质的量和/或增加底物温育时间,可增加反应产物强度。着色太深可减少温育反应时间。②过氧化物酶显色时,H2O2较大浓度将使显色反应过快而致背景加深;过量H2O2可能88酶的活性。
4.复染 根据所用的染色方法和呈显颜色等,可选用适当的复染方法。如阳性结果呈红或棕色,则用苏木素将细胞核染成兰色,以便定位检测。也可用1%~2%甲基绿复染。
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这些常用免疫组织化学方法的原理如下:
1. 免疫荧光细胞化学技术
将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察.当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后会发出一定波长的荧光,从而可以确定组织中的抗原定位或定量.
2. 免疫酶细胞化学技术
是免疫组织化学研究中较好常用的技术.基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用,然后加入酶的底物,生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒,通过光镜或电镜,对细胞或组织内的相应抗原进行定位或定性研究.
3. 免疫胶体金技术
就是用胶体金标记一抗,二抗或其他的能特异性的结合免疫球蛋白的分子(如葡萄球菌A蛋白)等作为探针对组织或细胞内的抗原进行定性,定位或定量研究.由于胶体金的电子密度高,多用于免疫电镜的单标记或多标记的定位研究
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