免疫组织化学（Immunohisochemistry）检测技术曾被公认为病理学发展史上的第二个里程碑，此项技术发展到现在，较好充实了病理学的内容，使病理诊断结果更精确，将病理学提高到了形态和功能相结合的水平。免疫组织化学方法的敏感性和特异性直接影响诊断结果的准确性。近两年来，在本科同志的配合下，笔者已做免疫组化420例，取得了很好的效果，并且明显的提高了诊断结果的准确性，支持了对临床病人的诊疗。现提出以下五点供同道借鉴融享生物专注于病理实验 免疫荧光,HE染色服务实验如果你有需要可以找融享生物。山东免疫学免疫组化检测

免疫胶体金技术

免疫胶体金技术是以胶体金这样一种特殊的金属颗粒作为标记物。胶体金是指金的水溶胶，它能迅速而稳定地吸附蛋白，对蛋白的生物学活性则没有明显的影响。因此，用胶体金标记一抗、二抗或其他能特异性结合免疫球蛋白的分子（如葡萄球菌A蛋白)等作为探针，就能对组织或细胞内的抗原进行定性、定位，甚至定量研究。由于胶体金有不同大小的颗粒，且胶体金的电子密度高，所以免疫胶体金技术特别适合于免疫电镜的单标记或多标记定位研究。由于胶体金本身呈淡至深红色，因此也适合进行光镜观察。如应用银加强的免疫金银法则更便于光镜观察。

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基本原理编辑

抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性，免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来，以此作为抗原或半抗原，通过免疫动物后获得特异性的抗体，再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的，因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部位显示出来，以期达到对组织或细胞中的未知抗原进行定性，定位或定量的研究。分类编辑

免疫组织化学技术按照标记物的种类可分为免疫荧光法、免疫酶法、免疫铁蛋白法、免疫金法及放射免疫自显影法等。

免疫荧光方法

是较好早建立的免疫组织化学技术。它利用抗原抗体特异性结合的原理，先将已知抗体标上荧光素，以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原，在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光，从而可确定组织中某种抗原的定位，进而还可进行定量分析。由于免疫荧光技术特异性强、灵敏度高、快速简便，所以在临床病理诊断、检验中应用较广。2）免疫酶标方法

免疫酶标方法是继免疫荧光后，于60年代发展起来的技术。基本原理是先以酶标记的抗体与组织或细胞作用，然后加入酶的底物，生成有色的不溶性产物或具有一定电子密度的颗粒，通过光镜或电镜，对细胞表面和细胞内的各种抗原成分进行定位研究。免疫酶标技术是较好常用的技术。该方法与免疫荧光技术相比的主要优点是：定位准确，对比度好，染色标本可长期保存，适合于光、电镜研究等。免疫酶标方法的发展非常迅速，已经衍生出了多种标记方法，且随着方法的不断改进和创新，其特异性和灵敏度都在不断提高，使用也越来越方便。在病理诊断中广为使用的有ABC法、SP三步法、即用型二步法检测系统等。

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    ——90年代分子杂交技术、原位杂交技术、免疫细胞化学分类方法迅速发展。——2000年各种免疫组化技术更加成熟，使免疫组化技术成为当今生物医学中形态、功能代谢综合研究的一项有力工具。其应用范围深达医学各个学科，是目前生命科学工作者应该掌握的基本技术之一。免疫组化技术技术分类（1）根据染色方式分成：①贴片染色②漂浮染色（2）根据Ag—Ab结合方式分成：①直接法②间接法③多层法（3）按标记物的性质分成：①免疫荧光技术（免疫荧光法）②免疫酶技术（酶标抗体法、桥法、PAD法、ABC法）③免疫金属技术（免疫铁蛋白法、免疫金染色法、蛋白A金法）免疫组化技术标记物（1）必要性：组织细胞内Ag—Ab结合反应一般是不可见的，若在镜下检测，则必须具有可视性标记物。（2）常用标记物①荧光素：较常用的是异硫一氰酸荧光素（Fluoresceinisothiocyanate，FITC）——荧光显微镜下呈绿色荧光四乙基罗达明（rho—damineRB200）——荧光显微镜下发橙红色荧光②酶：辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶。③生物素：（Biotin）④铁蛋白金等：主要应用于免疫电镜。其他：如同位素（因涉及污染和防护难一般不用）免疫组化技术应用凡是组织细胞内具有抗原性的物质。哪里有比较好的免疫组化服务融享生物。山东免疫学免疫组化检测

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意义编辑

近年来，随着免疫组织化学技术的发展和各种特异性抗体的出现，使许多疑难得到了明确诊断。在常规病理诊断中，5%-10%的病例单靠H.E.染色难以作出明确的形态学诊断。尤其是免疫组化在诊断和鉴别诊断中的实用价值受到了普遍的认可，其在低分化或未分化的鉴别诊断时，准确率可达50%-75%。免疫组织化学的临床应用主要包括以下几方面：

⑴恶性的诊断与鉴别诊断；

⑵确定转移性恶性的原发部位；

⑶对某类进行进一步的病理分型；

⑷软组织的一般需根据正确的组织学分类，因其种类多、组织形态相像，有时难以区分其组织来源，应用多种标志进行免疫组化研究对软组织的诊断是不可缺少的；

⑸发现微小转移灶，有助于临床方案的确定，包括手术范围的确定。

⑹为临床提供方案的选择。

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